ChromIDmRSA检测金黄色葡萄球菌耐甲氧西林的效果评估

ChromIDmRSA检测金黄色葡萄球菌耐甲氧西林的效果评估

卢玲玲涂斐裴

卢玲玲涂斐裴（瑞安市中医院浙江瑞安325200）

【中图分类号】R378.1+1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）33-0031-02

【摘要】目的分析ChromIDmRSA产色培养基对检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的灵敏度和特异性，为临床尽早隔离携带者，合理选择抗生素提供依据，对控制耐药菌株的播散和流行具有非常重要的意义。方法对临床分离205株金黄色葡萄球菌分别用ChromIDmRSA产色培养基筛选MRSA法和头孢西丁纸片法进行对比试验。结果上述两检测方法无显著性差异（P>0.05），ChromIDmRSA法的灵敏度=96.2%，特异度=86.3%。结论ChromIDmRSA法能很好的筛选耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌。

【关键词】耐甲氧西林金黄色葡萄球菌产色培养基mRSAChromIDmRSA

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是近年来引起医院感染的主要病原菌之一，并可引起医院感染的暴发流行。MRSA对多种抗菌药物耐药，仅对糖肽类抗菌药物敏感。但近年来出现了对万古霉素敏感性下降的MRSA(VISA)及耐万古霉素MRSA(VRSA)[1]。

MRSA感染给临床治疗带来很大困难，已成为革兰阳性菌中的超级细菌。研究资料显示，MRSA的表达基因多定位于细菌所携带的质粒上，具有可传播性，易引起医院感染的暴发流行，且表现为多重耐药性，给临床治疗带来很大的困难[2]。

因此，医院微生物科室及感染监测人员及时准确地监测出产MRSA的细菌，并且掌握其耐药特性，对指导临床合理使用抗生索延缓细菌耐药性的产生，控制耐药菌株的播散和流行具有十分重要的意义。

目前美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐常规检测MRSA的实验方法为头孢西丁纸片法,另外还有自动仪器检测，快速乳胶凝集试验，苯唑西林-盐平板筛选法，纸条扩散法，PCR扩增mecA基因等，这些被推荐作MRSA的筛选和确证的试验一般需要经由分离培养出单个菌落和进行抗生素敏感试验后才能完成，耗时较长。国外研究发现ChromlDmRSA产色培养基对检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的灵敏度及特异性很高，且报告时间快。

为准确评估ChromlDmRSA产色培养基对检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的灵敏度和特异性，笔者将所有临床分离到的金黄色葡萄球菌分别用ChromIDmRSAL产色培养基筛查MRSA和头孢西丁纸片法试验进行对比，将结果比较探讨报告如下。

1材料与方法

1.1菌株来源分离自瑞安市中医院2009年11月至2011年12月住院及门诊患者的中段尿、脓性分泌物、痰、血、切口渗液等标本中有205株金黄色葡萄球菌

1.2药敏纸片头孢西丁纸片购自OXSID公司。

1.3ChromIDmRSA产色培养基购自法国生物梅里埃公司。

1.4质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923

1.5方法

1.5.1细菌鉴定按全国临床检验操作规程，标本经常规培养，菌种纯化后鉴定均为金黄色葡萄球菌

表1两种方法对检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的试验结果(株)

经卡方检验后，P>0.05，按a=0.05检验水平，可以认为两种方法在检测耐甲氧西林葡萄球菌菌的方法学上无显著性差异。ChromlDmRSA产色培养基法的灵敏度=96.2％，特异度=86.3％。

1.5.2标本对象菌株的药敏检验用ChromlDmRSA产色培养基筛查，并进行头孢西丁纸片法比对。以金黄色葡萄球菌ATCC25923进行质量评估(包括培养、能力、试验效果等)。①ChromIDMRSA产色培养基：孵育18—24h后，获得直接鉴定结果。金黄色葡萄球菌：产α-葡糖苷酸酶的菌落呈现绿色。以ATCC25923作阳性质控对照；②头孢西丁纸片法：按标准纸片扩散法药敏试验，将菌液涂布到M—H平板后，贴头孢西丁纸片（30μg），35℃过夜培养，头孢西丁抑菌圈直径≤19mm为MRSA。

1.6统计学方法应用SPSS13.0软件进行统计学分析，计数资料采用卡方检验。

2结果

在205株金黄色葡萄球菌用ChromlDmRSA产色培养基和头孢西丁纸片法检测MRSA的结果如表1。

3讨论

中国细菌耐药性监测-CHINET监测显示MSSA除万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺外，对其他11种抗菌药物的敏感率明显高于MRSA。金黄色葡萄球菌是引起院内感染的主要致病菌，引起医院内和患者间广泛传播。近年来，MRSA的感染率逐年升高。MRSA感染一旦出现，极易造成病室内流行，同一克隆的MRSA可以在同一病房或一个医院、一个地区引起暴发流行。故及时检测MRSA对于指导临床治疗非常重要。通过查阅中外文献，吴文娟，汤一苇叙述医院感染控制中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌筛查现状，分析了筛选MRSA的各种方法的利弊。分子检测技术特异性，敏感度均较高，但需要设备及成本也高，而各种选择性显色培养基在24～48h能有较高的灵敏度及特异度，又不需要特殊设备，适合基层医院的普遍开展，及时筛选MRSA,做好隔离，预防措施。在Surbhimalhotra-Kumar，Jose′CortinasAbrahantes，WilberSabiiti等9人的研究显示MRSA的各种产色培养基灵敏度和特异度均较高[3]。本实验选择的ChromIDmRSA产色培养基灵敏度与国外报道数据接近，特异性也与国外报道数据相当，考虑原因为：1、菌株数量有限；2、入选菌株为明确金黄色葡萄球菌，可能一定程度上掩盖了此平板在直接筛查临床标本时特异性上的不足。

从本研究可见，ChmmlDmRSA产色培养基在检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌有较强优势，在使用纸片扩散法做细菌药敏的实验室，建议加作ChmmlDmRSA产色培养基以便更好地筛查MRSA，或可对ICU等重点科室直接以此平板混合培养患者标本以快速有效筛查MRSA。而且相较于传统培养能应用于更广泛的研究范围及更大量的临床标本的流行病学调查。但由于本研究中的菌株数量及其涉及的菌属有限，因此有必要对其进行更大样本量和涉及菌属的评估，有条件的实验室可进行CLSI纸片确证法及PCR扩增测序确证，以进一步检测其灵敏度和特异性。

参考文献

[1]吴文娟，汤一苇.医院感染控制中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌筛查现状[J].InfectdisInfo,2009,22（1）：54-57.

[2]刘敏，刘井波，张正.MRSA分子演化和致病因子研究进展[J].中国实用诊断学，2009，13（11）：1654-1658.

[3]Malhotra-KumarS,SabiitiW,LammensC,ela1[J].EvaluationofChromogenicmediafordetectionofMethicillin-ResistantStaphylococcusaureus，JOURNALOFCLINICALmICROBIOLOGY，2010，48（4）：1040-1046.