宫颈液基细胞学与HPV-DNA在妇科普查中的作用

宫颈液基细胞学与HPV-DNA在妇科普查中的作用

罗业红沈琳菲邓廷坤刘莉

罗业红沈琳菲邓廷坤刘莉(成都市中铁二局集团中心医院四川成都610031)

【中图分类号】R737.33【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）42-0019-02

【摘要】目的评价液基细胞学检测和HPV-DNA检测的联合应用在妇女病普查中的作用。方法选取2009年4月-2012年07月在我院进行妇女病普查随机抽查的500例当成本文的研究对象,比较液基细胞学检测和HPV检测两种方法的检出敏感性及阳性符合率。诊断应用TBS分级标准,并对细胞学检查诊断为ASCUS以上者和HPV阳性者活检.结果宫颈液基细胞学诊断结果正常范围及良性反应性细胞改变407例（占81.4%），HPV-DNA阳性细胞学诊断106例（占21.2%），病理诊断结果阳性细胞81例（16.2%）；经活检证实有54例为CIN-I，CINII-III19例，SCC9例。单用TCT或HPV-DNA检测结果与联合检测比较差异显著，且具有统计学意义（P<0.05）。结论TCT检测结合高危型HPV检测技术的应用及TBS诊断标准能提高宫颈病变检出率。

【关键词】宫颈癌液基细胞学HPV-DNA检测

宫颈癌是女性生殖道常见的恶性肿瘤之一。其发病率在妇女恶性肿瘤中占第2位,80%的病例发生在发展中国家[1]。在我国,每年有新发宫颈癌病例约10万,占全世界宫颈癌新发病例的20%[2]。随着筛查的普及,宫颈癌的发病率有逐年下降的趋势。本研究使用宫颈液基细胞学(TCT)检查和HPV-DNA检测,以组织病理学诊断为标准,比较两种方法联合使用和单独使用对宫颈鳞状上皮病变的筛查效果。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2009年4月-2012年07月我院进行进行的宫颈癌筛查项目的妇女共随机抽查500例,同时进行宫颈液基细胞学(新柏氏TCT)以及HPV-DNA检测,受检者当时无妊娠;24d内无性生活,3d内未进行阴道冲洗或阴道用药,非月经期采样。受检者年龄20～68岁,平均37.5岁。

1.2TCT检测方法：

1）使用TCT专门的采样器来采集子宫颈细胞样本。

2）与常规细胞涂片不同的是，TCT是将采集器置入装有细胞保存液的小瓶中进行漂洗。

3）使用全自动细胞检测仪将样本分散并过滤，以减少血液、粘液及炎症组织的残迹。

4）显微检测和诊断。

1.3HPV—DNA检测方法：

首先使DNA双链释放并分解成为可以杂交的核苷酸单链,DNA单链与RNA组合探针结合为RNA-DNA杂合体,特异性抗体将RNA-DNA杂合体捕获,偶联有碱性磷酸酶的第二抗体与RNA-DNA杂合体结合,碱性磷酸酶使酶底物发光,根据光的强弱可确定碱性磷酸酶的含量,从而确定RNA-DNA杂合体的含量。能检测13种高危型HPV,包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68。

1.4诊断标准[3]：

细胞学阳性诊断是指ASCUS/AGC及以上的病变。对细胞学阳性者在阴道镜下取活组织病理检查，以组织病理学诊断为金标准。

1.5统计学分析采用SAS6.12统计学软件进行统计分析。宫颈液基细胞学分级与组织病理学不同级别病变中的差异显著性分析采用χ2检验，P<0.05为差异有显著性。

2结果

2.1一般结果：宫颈液基细胞学诊断结果：正常范围及良性反应性细胞改变407例（占81.4%），HPV-DNA阳性细胞学诊断106例（占21.2%），病理诊断结果阳性细胞81例（16.2%）详见表1,2。

2.2联合检测情况

500例标本经TBS分级系统进行诊断后，各级报告的阳性率与行阴道镜取病理组织进行病理诊断的阳性率相比较，经活检证实有53例为CIN-I，CINII-III19例，SCC9例。单用与联用TCT及HPV-DNA检测情况比较分析，见表3。

表3，单用与联用TCT及HPV-DNA检测情况比较分析；

注：与单用TCT或HPV-DNA检测比较，（X2=4.68,5.74，P<0.05）。

3讨论

宫颈癌是发生在全球妇女中仅次于乳腺癌的第二个最常见的恶性肿瘤，CIN约10年发展为原位癌，原位癌发展为浸润癌约需3～10年，而CIN发展为浸润癌可能需10～15年，因此早期筛查、早期诊断、早期治疗，将其阻断在癌前病变阶段，在宫颈癌的防治工作中占有非常重要的地位[4]。但传统涂片的假阴性率高达53%～90％，而液基薄层技术采用液体存储宫颈细胞，自动化制片，制成细胞单层、背景清晰的薄片，避免了常规刮片中因黏液、血液及炎性细胞的遮盖导致的漏诊，提高了细胞学的准确性[5]。

目前妇科治疗中通行的宫颈癌筛查方法主要包括巴氏涂片、液基细胞学检测(TCT)、和人类乳头瘤病毒(HPV)检查三种方式。除已被逐渐淘汰的巴氏涂片外，其中的TCT在我国被应用得最为广泛。其检测方法是用小毛刷取宫颈管内脱落细胞置于保存液中，再由病理医生作最后诊断，但该方法由于其对ASCUS的诊断率、准确率不高而备受诟病[6]。而HPV检查的相对检出率虽然有所增高，但也不能达到令人满意的标准。该筛查法将传统的TCT筛查与HPV检测结合起来，通过HPV检测病毒感染，而HPV-DNA则从基因层面进行分型检测。这项技术能检测13种HPV的具体类型，从而大大提高了准确率、敏感度和特异性。实验及临床数据证明，TCT与HPV-DNA两者结合检测的灵敏度极高，可将98%以上的宫颈高度病变及癌症筛出[7];同时，它还具有高敏感度，极适用于定性的普查，可以直接查出HPV的高危亚性，对于发现早期宫颈癌和预防宫颈癌前病变意义重大[8]。而HPV-DNA+TCT联合筛查识别高度病变的敏感性也比以往的检测方法有了显著的提高。

TCT是液基薄层细胞检测的简称，是目前国际上最先进的一种宫颈癌细胞学检查技术，TCT检查是采用液基薄层细胞检测系统检测宫颈细胞并进行细胞学分类诊断。TCT宫颈癌细胞学检查对宫颈癌细胞的检出率为75%以上，同时还能发现癌前病变，检测病原微生物如霉菌、滴虫、衣原体等。TCT测试明显提高了子宫颈细胞样本的检测质量，在临床实验中，TCT测试模糊子宫颈细胞样本的数量，可以明显提高癌变细胞的检测率，从而降低了病人因被重做测试而引起的不必要的担心，并使那些早期癌变病人得到及早的、更有效的治疗。

HPV感染是子宫颈癌及其癌前病变（子宫颈上皮内瘤样变）的主要病因。因此，可以将检测HPV感染作为子宫颈癌的一种筛查手段。HPV-DNA检测发现高度病变的敏感度为97.7%～100%，平均为98.6%，比细胞学检查高二十多个百分点。如果将两者结合进行检查，敏感度可达100%。2005年在巴黎召开的“EUROGIN”子宫颈癌全球全球防御大会一致认为：HPVDNA检测是宫颈病变及宫颈癌筛查的最佳方法，是目前唯一获美国FDA认证的HPV检测方法，可一次检测13种可导致宫颈癌的高危型HPV病毒。2006年美国FDA将HPVDNA检测列为妇女常规检测项目。2003年被中国宫颈癌筛查及早诊早治指引采纳。本文研究结果表明在宫颈疾病筛查中，HPV较TCT更敏感，HPV较TCT检出率高，但操作较为复杂，在临床中可以结合运用。

参考文献

[1]程敏，吴令英，章文华，等.215例老年宫颈癌的临床分析［J］.中华肿瘤杂志，2009，31（5）：388-391.

[2]DianeSoiomonRituNayar.子宫颈细胞学Bethesda报告系统[M]第二版[M].北京:诊断病理杂志社,2004.35-74.

[3]李青，钱宁，张静敏，等.HC2-HPV-DNA检测与薄层液基细胞学检查在筛查宫颈癌中应用价值［J］.南京医科大学学报(自然科学版)2009,29(8):1172-1174.

[4]温寿青，邱立，钟美莲.TCT制片质量控制和宫颈癌诊断［J］.现代肿瘤医学杂志,2009,17（8）：1430-1431.

[5]张传英,王敏.妊娠期宫颈上皮内瘤变的筛查和处理进展[J].实用妇产科杂志,-2007,23(9):518.

[6]颜杰文,沈宏伟,柯佩琪,等.液基细胞学检查在宫颈癌筛查中的应用价值--附2424名报告[J].新医学,2007,38(7):462-463.

[7]王学才,汤俊明.HPV联合TCT检测在宫颈疾病筛查中的应用[J].中外医学研究,2011,9(32):38-39.

[8]吴霞,黄醒华.妊娠期宫颈病变及筛查的临床意义[J].中国妇幼保健,2006,21(11):1590-1593.