检测痰样本中MPB64蛋白在结核病实验室诊断中的价值

检测痰样本中MPB64蛋白在结核病实验室诊断中的价值

王霖

王霖（昆明市第三人民医院<昆明结核病防治院>云南昆明650301）

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）05-0088-02

【摘要】目的讨论检测痰样本中MPB64蛋白的含量作为快速诊断结核病方法的可行性。方法对59例肺结核病患者和67例非肺结核病患者进行实时荧光定量PCR检测结核杆菌DNA、痰涂片染色抗酸菌检查和免疫胶体金法检测MPB64蛋白，对比分析三种方法的检测结果，并根据诊断结果对MPB64蛋白检测方法进行评价，讨论其是否可作为一种结核病的快速诊断方法。结果MPB64蛋白检测与荧光定量PCR检测、涂片染色结果符合率为62.3%；其敏感度、特异度、及准确度分别为57.45%、67.47%和62.17%，而涂片染色法与荧光定量PCR方法的敏感度均低于40%。此外，MPB染色法在特异度与准确度两个要素方面要要明显低于涂片染色法（100%、67.12%）和定量PCR方法（96.58%、69.45%）。结论虽然采用MPB蛋白法在诊断结核病中有较高的敏感度，但由于特异度和准确度都相对较低，因此MPB蛋白直测法仅可作为初步排查方法，能否作为快速诊断的方法还有待深入研究。

【关键词】MPB64蛋白结核病快速诊断

我国一直以来是全球结核病高负担国家之一，结核病发病人数高居世界第二位，结核病的防治任务非常艰巨。快捷、准确临床诊断方法对于结核病的防治有着十分重要的意义。本文针对MPB64在痰液中的存在作为快速诊断结核病的方法进行了研究。

1材料与方法

1.1一般资料

结核病患者组为我院近2010年至今接诊的59例，年龄37～71岁，平均年龄为43岁，其中男性患者31例，占52.54%。非结核病患者组67例，年龄为34～68岁，平均年龄为45岁，男性32例，占47.76%。肺结核病诊断依据为中华医学会结核病分会制定的“肺结核诊断和治疗指南”，痰样本均采用无菌容器进行采集。

1.2方法

本文分别采用三种不同的方法对痰样本进行分析。①荧光定量PCR检测分析。5700型荧光定量PER仪(美国PE公司生产)，荧光定量PCR引物和探针均由上海基康生物技术有限公司合成，具体步骤严格按照实验仪器和试剂的说明书进行。②涂片染色法，采用金胺“O”染色法，检验试剂按照参考文献[2]自行配置，具体操作步骤严格按照《结核病诊断实验室检验规程》规定的实施。在上述三种方法均得到结果后，对比分析三种方法的检测符合率，并参照临床诊断结果，分析各方法的敏感度、准确定和特异度。

2结果

在126例痰样本检测本中，MPB64蛋白检测与荧光定量PCR检测、涂片染色结果符合率为62.3%。MPB64蛋白检测法的敏感度为57.45%，均明显高于涂片染色法和荧光PCR法（均低于40%）。此外，MPB染色法在特异度与准确度两个要素方面要要明显低于涂片染色法（100%、67.12%）和定量PCR方法（96.58%、69.45%）。具体结果见表1、表2。

表1MPB64蛋白检测与其他两种方法检测结果对比（单位：例）

3讨论

常见的结核病诊断方法有涂片染色法、荧光定量PCR法和血清学方法等，不同诊断方法有着各自的优势。近年来，随着结核病患者人数持续高居不下，因此，探讨一种新的快速的诊断方法有着十分重要的意义。MPB64蛋白作为结核分枝杆菌的分泌物是为大家公认的，但本文发现包括MPB64蛋白检测法在内的三种方法检测符合率都不高，主要因为MPB64蛋白检测法有较高的阳性检出率。导致该种结果的可能原因是：病灶中的结核分歧杆菌本身没有进入痰液中，但其分泌的MPB64蛋白可以通过某种途径进入呼吸道分泌物。

从上述结果可以看出，尽管MPB64蛋白检测法的敏感度高于其他两种方法，但其准确度和特异度均低于荧光定量PCR法和涂片染色检测法。因此，MPB64蛋白检测还不能作为结核病快速诊断的一种临床方法使用，但在初步排查过程中可以应用。对于该种方法的研究应该进一步展开，以提高对结核病的诊断。此外，结核病区别于其他其他疾病的临床特征要进一步发现，这样不仅能够提高对结核病的诊断速度，而且对改进结核病的治疗方法都有着积极的促进作用。

参考文献

[1]袁丽娜，党霞，史慧敏等.不同检测方法对结核病的诊断价值[J].郑州大学学报（医学版）.2011,46(6):945～947.

[2]肖东楼.中国结核病防治工作进展与成就[J].中国防痨杂志.2008,30(6):491～493.

[3]陈红兵，周志红，贺润年等.荧光定量PCR技术在结核杆菌检测中的应用[J]．实用医学杂志.2008,24(21)：3765～3767.

[4]杨虹,苏琪.金胺"O-罗丹明(B)法与萋尼法在抗酸杆菌涂片镜检中的比较[J].现代检验医学杂志.2007，22(2)：106-107.