脂联素在胃癌中的表达及其与临床病理关系的研究

脂联素在胃癌中的表达及其与临床病理关系的研究

张健1王雪松1赵洪礼2李洪运1

张健1王雪松1赵洪礼2李洪运1

（1济宁市第一人民医院山东济宁272400）

（2山东省消化系统疾病防治中心山东济宁272033）

【摘要】目的脂联素是脂肪细胞分泌的一种细胞因子，在机体的新陈代谢和癌症的发生发展中具有重要作用。目前已有研究表明脂联素受体与胃癌的发生有关。本实验的目的是研究脂联素在胃癌中的表达与临床特征的关系。方法用免疫组化的方法检测80例胃癌组织中脂联素的表达情况。利用SPSS13.0统计脂联素表达与胃癌临床病理特征的关系。结果在胃癌中脂联素的阳性表达率为45%，阳性表达者淋巴结转移发生率较低。结论某些胃癌组织表达脂联素，脂联素可能抑制胃癌的淋巴结转移。

【关键词】胃癌脂联素免疫组化

【中图分类号】R735.2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）48-0035-02

Theexpressionofadiponectiningastriccanceranditscorrelationswithclinicopathologicalcharacteristics

ZHANGJian，WANGXue-song，ZHAOHong-li，LIHong-yun

（*TheFirstPeople'sHospitalofJiningCityJining272400，ShandongProvince,China，ShandongControlCenterforDigestiveDiseases,Jining272033,ShandongProvince,China）

【Abstract】objectiveAdiponectinisacytokinessecretedexclusivelybyadipocytes.Itplaysanimportantroleinmetabolismandinthedevelopmentandprogressionofcancer.Thisstudyaimedtoinvestigatethepossibleassociationbetweentheexpressionofadiponectinandclinicopathologicalvariablesingastriccancer.MethodsTheexpressionofadiponectinwasdetectedbyimmunohistochemistry(IHC)in80gastriccancertissues.ResultsTheratesofpositiveexpressionadiponectinwere40%（32/80）ofgastriccancertissues.Andtheexpressionofadiponectinwasassociatedwithlowriskoflymphaticmetastasis.ConclusionAdiponectinmayplayananti-canceractivityingastriccancer.

【KeyWords】GastriccancerAdiponectinImmunohistochemistry

前言

胃癌是常见的消化道恶性肿瘤之一[1]，是引起癌症死亡的一大主要病因。对于已经发生周围组织浸润或转移的胃癌患者，往往只能选择姑息性手术治疗，患者生活质量及预后很差。近年来流行病学研究结果表明，血清脂联素含量与胃癌的分期呈负相关系[2]。为进一步探讨脂联素在胃癌中的作用，我们利用免疫组化研究了脂联素在胃癌组织中的表达，并分析了它的表达与胃癌临床病理特征的关系。

1材料和方法

1.1组织来源

组织标本来自济宁市第一人民医院病理科2007-2010年80例胃癌组织，其中男性51例，女性29例。

1.2试剂和材料

一抗为鼠抗人脂联素单克隆抗体,购自abcam公司(ab22554)。二抗和DAB显色液为GTVisionTMII抗兔/鼠通用型免疫组化检测型试剂盒。柠檬酸抗原修复液（PH6.0）购自北京中杉金桥生物技术科技有限公司。

1.3免疫组织化学方法

石蜡切片，常规切为厚度约约4μm。方法步骤：1）烤片60℃1小时，二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水,PBS清洗。2）水浴锅柠檬酸抗原修复97℃10分钟，室温自然冷却约1小时，PBS清洗。3）3%过氧化氢一滴37℃10分钟，PBS清洗。4）一抗(1:100)4℃过夜，PBS清洗。5）二抗37℃30分钟，PBS清洗。6）DAB显色3分钟左右。7）苏木素复染，梯度酒精脱水、透明，中性树胶封片。显微镜下拍照，阴性对照选用PBS代替一抗。

1.4免疫组化分析

免疫组化分析，阳性结果为棕黄色，主要在细胞膜和细胞浆中表达。1）染色强度评分方法：0分（阴性）、1分（弱阳性）、2分（中等阳性）、3分（强阳性）。2）染色范围的评定:按照阳性细胞百分率进行评分，0分（0%），1分（1-25%），2分（26-50%），3分（51-100%）。3）染色强度和阳性细胞百分率的乘积为免疫组化染色的最后评定标准，0-4分为阴性，6-9为阳性。免疫组化切片有两位经验丰富的病理学专家对染色结果进评定，一致率大于90%，其差异经最后的商讨判定染色结果。

1.5统计分析

应用SPSS13.0统计软件对实验数据进行统计分析，对分类变量和连续变量分别行χ2检验和t检验，P＜0.05具有统计学意义。

2结果

2.1脂联素表达与临床病理联系

脂联素主要在胃癌细胞膜和细胞质中表达，实验结果显示：脂联素在某些胃癌中高表达，阳性率为40%（32/80）（图1）。主要表达在细胞浆内。脂联素的表达与年龄，性别，组织类型等无关（p>0.05），但与淋巴结转移有关，脂联素表达阴性者更容易发生转移（p<0.05）。

3讨论

许多研究报道，肥胖与多种癌症的发生发展有关[3-5]，包括胃癌[6]。2011年Tsukada等[7]通过免疫组织化学、Westernblotting方法检测脂联素受体1（R1）和脂联素受体2（R2）在胃癌细胞株(MKN45、TMK-1、NUGC3和NUGC4)中的表达，结果显示在胃癌中，脂联素通过R1抑制细胞的增殖，促进细胞凋亡，同时R1可能成为治疗胃癌的新靶标。脂联素在肥胖者中血清浓度降低，这可能是介导肥胖与肿瘤发生，发展的关联之一。研究表明在低血浆脂联素浓度与高胃癌危险性显著相关[2]，提示高脂联素血浆浓度可能对胃癌的发生有抑制作用。实际上，在体外脂联素能够抑制胃癌细胞的生长，在裸鼠模型中，注射脂联素抑制了胃癌细胞的生长和腹膜转移。

与以上报告相一致，我们的免疫组化结果显示，虽然脂联素的表达与胃癌的病理分级无关，但胃癌转移病例脂联素表达阳性率显著低于胃癌未转移病例，高脂联素表达与胃癌细胞的淋巴结转移密切相关，提示脂联素可能在抑制胃癌的转移的机制中发挥一定的作用。这些研究提示脂联素可作为胃癌治疗的可能的新靶点。脂联素具有调节糖脂代谢、改善胰岛素抵抗、抗炎、抗动脉粥样硬化及抗肿瘤的作用。其抗肿瘤机制可能与其对肿瘤细胞的直接作用、抗血管生成和诱导肿瘤细胞凋亡相关，其具体机制有待今后研究探讨。

参考文献

[1]ChenWQ,ZhangSW,ZouXN,ZhaoP:Cancerincidenceandmortalityinchina,2006.ChinJCancerRes2011,23(1):3-9.

[2]IshikawaM,KitayamaJ,KazamaS,HiramatsuT,HatanoK,NagawaH:Plasmaadiponectinandgastriccancer.ClinCancerRes2005,11(2Pt1):466-472.

[3]RobertsDL,peC,RenehanAG:Biologicalmechanismslinkingobesityandcancerrisk:newperspectives.AnnuRevMed2010,61:301-316.

[4]KhandekarMJ,CohenP,SpiegelmanBM:Molecularmechanismsofcancerdevelopmentinobesity.NatRevCancer2011,11(12):886-895.

[5]DePergolaG,SilvestrisF:Obesityasamajorriskfactorforcancer.JObes2013,2013:291546.

[6]JiBT,ChowWH,YangG,McLaughlinJK,GaoRN,ZhengW,ShuXO,JinF,FraumeniJF,Jr.,GaoYT:BodymassindexandtheriskofcancersofthegastriccardiaanddistalstomachinShanghai,China.CancerEpidemiolBiomarkersPrev1997,6(7):481-485.

[7]TsukadaT,FushidaS,HaradaS,TeraiS,YagiY,KinoshitaJ,OyamaK,TajimaH,FujitaH,NinomiyaI,FujimuraT,OhtaT.Adiponectinreceptor-1expressionisassociatedwithgoodprognosisingastriccancer.JExpClinCancerRes2011;30:107.