血液标本处理方式对生化检验结果的影响

血液标本处理方式对生化检验结果的影响

黄坚尧肖鸽飞

黄坚尧肖鸽飞

（珠海市妇幼保健院广东珠海519001）

【摘要】目的探讨血液标本的放置时间和方式对多项生化指标检测结果的影响。方法抽取101份病人血液标本3管/人，分别按三种不同方式处置:A组标本抽血后30min内离心分离血清进行多项生化指标检测;B组标本30min内离心但不去盖,放于4℃冰箱内存放,24h后检测标本的生化指标;C组标本不离心直接存放于4℃冰箱内,24h后离心检测标本的生化指标。根据本实验室开展的生化项目,本研究选择了ALT、AST、ALP、GGT、TP、ALB、AFU、CK等36项生化指标为研究对象。结果我们将A组结果为基准，与A组结果比较,B组的AST、LDH、HBDH、CKMB、Zn增高,ALP、GGT、TP、ALB、AFU、T-BIL、D-BIL、CRE、UA、Glu、Cys-C、TG、HDL-C、ApoA、RF、CRP、AMS下降，有统计学意义(P＜0.05)。C组和A组结果比较，AST、BUN、HBDH、CKMB、LDH、HBDH、CK、CKMB、Mg、Zn增高,ALP、GGT、ALB、T-BIL、D-BIL、CRE、Glu、CHO、ApoA、ApoB、RF、CA、AMS下降，有统计学意义(P＜0.05)。C组和B组结果比较，AST、TP、BUN、Cys-C、LDH、HBDH、CRP、Zn增高,ALP、T-BIL、D-BIL、CRE、Glu、ApoB、ASO、CA下降，有统计学意义(P＜0.05)。结论本实验证明血标本离体后会因不同的放置时间和方式而引起生化检验值发生变化,影响相关疾病的诊断准确。因此，实验室的新收的不能及时检测的生化标本必须尽快地分离血清，放于4℃冰箱内或者冷冻起来，以免影响检测的结果，从而对临床疾病的诊疗造成影响。

【关键词】血液放置时间处置方式生化检验

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）25-0009-02

【Abstract】Objective:Toinvestigatetheeffectoflayingasidetimeandtreatmentmethodonmultiplebiochemicalresultsofbloodsamples.Methods:Threereplicatebloodsamplesweretakenfrom101patients.Thefirsttubewerecentrifugedandseparatedtheserumimmediatelytodeterminethebiochemicalindexes;thesecondtubewerecentrifugedandstoredat4℃,examinationweretakenaftera24-hour-storage;thethirdtubestoredat4℃withoutcentrifugationanddeterminationwerealsotakenafter24hours.36biochemicalindexes,i.e.ALT,AST,ALP,GGT,TP,ALB,AFU,CK,wereselectedtobedeterminedaccordingtothesubjectsourlaboratorycarryingout.Results:Comparedwiththebiochemicalindexesofimmediatebloodsamples,AST,LDH,HBDH,CKMBandZnincreasedafterlayingasidefor24hours,andALP,GGT,TP,ALB,AFU,T-BIL,D-BIL,CRE,UA,Glu,Cyc-sC,TG,HDL-C,ApoA,RF,CRPandAMSdecreased.Ithasstatisticalsignificance(P<0.05).Comparedwiththesamplesofimmediatecentrifugation,AST,BUN,HBDH,CKMB,LDH,HBDH,CK,CKMB,MgandZnincreased,andALP,GGT,ALB,T-BIL,D-BIL,CRE,Glu,CHO,ApoA,ApoB,RF,CAandAMSdecreasedofthesamplesnotbeingcentrifuged(P<0.05).Theexaminationofserumsafterstorageof24hoursshowed,AST,TP,BUN,Cys-C,LDH,HBDH,CRP,ZnincreasedandALP,T-BIL,D-BIL,CRE,Glu,ApoB,ASO,CAdecreasedofserumseparatedimmediatelycomparedwiththeserumseparatedafter24hours(P＜0.05).Conclusions:Theexaminationprovedthatthebiochemicaldatawouldalteredonaccountofdifferentlayingasidetimeandtreatmentmethodsandinfluencethediagnosisofrelativediseases.Therefore,serumshouldbeseparatedandstoredat4℃assoonaspossibleafterthebloodspecimenswerereceived,soastoavoidthedistortionoftheresultsandsubsequentmisdiagnosis.

【Keywords】bloodlayingasidetimetreatmentmethodbiochemicaltest

血液学生化检验指标就是通过生物或者化学方法检测人体血液中的各种生化指标的变化，从而反映人体健康情况。检验前质量保证的重要性在于保证提供的检验信息对临床医师用于患者诊断、治疗时的有效性、可靠性[1]。不适当的标本收集和保存，不注意影响标本成分变化的各种因素，往往是导致实验结果不可靠的主要因素，且又不易被发现，因而必须加以重视。在一些标本量相对不是很多、人手不足或者晚上不能检测的情况下，标本不能马上分离血清，或者只能分离血清而不能马上进行检测，标本的分析前处置方式将直接影响生化指标的检查结果[2]。本实验探讨了三种常见的处理方式对各项生化指标的影响，现具体报道如下：

1资料与方法

1.1临床资料

选择2012年12份在我院进行生化指标检测的101个病人血液标本作为研究对象。

1.2方法

每个病人分别抽取3管血液标本，按不同的处置方式分为三组：A组标本30min内离心分离血清，马上进行36项生化指标检测；B组标本30min内离心分离血清但不去盖，将标本放置于4℃冰箱过夜；C组标本不离心不去盖，直接放置在4℃冰箱过夜，24h后再对B组和C组进行36项生化指标的检测。

1.3试剂

1.3.1含促凝剂的真空管厂家为汕头市金丰医疗器械科技有限公司。

1.3.2生化试剂GGT、TBA、ALP、TP、ALB、T-BIL、D-BIL、Glu、UA、BUN、CRE、TG、CK、CKMB、HBDH、LDH、CRP、CA、P为上海科华试剂，CHO、ALT、AST为广州标佳科技有限公司，Cys-C为上海景源器械有限公司，RF为浙江康特生物科技公司，Zn、Fe、ASO为北京利德曼生化股份有限公司，TFR为OrionDiagnosicaOy,MG、HDL-C、LDL-C为日本和光纯药工业株式会社。

1.3.3校准品分别为罗氏CFAS多项生化校准品和试剂盒原配校准品，质控品为美国BIO-RAD质控品。

1.4仪器

全部项目使用日立7180全自动生化分析仪。

1.5检测指标

选择了ALT、AST等36项生化指标作为检测指标，用于比较不同处置方式对血液标本生化指标检测结果的影响。

1.6统计方法

用SPSS19.0统计软件对数据统计处理，考虑到标本量较大，而且标本同源，直接将A、B、C三组分别进行两两之间的配对t检验。

2结果

根据Laessig等[3]，我们将A组结果为基准，放置24h后,AST、LDH、HBDH、CKMB、Zn增高,ALP、GGT、TP、ALB、AFU、T-BIL、D-BIL、CRE、UA、Glu、Cys-C、TG、HDL-C、ApoA、RF、CRP、AMS下降，有统计学意义(P＜0.05)。未离心放置4℃冰箱24h后再离心检测标本和及时离心检测标本比较，AST、BUN、LDH、HBDH、CK、CKMB、Mg、Zn增高,ALP、GGT、ALB、T-BIL、D-BIL、CRE、Glu、CHO、ApoA、ApoB、RF、CA、AMS下降，有统计学意义(P＜0.05).同样放置24h后检测，马上分离血清和24h再分离血清相比，AST、TP、BUN、Cys-C、LDH、HBDH、CRP、Zn增高,ALP、T-BIL、D-BIL、CRE、Glu、ApoB、ASO、CA下降，有统计学意义(P＜0.05).具体结果如图：

表1血标本两种处理方式对多项生化指标的影响

注N：结果无明显差异（P＜0.05,有统计学意义）↑：结果明显升高↓：结果明显降低（P＜0.05,有统计学意义）

3讨论

血液的生化指标对于在临床疾病诊断、鉴别诊断和疗效观察具有十分重要的意义，血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）的升高常见于急慢性肝炎、药物性肝损害、脂肪肝、肝硬化、心肌梗塞、心肌炎及胆道疾病等。血清天门冬氨酸氨基转移酶（AST）的升高常见于心肌梗塞发病期、急慢性肝炎、中毒性肝炎、心功能不全、皮肌炎等。保证所使用的血标本的质量合格是保证生化指标检测结果的准确的前提[4]。

本研究表明血液标本离体后由于不同的处置方式会引起生化指标的改变，从而影响临床医生对疾病的准确判断。其中ALT、TBA、CO2CP、LDL-C、ASO、P、Fe、TFR等项目比较稳定，即使不马上分离血清，在4℃冰箱保存24h再检测（C组），结果与A组和B组之间的差异仍无统计学意义。AST、LDH、HBDH、CK-MB、Zn等项目的B组、C组结果在标本放置24h后会升高，这与放置时间延长，红细胞破坏引起溶血有关，而ALP、GGT、TP、ALB、AFU、T-BIL、D-BIL、CRE、UA、Glu、Cys-C、CHO、TG、HDL-C、ApoA、RF、CRP、AMS则会出现相应的下降。血细胞被分离后，因血中的CO2丧失极快，可使pH在15min内由7.4增至8.0，对碱性敏感的ALP活性因而急剧下降[5]。T-BIL和D-BIL的结果降低与马丽旭[6]的报道基本一致，可能是由于胆红素受到光线、温度的影响致使其分解所致。而葡萄糖的减低，则是因为葡萄糖的酵解作用以及红细胞对葡萄糖的消耗所致[7]。在室温下，因血细胞内的糖酵解使标本中的Glu浓度以每小时5％-7％的速度降解。若不能及时测定，就分离出血清低温保存，或者使用含氟化钠的抗凝管抽血，以保证结果的准确。GGT、TP、ALB、AFU、CRE、UA、Cys-C、CHO、TG、HDL-C、ApoA、RF、CRP的B组和C组结果降低主要为细胞代谢消耗所致。AMS主要是温度的改变和PH的改变致使其减低。如不马上离心，而且放置24h再检测AST、BUN、LDH、HBDH、CK、CKMB、Mg、Zn增高,这主要还是考虑标本放置时间长还有离心导致标本溶血而升高，BUN的增高可能是细胞代谢导致产生增多。GGT、ALB、CRE、Glu、CHO、ApoA、ApoB、RF、CA等下降，这主要考虑为标本未分离血细胞，血细胞代谢引起消耗而降低有关。马上分离血清和24h再分离血清相比，AST、TP、BUN、Cys-C、LDH、HBDH、CRP、Zn增高,ALP、CRE、Glu、ApoB、ASO、CA下降，这主要考虑为未分离的标本，血中的CO2丧失更加快，细胞代谢更加旺盛，溶血程度可能更为显著有关，而T-BIL和D-BIL的下降可能是在没有离心的状态下更不稳定而分解有关。标本长时间放置和未分离血细胞都会导致AST、LDH、HBDH、CKMB、Zn等升高，ALP、T-BIL、D-BIL、CRE、GLU等下降，所以可以针对不同的诊断需要选择较为合适的标本放置放置和放置时间，但是为保证生化指标的准确性，应该尽快进行各项检测。对于暂时不能检验而需要保存的血样，实验室应根据具体检验项目作出明确规定，如分离血清、制成去蛋白滤液、添加防腐剂或稳定剂、保存温度及期限等。我国临床实验室参考美国临床实验室标准化委员会(NCCI_S)的有关规定，要求临床化学实验室一般应于2h内分离血清后测定[8]。

参考文献

[1]叶应妩，王毓三，申子瑜：全国临床检验操作规程[M].第三版，南京，东南大学出版社，2006:1.

[2]陈文娜，李曦明.存放时间对SD大鼠血液分析结果的影响研究.中国现代医生[J].2008.46（10）.

[3]LaessingRH,IndriksonsAA,HassemerDJ,PaskeyTA,SchwartsTH.Changesinserumchemicalvaluesasaresultofprolongedcon-tactwiththeclot[J].AmJClinPath1976;66:598-604.

[4]LaessigRH,IndriksonsAA,HassemerDJ,PaskeyTA,SchawrtsTH.Changesinserumchemicalvaluesasaresultofprolongedcontactwiththeclot[J].AmJClinPath,2003,66:598-604.

[5]周新，涂植光：临床生物化学和生物化学检验[J].人民卫生出版社，1989,11:155.

[6]马丽旭.血液标本保存时间对生化检测结果的影响[J].检验医学与临床，2007，4（8）：800-801.

[7]刘风华，王李洁.学标本放置方法和时间对血清葡萄糖浓度检测结果的影响[J]检验医学与临床，2010.7（14）：1501-1502.

[8]LagadicH，FaureJM，MillsAD，etal.Effectsofbloodsamplingonplasmaconcentrationsofcorticosteroneandglucoseinlayinghenscagedingroups.BrPoultSci，1990，31(4)：823-829.