基质金属蛋白酶-9联合心肌钙蛋白I检测对病毒性脑炎合并心肌炎早期诊断的意义

基质金属蛋白酶-9联合心肌钙蛋白I检测对病毒性脑炎合并心肌炎早期诊断的意义

王美丽周全陈方焘

王美丽周全陈方焘（莱西市中医医院山东莱西266600）

【摘要】目的探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）联合心肌钙蛋白Ⅰ（CTnI）检测对病毒性脑炎合并心肌炎早期诊断的意义。方法选择90例符合病毒性脑炎诊断患儿，按有无合并心肌炎情况分为两组，其中病毒性脑炎组50例，合并心肌炎组40例，并选取20例健康体检儿童为对照组。用ELISA法测定所有受试者血清MMP-9和CTnI水平。结果病毒性脑炎合并心肌炎和病毒性脑炎组患儿与对照组MMP-9首次测定分别为423.18±99.26、293.23±75.9、118.89±66.87；三组CTnI首次测定为2.73±1.25、0.76±0.53。与对照组相比，病毒性脑炎组和病毒性脑炎合并心肌炎患儿MMP-9、CTnI水平明显升高，p均<0.05，且合并心肌炎者血清MMP-9、CTnI水平亦显著高于病毒性脑炎组（p<0.05）。结论血清MMP-9联合CTnI检测在病毒性心肌炎的早期诊断中有重要意义。

【关键词】病毒性脑炎心肌炎基质金属蛋白酶-9心肌钙蛋白Ⅰ

【中图分类号】R446.8【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）16-0059-02

目前临床上广泛应用肌酸激酶同工酶(creatinekinaseisoenzymesMB，CK-MB)作为检测心肌损伤的重要指标，心肌钙蛋白I(cTnI)的检测也逐步开展。近年对基质金属蛋白酶家族(matrixmetalloproteinases，MMPs)在心肌损伤和神经系统炎症方面的研究一直是基础和临床研究的热点，文献报道很多，也取得了一些重要的成果。但对于病毒性脑炎、病毒性心肌炎的研究一直未能联系起来。因此笔者对病毒性脑炎，病毒性脑炎合并心肌炎患儿进行MMP-9、cTnI、CK-MB联合检测，探讨它们在病毒性脑炎合并心肌炎早期诊断的意义。

1对象和方法

1.1对象：(1)试验对象及诊断标准：病毒性脑炎患儿采用文献[1]诊断标准，共选取我院儿科2009年6月至2011年6月住院患儿90例，其中男48例，女42例，年龄8个月～11岁；均在夏秋季节发病，患儿既往健康，均已按计划免疫完成流脑疫苗接种，1岁以上(92%)已接种乙脑疫苗，1岁以下尚未接种；多有发热、头痛、恶心、呕吐症状，部分有意识障碍、精神行为异常、抽搐等，其中昏迷4例。合并心肌炎患儿诊断标准采用文献[2]。(2)分组：病毒性脑炎合并心肌炎组40例，男24例，女16例，年龄8个月～10岁。病毒性脑炎组50例，男24例，女26例，年龄1～11岁。对照组20例，男11例，女9例，年龄7个月～12岁，均为健康体检儿童。分组资料差异无显著性，有可比性。

1.2标本采集：病毒性脑炎患儿组于就诊或住院时首次采血，入院第10天第二次采血。病毒性脑炎合并心肌炎患儿于出现心血管症状或检查异常时首次采血，10d后第二次采血。正常对照儿童空腹静脉采血一次。

1.3检测方法：用酶联免疫吸附法(ELISA)定性检测柯萨奇病毒抗体(CBV-IgM)、埃可病毒抗体(Ech-IgM)、单纯疱疹病毒抗体(HSV-IgM)，试剂由美国ADL公司提供；应用双抗体夹心ABC-ELISA试剂盒检测血清MMP-9水平(试剂盒由美国R&D公司提供)；应用ELISA试剂盒定量检测血清cTnI(试剂盒由深圳市惠安生物科技有限公司提供)；应用CK-MB采用速率活度法(试剂由北京九强生物技术有限公司提供)。

1.4统计学方法：采用统计学分析软件包SPSS11.0进行统计学分析，试验数据用均数±标准差表示，以α＝0.05为检验水准。采用方差分析。

2结果

入院时各组间病毒抗体检测情况见表1。各组血清MMP-9、cTnI、CK-MB检测结果见表2，3。

注：与对照相比，aP<0.05；与病毒性脑炎组相比，bP<0.05

表3三组儿童第二次血清MMP-9、cTnI、CK-MB检测结果

3讨论

病毒性脑炎是病毒感染，多数系肠道病毒感染所致，夏季多见，2～6岁小儿多见，近年来婴幼儿感染呈上升趋势。临床上约有20%左右并发心肌炎，治疗困难，预后较差，给临床医生带来一定困难。

目前，仅能在25%～33%的中枢神经病毒感染病例中确定其致病病毒，其中80%为肠道病毒。本试验中，两组试验组肠道病毒阳性率为40%，在病毒性脑炎合并心肌炎组和单纯脑炎组之间差异无统计学意义(P>0.05)。总的阳性率比有关文献报道的低[3]，这可能与选取的病例、试验方法、试剂及采血的时间的选择不同有关。其中，试剂的不同可能占主要地位。并且病原学只能确定病毒感染，不能提示是否有心肌损害。病原学的确定为本试验的顺利进行确立了科学依据。

MMPs是一组锌钙依赖性蛋白水解酶家族，在组织重塑中发挥重要作用，其正常表达是维持心脏结构和心功能正常的重要因素。研究表明，许多心血管疾病均发现的MMPs表达和活性改变或MMPs/TIMPs比例失调。根据底物特异性、氨基酸相似性及DNA序列，MMPs被分为间质胶原酶(包括MMP-1、MMP-8、MMP-13)、明胶酶(MMP-2、MMP-9)、基质降解酶(MMP-3、MMP-7、MMP-10、MMP-11)和膜型MMPs(MMP-14、MMP-15)。MMP-9时与心肌损害密切相关的一种。病毒感染后引发炎症反应时，体内炎症细胞(中性粒细胞、单核细胞、吞噬细胞、淋巴细胞)和血管内皮细胞黏附相互诱导产生MMP-9。MMP-9通过降解细胞外基质(extracellularmatrix，ECM)和心肌内血管基膜，心肌胶原纤维降解较多，从而使限制心肌过度拉长力量减弱，导致心肌细胞滑落、心腔扩大及心力衰竭。国内外研究表明MMP-9在心力衰竭中表达明显增高，MMP-9/TIMP-1比值明显高于正常[4-5]。Thomas等[6]、Schwartzkopff等[7]对儿童晚期扩张型心肌病研究发现左室心肌中选择性MMP-3、MMP-9活性上升，同时伴有心室壁变薄、心室扩大、心功能降低。MMP-2、MMP-9通过降解ECM和脑血管基膜、破坏血-脑脊液屏障(bloodbrainbarrier，BBB)，使BBB通透性增高或开放，引起脑毛细血管内水分及血浆蛋白外渗，导致细胞间隙内水分增多，形成血管源性脑水肿和继发性脑组织损伤[8]。向大鼠脑内注入MMP-9或诱导MMP-9的产生可导致MMP-9破坏ECM和BBB开放[9]。这可以合理解释本试验结果，在病毒性脑炎合并心肌炎组和病毒性脑炎组MMP-9明显高于对照组，病毒性脑炎合并心肌炎组MMP-9又明显高于病毒性脑炎组。

cTnI是20世纪90年代以来研究的热点，其在急性心肌梗死(acutemyocardialinfarction，AML)中的研究相当多，结果显示其比CK-MB特异性、灵敏度更高，已经成为急性心肌梗死诊断的“金标准”。在病毒性心肌炎中也陆续有研究报道，基本上也支持上述观点。cTnI属于心肌结构蛋白，94%固定于肌原纤维上，只有6%游离于胞浆中，为可溶性。心肌受损早期，游离于胞浆中的cTnI释放入血，形成第一个血清高峰(4～6h)。心肌受损持续并加剧，不可溶性cTnI也逐步释放入血，形成第2个高峰。cTnI在血中可持续一周[10]。本试验在脑炎合并心肌炎中，cTnI都有不同程度升高，而且大部分都显著升高，而在单纯脑炎和对照组中却没有明显变化。这证实了以往文献的结论，也有文献述及在病毒性心肌炎早期，cTnI并不升高。笔者认为，考虑有心肌炎时，主要通过心脏听诊异常患儿出现临床症状和体征，同时辅以心电图以及心肌酶检查而定。通常只有病情进展到一定程度，进而再进一步检查证实，此时可能已经历时几天，cTnI已经明显升高，所以得到的数据都是阳性。

CK-MB一直以来是心肌受损的主要检测项目，但其在血清中历时很短，因而其诊断特异性差。在本试验中，有3例CK-MB正常，但MMP-9、cTnI均阳性，是因为检测时CK-MB已恢复正常，如果此时认为无心肌炎，显然没有道理。因此，CK-MB可以作为一种必要的辅助检查，能进一步提供诊断依据。

通过的MMP-9、cTnI、CK-MB联合检测，复习以往文献，笔者有足够的理由认为MMP-9比cTnI、CK-MB特异性、灵敏度高，而CK-MB特异性灵敏性则最差。MMP-9联合cTnI检测在病毒性心肌炎的早期诊断中有重要意义。

参考文献

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