CyclinB1在早期乳腺癌的蛋白表达及其意义

CyclinB1在早期乳腺癌的蛋白表达及其意义

欧海玲1刘剑仑2覃宇周2

欧海玲1刘剑仑2覃宇周2

（1广西中医学院第一附属医院病理科广西南宁530023)

(2广西医科大学附属肿瘤医院广西南宁530021）

【摘要】目的探讨CyclinB1在早期乳腺癌组织中蛋白表达与ER、PR及HER2的关系。方法用免疫组化二步法检测76例有完整随访资料的早期乳腺癌患者乳腺癌组织中CyclinB1、ER、PR及HER2的蛋白表达，并进行统计学分析。结果CyclinB1在乳腺癌组织中的阳性率为68.42%。CyclinB1蛋白表达与肿瘤的病理类型、患者的年龄、PR及HER2的蛋白表达无关(P>0.05)，与绝经状态、ER相关(P<0.05)。单因素分析示CyclinB1、ER、HER2与预后相关，多因素分析显示无一基因表达与预后相关。结论本组早期乳腺癌患者的CyclinB1蛋白表达与绝经状态、ER蛋白表达有关，与患者的预后无关。CyclinB1在早期乳腺癌的作用尚需进一步研究。

【关键词】CyclinB1早期乳腺癌预后

ExpressionandsignificanceofCyclinB1inearlybreastcancer

OuHai-ling1LiuJian-lun2QinYu-zhou2

【Abstract】Objective:ToobserveretrospectivelytheproteinexpressionandsignificanceofCyclinB1inearlybreastcancer(EBC)anditsrelationshipwithclinicalpathologicalfeaturesandER,PR,HER2.Method:Atotalof76patientswithEBCwerefollowedupinthisstudy.TheproteinexpressionsofCyclinB1,ER,PRandHER2inthesepatientsweredetectedbyImmunohistochemicaltwo-stepmethodandstatisticallyanalyzed.Result:ThepositiveratesofproteinexpressionofCyclinB1was68.42%.TheproteinexpressionofCyclinB1wasnegativerelatedtohistology,age,PRandprognosisofpatients(P>0.05),butpositiverelatedtopremenopausalstatusandER(P<0.05).CyclinB1、ER、HER2werecorrelatedwithprognosisinunivariateanalysiswithCOXproportionalhazardmodel,burthereisnogenecorrelatedwithprognosis.Conclusion:TheresultsofthissmallpilotstudysuggestthattheproteinexpressionofCyclinB1inEBCwascorrelatedwithpremenopausalstatusandER,butnegativecorrelatedwithprognosis.MorestudyabouttherelationshipbetweenCyclinB1andstage,lymphonodeareneed.

【Keywords】CyclinB1earlybreastcancer(EBC)prognosis恶性肿瘤的发生发展是多基因参与和多阶段协同作用的结果。其中，细胞周期调控异常在其发生、发展中起关键性作用。人类多种肿瘤均发现有CyclinB1的过表达，如食管癌、非小细胞性肺癌等，与肿瘤的分期、大小、浸润转移和预后有关[1,2]。有关CyclinB1蛋白在乳腺癌临床应用研究少见。本研究对早期乳腺癌组织中CyclinB1蛋白和ER、PR、HER2的表达和临床病理特征进行分析，以探讨其在早期乳腺癌的意义。

1材料和方法

1.1临床资料

病例来自于广西壮族自治区肿瘤医院1985~2003年的早期乳腺癌(TNM分期为T1N0M0)患者。随访截止为2006年6月或有复发转移事件。76例早期乳腺癌均为女性，43例无复发转移(未复发转移组)，33例发生复发转移(复发转移组)。年龄25～79岁，中位年龄50岁。随访时间为3.5~16年，中位随访时间为6.14年。所有患者均未进行过新辅助化疗。两组患者临床资料具有可比性。见表1。

1.2主要试剂第一抗体CyclinB1、ER、HER2鼠多抗及PR兔多抗，以及MaxVisionTM试剂盒、DABKit、MVS-071(Tris抗原修复液)购自福州迈新公司。

1.3实验步骤和方法所有患者组织切片均采用免疫组织化学二步法进行各基因蛋白检测。每次染色均设阴性和阳性对照。用已知的各个基因的阳性切片作阳性对照及做预试验。用PBS代替一抗作阴性对照。

1.4结果判断标准参照其他文献[3]的方法，采用阳性细胞蛋白表达率与阳性细胞染色强弱相结合的办法进行综合判断。

1.5统计学处理用SPSS13.0统计软件包进行统计分析。两组间比较采用χ2检验。以P<0.05为具有统计学意义。

2结果

2.1CyclinB1和ER、PR、HER2在早期乳腺癌中的蛋白表达在76例乳腺癌组织中，有52例CyclinB1染色呈阳性，阳性率为68.42%；同时检测出ER、PR及HER2的阳性率分别为43.42%、53.95%、51.32%。

2.2CyclinB1蛋白表达与年龄、绝经状态、病理类型及ER、PR、HER2的关系经χ2检验分析，CyclinB1蛋白表达与患者的年龄、肿瘤的病理类型及PR、HER2的蛋白表达无关(P＞0.05)，与绝经状态、ER呈正相关(P＜0.05)，见表2。

2.3单因素及多因素分析结果将患者年龄、绝经状态及4个基因逐一引入COX风险比例模型进行单因素分析，结果显示：年龄、绝经状态及PR与早期乳腺癌的预后无关；CyclinB1、ER、HER2与早期乳腺癌的预后有显著性相关(P<0.05)，按其相对危险度从小到大依次为：ER、HER2、CyclinB1。见表3。将CyclinB1、ER、HER2选入COX风险比例模型进行多因素分析，结果显示无一基因与早期乳腺癌预后相关。

3讨论

CyclinB1(G2/mitotic-specificcyclin-B1,CyclinB1)属于细胞周期调控因子中的细胞周期蛋白。主要与CDK1结合形成CyclinB1/CDK1复合物，使CDK1磷酸化而被激活，从而促进核底物的磷酸化和有丝分裂。

CyclinB1作为肿瘤抗原之一，CyclinB1在肿瘤早期即开始表达。ShenM等[4]对乳腺癌细胞周期的研究发现，CyclinB1在G1和G2期的表达不同，提示CyclinB1在乳腺癌的发生和细胞凋亡可能起重要作用。在Aaltonen等[5]的研究中，高CyclinB1提示乳腺癌侵袭性高，而且是一个独立的预后因子。Agarwal[6]也认为CyclinB1过表达与乳腺癌预后差相关。而HusdalA[7]的研究表明，有37.2%的乳腺癌患者检测到CyclinB1基因扩增；CyclinB1与乳腺癌的预后无关。PetersMG等[8]研究包括CyclinB1在内多个细胞周期蛋白及CDK在Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌的作用，结果表明无一细胞周期蛋白与乳腺癌的预后有关。本研究发现CyclinB1在早期乳腺癌的蛋白表达率为68.42%，与肿瘤的病理类型、患者的年龄、PR及HER2的蛋白表达无关，与绝经状态、ER相关。这是否提示CyclinB1参与ER的调控，在乳腺癌的内分泌治疗方面有一定作用需要更多的研究加以证实。

本研究还发现，单因素分析示CyclinB1与预后相关，多因素分析则与预后无关。表明CyclinB1参与了早期乳腺癌的进展过程，但其预后预测的作用尚不明确，需要进一步深入研究，并可研究CyclinB1与乳腺癌分期、淋巴结转移的关系等。

参考文献

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[2]SoriaJC,JangSJ,KhuriFR,etal.OverexpressionofcyclinB1inearly-stagenon-smallcelllungcanceranditsclinicalimplication[J].CancerRes,2000,60:4000-4.

[3]SinicropeFA,RuanSB,ClearyKR,etal.bcl-2andp53oncoproteinexpressionduringcolorectaltumorigenesis[J].CancerRes,1995,55:237-41.

[4]ShenM,FengY,GaoC,etal.Detectionofcyclinb1expressioning(1)-phasecancercelllinesandcancertissuesbypostsortingWesternblotanalysis[J].CancerRes,2004,64:1607-10.

[5]AaltonenK,AminiRM,HeikkilaP,etal.HighcyclinB1expressionisassociatedwithpoorsurvivalinbreastcancer[J].BrJCancer,2009,100:1055-60.

[6]AgarwalR,Gonzalez-AnguloAM,MyhreS,etal.Integrativeanalysisofcyclinproteinlevelsidentifiescyclinb1asaclassifierandpredictorofoutcomesinbreastcancer[J].ClinCancerRes,2009,15:3654-62.

[7]HusdalA,BukholmG,BukholmIR.TheprognosticvalueandoverexpressionofcyclinAiscorrelatedwithgeneamplificationofbothcyclinAandcyclinEinbreastcancerpatient[J].CellOncol,2006,28:107-16.

[8]PetersMG,VidalMdelC,GimenezL,etal.PrognosticvalueofcellcycleregulatormoleculesinsurgicallyresectedstageIandIIbreastcancer[J].OncolRep,2004,12:1143-50.

注：基金项目：广西壮族自治区卫生厅重点科研课题(重200313)