MCE评价格列苯脲在硝酸甘油诱导心肌缺血再灌注损伤的保护作用

MCE评价格列苯脲在硝酸甘油诱导心肌缺血再灌注损伤的保护作用

秦悦洋朱红张旭郑丽娟宁维娟

秦悦洋朱红张旭郑丽娟宁维娟（黑龙江省医院门诊彩超室黑龙江哈尔滨150036）

【中图分类号】R969【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）32-0171-03

【摘要】目的采用心肌声学造影(MCE)评价格列苯脲在硝酸甘油诱导心肌缺血再灌注损伤的延迟保护作用。方法24只犬左冠状动脉前降支(LAD)阻断180min,再灌注120min,分别于结扎前,结扎后即刻,180min,再灌注后即刻、60min、120min时于左股静脉弹丸式注入MCE剂,分4组:A组(缺血再灌注组,6只)，B组(硝酸甘油组,6只)，C组(硝酸甘油+KATP拮抗剂组,6只)，D组(KATP拮抗剂组,6只）。MCE评价峰值声强度和曲线下面积。结果再灌注后即刻，四组心肌峰值声强度及曲线下面积明显减低；随着再灌注时间的延长，峰值声强度逐渐恢复。结论硝酸甘油对缺血再灌注损伤心肌微循环、微血管内皮功能具有延迟保护作用；硝酸甘油可能通过激活K离子通道诱导对缺血再灌注损伤心肌微循环灌注，微血管内皮功能的延迟保护。

【关键词】心肌声学造影心肌缺血再灌注损伤格列苯脲

缺血后处理是指在再灌注开始时,短暂的反复缺血、再灌注,可减少缺血再灌注损伤,后出现延迟性心肌保护作用，具有临床应用前景。前期研究结果证明硝酸甘油可诱导顿抑心肌微血管内皮功能延迟保护作用[1]，本实验利用心肌声学造影(myocardialcontrastechocardiography,MCE),动态观察钾离子拮抗剂格列苯脲在硝酸甘油诱导心肌缺血再灌注损伤的延迟保护作用。

1资料与方法

1.1研究对象及分组

健康成年杂种犬24只，平均(14.5±3)kg。经静脉3%戊巴比妥麻醉(用量30mg/kg),气管插管,呼吸机正压人工呼吸。左右侧分离出股静脉,置入6F导管鞘,用于静脉注射造影剂和实验药物,并维持静脉通道。体表放置电极同步检测心电图。监测主动脉压。胸部正中切口开胸,剪开心包,悬吊心包床,游离左冠状动脉前降支(LAD),穿线,套入橡胶管,待结扎用。

实验犬随机分4组:A组(缺血再灌注组,6只),不给与任何药物;B组(硝酸甘油组,6只)：静滴硝酸甘油1h，24h后结扎；C组(硝酸甘油+KATP拮抗剂组,6只)：静脉推入格列苯脲，5min后静滴硝酸甘油1h，24h后结扎；D组(KATP拮抗剂组,6只）:静脉推入格列苯脲,24h后结扎。

1.2研究方法

MCE检查:采用SonoVue声学造影剂。将实验犬随机分组:缺血再灌注组(A组,6只):不给与任何药物,单纯给与左冠状动脉前降支结扎180min,再灌注120min,分别于结扎前,结扎后即刻,180min,再灌注后即刻、60min、120min时于左股静脉弹丸式注入SonoVue,行MCE。硝酸甘油组(B组,6只):用微量静脉泵以2μg/(kg·min)速度静滴硝酸甘油1h,24h后结扎左冠状动脉前降支,其余步骤同缺血再灌注组。硝酸甘油+KATP拮抗剂组(C组,6只)：静脉推入格列苯脲(glibenclamide天津药物研究所0.3mg/kg)，5min后静滴硝酸甘油1h，24h后结扎；其余步骤同缺血再灌注组。KATP拮抗剂组(D组,6只）:静脉推入格列苯脲（剂量同上）,24h后结扎，其余步骤同缺血再灌注组。使用PHILIPSIE33超声诊断仪,心脏探头置于心前区自制水囊中。间歇谐波显像,探头发射频率2.1MHz,接收频率4.2MHz。机械指数1.6。取造影剂12mL于左股静脉弹丸式注入,心电图R波触发,触发间期为7个心动周期。左室短轴乳头肌水平切面图像存储。

数据采集与分析：采用AD软件分析,将取样框置于左室乳头肌水平短轴切面左冠状动脉前降支供血区域的心肌层内手动逐帧跟踪,软件自动拟合出心肌视频密度时间-强度曲线(time-intensitycurve),计算出峰值声强度(peakintensity,PI)和曲线下面积(areaunderthecurve,AUC)。

病理检查：伊文思蓝及红四氮唑染色。

1.3统计分析

采用SPSS13.0统计软件,数值以均数±标准差(±s)表示。组间比较采用单因素方差分析。P<0.05有统计学意义。

2结果

所有实验犬于冠状动脉结扎前后、注射造影剂前后,注射硝酸甘油、格列苯脲前后心率和平均动脉压无明显改变。

病理改变:正常心肌组织染成蓝色;结扎冠状动脉供血区心肌成砖红色为缺血再灌注损伤心肌

MCE结果：缺血节段可见正常灌注区、无灌注区；再灌注后随着灌注时间的延长，无灌注区逐渐被低灌注区所取代，回声强度逐渐增强，最后达到正常灌注。

MCE时缺血再灌注心肌峰值声强度的变化（见图一）

再灌注后即刻，四组缺血心肌峰值声强度明显减低；随着再灌注时间的延长，峰值声强度逐渐恢复；B组至再灌注90min时恢复至正常水平，余3组则为120min；B组于再灌注即刻、30、60、90min时峰值声强度均高于其余3组。

MCE时心肌曲线下面积的变化（见图2）

再灌注后即刻，四组缺血心肌曲线下面积明显减低；随着再灌注时间的延长，逐渐恢复；B组至再灌注90min时恢复至正常水平，余3组则为120min；B组于再灌注即刻、30、60、90min时均高于其余3组。

3讨论

随着冠心病介入性治疗(PCI)的广泛应用,如何减少心肌缺血再灌注损伤成为临床亟待解决的重要问题。2003年Zhao等[2]首次提出心肌缺血后处理的概念,即在再灌注开始时,迅速、短暂的反复缺血、再灌注,可以减少心肌缺血再灌注损伤,并成为近年来研究的热点。大量研究发现心肌缺血缺血再灌注损伤后,多种内源性活性物质释放，引起离子通道的改变及保护性因子的表达发挥心脏保护作用。K离子通道一种选择性的离子通道，研究证明，K离子拮抗剂能取消心肌缺血再灌注损伤的保护作用,而钾通道开放剂可模拟心肌缺血再灌注损伤的过程[3]。

硝酸甘油是一种在临床上广泛使用的改善心肌缺血药物，价格便宜，副作用少。前期研究结果证明硝酸甘油可诱导缺血再灌注损伤心肌微血管内皮功能延迟保护。然而其信号传导通路中的效应物质是否为K离子通道尚未阐明。

MCE是近年来发展起来的一种评价心肌血流灌注的新技术,可评价心肌微血管的完整性和心肌血流灌注状况[4]。团注法注射造影剂时，通过计算曲线下面积、峰值声强度可定量局部组织的血流量及冠脉储备功能，可以评价局部冠脉储备和内皮功能。本实验结果显示四组犬再灌注即刻缺血再灌注损伤心肌峰值声强度，曲线下面积明显减低，随着再灌注时间的延长，缺血再灌注损伤心肌峰值声强度、曲线下面积逐渐恢复。B组至再灌注90min时恢复至正常水平,余三组至再灌注120min时恢复至正常水平，B组在再灌注即刻，30，60，90min时峰值声强度及曲线下面积均高于余三组。提示缺血再灌注损伤心肌微循环血流灌注减少，缺血组较硝酸甘油组更明显。

硝酸甘油可能通过激活K离子通道诱导对缺血再灌注损伤心肌微循环灌注，微血管内皮功能的延迟保护。本实验结果表明缺血再灌注损伤心肌微循环血流灌注减少，缺血组较硝酸甘油组更明显缺血再灌注损伤心肌微血管内皮功能受损，血管内皮依赖性舒张功能减弱，硝酸甘油组比其它各组损伤程度减轻且恢复较快但此作用可被K离子通道拮抗剂格列苯脲取消，提示硝酸甘油可能通过激活K离子通道诱导对顿抑心肌微循环灌注，微血管内皮功能的延迟保护。

参考文献

[1]CogginsMP,SklenarJ,LeDE,eta1.Noninvasivepredictionofultimateinfarctsizeatthetimeofacutecoronaryocclusionbasedontheexentandmagnitudeofcollateral-drivedmyocardialbloodflow.Circulation,2001,104:2471-2477.

[2]ZhaoZQ,CorveraJS,HalkosME,etal.Inhibitionofmyocardialinjurybyischemicpostconditioningduringreperfusion:com-parisonwithischemicpreconditioning.AmJPhysiol,2003,285(2):579-688.

[3]CohenMV,BainesCP,DowneyJM.Ischemicpreconditioning:fromadenosinereceptortoKATPchannel.AnnuRevPhysiol,2000,62:79-109.

[4]KaufmannBA,WeiK,LindnerJR.Contrastechocardiography.CurrProblCardiol,2007,32(2):51-96.