徐峰倩李静(连云港市第二人民医院感染管理科江苏连云港222023)
【摘要】目的通过分析内毒素检测过程中的相关因素,有效避免干扰,确保实验结果正确。方法对不同时间、不同模式下提取的20例透析液、透析用水进行定性、定量分析。结果pH值在6.5-7.0时,内毒素阳性对照管能正常显示阳性。pH值超过此范围时,内毒素阳性对照管出现假阴性。残余过氧乙酸≤0.5mg/L时,内毒素阳性对照管能正常显示阳性。过氧乙酸>0.5时,内毒素阳性对照管出现假阴性。结论规范血透用水、血透液检测,重视各项指标的监测对血液的净化有着至关重要的作用。
【关键词】内毒素过氧乙酸pH值
【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2012)30-0144-02
【bstract】ObjecticeThroughtheanalysisoftherelatedfactorsofendotoxindetectionprocess,effectivelyavoidinterference,toensurethattheexperimentresultscorrectly.MethodsOndifferenttime,underdifferentmodesofextractionof20casesdialysis,dialysiswaterqualitative,quantitativeanalysis.ResultspHvaluein6.5-7.0,endotoxinpositivecontrolcandisplaythepositive.pHvalueexceedsthisrange,endotoxinpositivetotakecareofafalsenegativeresult.Residualperaceticacidis≤0.5mg/L,endotoxinpositivecontrolcandisplaythepositive.Peraceticacidismorethan0.5,endotoxinpositivecontrolfalsenegative.ConclusionSpecificationforwater,hemodialysisfluiddetection,attachimportancetotheindexesofmonitoringonbloodpurificationishavingcrucialeffect.
【Keywords】endotoxinPeraceticacidpH
血液透析目前被广泛用于临床,在提高患者生存质量的同时,也存在着一定的风险。因为透析用的透析用水及透析液在配置保存等不当的情况下很容易被污染。部分污染因子可以透过透析膜而被交换进入患者血液内,可导致病人体内细菌、内毒素、离子浓度改变,严重影响病人的身体健康。本文通过一些常见的影响因素,进行相关的分析。希望能够引起相关专业人员的重视,避免医疗安全隐患,现报告如下:
1.方法与资料
1.1不同时间、不同模式提取透析液、透析用水20例。
1.2检测内容:内毒素、pH、过氧乙酸
1.3检测方法
1.3.1内毒素:快速定性半定量凝胶法,使用科德角国际生物医学科技(北京)有限公司凝胶内毒素快速检测试剂盒(批号为PS11005-10PS11002-10),判定标准以每批质量检测报告为准。
1.3.2pH值:精密pH试纸测定
1.3.3过氧乙酸:测试纸粗测,硫代硫酸钠滴定法定量检测。
2.结果
共测20份样本,其中透析用水10例,透析液10例,测量结果见表1。透析液及透析用水的细菌内毒素限度(L值)参照AA-MI标准[1]。
2.1pH值pH值在6.5-7.0时,内毒素阳性对照管能正常显示阳性。pH值<6.5时,内毒素阳性对照管出现假阴性。
2.2过氧乙酸过氧乙酸≤0.5mg/L时,内毒素阳性对照管能正常显示阳性。过氧乙酸>0.5时,内毒素阳性对照管出现假阴性。
表120份样本内毒素检测结果
Table1Thetestresultsofendotoxinforthe20samples
样本pH过氧乙酸mg/L内毒素阳性对照测试品内毒素结果
15.07.9--
25.06.4--
35.07.5--
45.05.0--
55.54.5--
65.54.3--
75.54.0--
85.53.8--
95.53.8--
106.02.5--
116.02.3--
126.51.6+-
136.51.7+-
147.00.5+-
157.00.3++
167.00.4+-
177.00.5++
187.00.5++
197.00.4+-
207.00.3+-
3.讨论
病人在透析过程中涉及到很多风险,特别是透析液中内毒素的浓度,透析液中不同离子的浓度。血液透析治疗中使用不足的纯化水可以导致创伤或更严重后果,在使用次标准的透析液时,急性副作用是容易被发现的,但慢性副作用如骨病或慢性溶血等病容易被忽略。整个透析系统包括预处理、反渗机、水管、血透机浓缩液、透析液、体外血液循环,其中任一环节出现问题,就会出现连锁反应。水处理系统应定期进行清洁、消毒、更换零件等。每次清洁消毒后必须进行水质相关检测,如内毒素、细菌、残留消毒剂、离子等。内毒素的分子量在100000-900000,其分解体仅为2000-20000,因此部分可通过透析膜。因透析膜允许部分内毒素的的解体通过,进而进入患者的血液,引起热源反应,有研究显示,5例患者透析器入口内毒素>0.5Eu/mL,虽在透析过程中发生热源反应,但透析后血浆TNFa、IL-6均有明显升高[2]。内毒素的检测受供试品种很多因素的影响。常规下工作人员通常认为供试品受污染,一定出现阳性结果,其实不然,只有在大量革兰氏阴性杆菌或产内毒素的其它细菌污染时才会如此,而污染不一定只是微生物污染,化学污染更为常见。特别是在水处理系统检修后,常用消毒剂先消毒管道,而使用前残留消毒剂未彻底冲净,导致出现假阴性。如果实验过程阳性对照出现阴性,则示该组实验无效,应查找原因。
在检测过程中,作者发现当pH值在6.5-7.0或过氧乙酸≤0.5mg/L时,内毒素阳性对照管即供试管出现假阴性结果。对送检样品pH超过此范围的使用无热源的0.1NHcl或0.1NNaOH进行微调后,阳性对照管显示阳性,表示试验结果有效。有研究表明,一般供试的溶液的pH值在6.0-8.0范围内,在此范围内才能形成最佳凝集,pH值过高过低均可破坏极微量的内毒素,也可影响鲎试剂与内毒素反应过程[3]。本次试验结果与相关研究基本吻合。与美国药典BET法对供试品溶液pH的要求是:测定供试品溶液与鲎试剂溶液的等体积混合液的pH值在6.0-8.0。内毒素检测必须在阳性对照组为阳性,阴性对照为阴性方可判断实验有效。所以,每次进行管道维修后,必须彻底冲净后方可进行采样检测,要达到透析用(反渗)水的水质标准方可放行。
通过以上所述,从事血透工作人员必须掌握内毒素试验的注意事项。内毒素供试品接受检测时,其本身的成分必须符合要求。除了假阳性结果要引起重视,出现假阴性结果更要仔细分析、查找原因,避免医疗安全隐患的发生。
参考文献
[1]AmatoRI,Watertreatmentforbemodialysis,includingthelatestAAMIstandards[J]WepHrolNursJ,2001,28(6):619-629
[2]刘惠兰,李国刚,张晓洁等透析用水及透析液中内毒素污染状况的分析[J]中华内科杂志,1999,38(12):806
[3]张义伟细菌内毒素检查的几点体会[J]中国实用医药,2010,1(5):86-87.