乳康舒对未孕雌性大鼠乳腺增生药效的初步研究

乳康舒对未孕雌性大鼠乳腺增生药效的初步研究

王一丹1孙伟2李文美2房辉3

王一丹1孙伟2*(通信作者)李文美2房辉3

（1潍坊医学院山东潍坊261042）

（2潍坊医学院附属医院甲状腺乳腺外科山东潍坊261031）

（3青岛市市南区社区卫生服务管理中心山东青岛266071）

【摘要】目的通过用乳康舒与消乳散结两种药物对大鼠乳腺增生模型的病理结果对比，筛选临床上适合未孕女患者的药物。方法采用肌肉注射苯甲酸雌二醇和黄体酮改进法制作大鼠乳腺增生模型，对乳腺导管上皮细胞数量、小叶腺泡数量和腺泡的平均面积、周径、腺泡腔内分泌物做定量定性对比。结果乳康舒较消乳散结对模型大鼠乳腺导管上皮细胞数量减少不明显，小叶腺泡面积和周径减小明显，腺泡腔内分泌物减少或消失，两者比较有统计学意义。结论乳康舒治疗临床上以小叶增生为主的未孕女患者效果更佳。

【关键词】乳康舒消乳散结乳腺增生模型病理

乳腺增生是临床上最常见的一种综合性乳腺疾病，目前临床分型尚不统一。国内对乳腺增生分类不统一，多数学者趋向于将其分为乳痛症和乳腺囊性增生[1]。为了完善对临床上无法明确分型的乳腺增生进行更精确的药物治疗，根据患者年龄和生理阶段不同，研究临床上未孕女性患者。故采用未孕雌性Wistar大鼠制造乳腺增生模型，对比乳康舒与消乳散结两种药物对未孕大鼠乳腺增生模型的病理结果以判断疗效。此模型已被国内学者证实其可行性[2]。

1实验材料

1.1动物:Wistar种系健康未孕雌性大鼠30只，SPF级，8周龄,体重150～200g，由青岛市实验动物和动物实验中心提供,合格证号:SCXK(鲁)20090007。

1.2药品:苯甲酸雌二醇注射液,天津金耀氨基酸有限公司出品,生产批号1007251;黄体酮注射液,浙江仙琚制药出品,生产批号1200702。乳康舒胶囊,江苏晨牌药业出品，生产批号：110815;消乳散结胶囊,山东省步长神州制药出品,生产批号：120705。

2实验方法

2.1分组将大鼠随机分4组,对照1组、对照2组、实验组（乳康舒组、消乳散结组）。其中两对照组各5只，两实验组各10只，给予两实验组每只大鼠分别做标记并记录初始体重。对照1组一期实验同实验组，对照2组给予注射生理盐水，实验组均按0.5mg/kg给予肌肉注射苯甲酸雌二醇，1次/d，连续5d，继而改用肌注黄体酮5mg/kg，1次／d，连续5d，停药5d。第16天起同前反复，共4个周期。第61天给予每只大鼠称重并记录，手术取各组大鼠的左侧第2对乳腺组织，经石蜡包埋做HE染色，光镜下对比证实模型制造成功。然后按照正常成人服用临床药物的计量与大鼠所需药量进行换算（人按60kg标准体重算体表面积），给乳康舒组大鼠灌服乳康舒药液2.85g/kg，1次/d。消乳散结组灌服消乳散结药液3g/kg，1次/d。均连续服用21天,停药2天后取实验组及对照1组大鼠的第2对右侧乳腺组织，经HE染色法光镜下查看各项观察指标。

2.2观察指标用药前后以目测乳头的大小、红肿度、游标卡尺测量乳头高度、直径对比。手术取各组大鼠第2对乳腺组织,HE染色显微镜下进行检测各项参数：导管上皮细胞数量、小叶腺泡数量、腺泡腔内分泌物、腺泡腔面积及周径。每只大鼠随机取片子一张，每张片子随机取小导管大于2个的视野。

2.3统计学方法

采用image-pro-plus6.0图像分析软件进行细胞数目、面积、周径计量，数据用SPSS17.0处理。用药前后的各组采用配对t检验，不同组之间采用独立样本t检验,检验水平均为P=0.05。

3结果

用药后实验组的模型大鼠的乳头大小明显较用药前小，已无红肿，乳头高度降低，对照组均无明显差别。模型和正常组的病理结果对照如A、B图所示，用药后的乳康舒组与消乳散结组如C、D图所示。用药前后各组病理结果对比可知，两对照组前后均无差别（P>0.05），故无统计学意义。乳康舒组与消乳散结组比较：假设H1=H0，ɑ=0.05.levene检验显示各项参数sig均大于0.05,方差不齐性，进行均值T检验结果显示导管细胞数量P>0.05,无显著差异，而小叶腺泡数量与腺泡面积P值<0.01，腺泡周径P<0.05，有显著的差异。故乳康舒治疗未孕乳腺增生模型大鼠的效果佳。

4讨论

乳腺增生发生的原因主要与体内激素紊乱有关，导致乳腺腺体增生过度或复旧不全，组织结构紊乱，乳腺导管上皮和纤维组织不同程度的增生和末梢腺管或腺泡形成囊肿，临床观察抗雌激素治疗乳腺增生症有效支持这一观点[3]。雌激素对乳腺发育起关键作用，本实验使用雌激素注射未孕雌性大鼠,通过扰乱其体内的性激素分泌,刺激乳腺导管生长，孕激素促进乳腺小叶腺泡发育[4]。第5版《超声医学》里提到根据乳腺质地将乳腺声像分为了间质型、中间型、导管型，其中导管型的多见于成熟未婚女性，通常伴有经前期乳房胀痛，由于雌激素分泌增加导致卵巢分泌紊乱，容易造成乳腺结构不良[5]。本文的实验模型制作过程进行了改进，将两种激素按照大鼠生理周期（4～5天）进行反复注射，附带的刺激同时造成大鼠恐惧、焦虑、紧张等不良情绪，更好地模拟了人类的生存状态和生理变化。因此根据本实验中监测的各项指标结果可以综合判断，增生模型符合乳腺结构不良的标准，与临床上常见的未孕女性乳腺增生相似度高。

实验结果发现乳康舒与消乳散结胶囊给药后，前者较后者对模型大鼠乳腺导管上皮细胞数量及腺泡的数量没有明显变化，可能与用药时间较短有关。但在数量无明显差异的情况下，腺泡的面积和周径减少差异显著，更加可以证明药物的疗效显著。

乳康舒胶囊在临床上应用广泛，虽然只有6种中药成分：鹿角、淫羊藿、郁金、白芍、王不留行、丹参。但以鹿角为君药，益肾补肝，补气温阳，调摄冲任，活血消瘀，有治疗乳痈肿痛的功效，已有相关研究证明鹿角对乳腺增生的作用[6]。淫羊藿，温补肾阳，辅助鹿角增强温补肾阳，并在内分泌上具有雄性激素样作用，对因雌激素诱导的乳腺增生有良好的治疗作用。郁金、白芍、丹参主要作为辅药行气解郁，活血调经，共为佐药，治胸腹胁肋诸痛。王不留行具有行血通经、催生下乳之功效，还能显著的促进乳腺上皮细胞增殖[7]。目前诸多文献和临床应用证明乳康舒在治疗乳腺增生上效果显著，却未有学者详细研究其在临床上的适用范围。本文在此结合中西医理论，并通过实验验证乳康舒胶囊在治疗以小叶增生为主的未孕女患者中效果更佳。大鼠对药物的耐受性比人类大，实验过程中按照体表面积计算大鼠用药的药量，是按照正常女性的平均体重与大鼠进行换算，临床上不同女性体重和体型的差异无法排除，不能完全保证该药物适用于每个人。至于是否适用于其他年龄段、其他病理类型的乳腺增生，还需要进一步细致研究。

参考文献

[1]谷振声,姜鸿刚.现代乳腺疾病诊断治疗学[M].北京:人民军医出版社,1997：73.

[2]陈志春,段晓波,胡芝华.大鼠乳腺增生实验方法及药物作用观察[J].中国药理学通报.1991,7(2):156.

[3]辛智芳.乳腺增生症的分类和诊治[J].中华乳腺病杂志.2008,2(6):689—694.

[4]江青东，霍军，程会昌.大鼠不同时期血液中雌激素及孕激素的变化规律研究[J].家畜生态学报.2011,32(5):60-62.

[5]周永昌，郭万学.超声医学.第5版[M].科学技术文献出版社.2006:140-153.

[6]徐国兵，王峥.鹿角对大鼠乳腺增生模型的治疗作用[J].中国药科大学学报.2006,37（4）:349-352.

[7]秦君，李庆章，高学军.王不留行主要成分对小鼠乳腺增生上皮胞增殖及?-酪蛋白表达的影响[J].中国农业科学.2008,41（8）:2442-2447.