新型抗炎因子白细胞介素37对宫颈癌SiHa细胞表达MMP-2的影响

新型抗炎因子白细胞介素37对宫颈癌SiHa细胞表达MMP-2的影响

郑晓璇杨万勇(通讯作者)黄少卿刘伟畴刘雅丽

郑晓璇杨万勇(通讯作者)黄少卿刘伟畴刘雅丽黄格格梁晓莹

（东莞光华医院检验科广东东莞523416）

【摘要】目的：研究白细胞介素37（IL-37）对SiHa细胞中MMP-2转录表达的调控作用。方法：首先，用Hilymax转染试剂将IL-37过表达载体转染宫颈癌SiHa细胞，而后Trizol法提取对照组及实验组RNA，反转录为cDNA，最后采用qPCR方法检测IL-37及MMP-2的mRNA表达改变情况。结果：IL-37载体转染宫颈癌SiHa细胞后，实验组IL-37mRNA表达较对照组升高约115倍(P<0.001)，显示IL-37重组质粒成功转染SiHa细胞，也表明SiHa细胞中IL-37的基础表达量很低。在MMP-2的表达方面，实验组与对照组相比，MMP-2的mRNA水平下降约31.2%(P<0.05)，表明IL-37对MMP-2的表达具有良好的抑制作用。结论：新型抗炎因子IL-37可抑制SiHa细胞中MMP-2的转录表达。

【关键词】IL-37；SiHa；MMP-2

【中图分类号】R73【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2016）18-0217-02

新型抗炎因子白细胞介素37（IL-37）是最新命名的一种具有强大炎症抑制作用的细胞因子[1]，截止2015年12月31日，世界上发表的相关研究性论文仅百余篇。该分子更多的功能仍有待探索。目前研究表明，IL-37不仅对多种炎症疾病具有良好的治疗作用，其对多种肿瘤如宫颈癌[2]，肝癌[3]等亦具有抗癌作用。MMP-2是肿瘤转移相关的重要因子，本研究初步探讨了IL-37对宫颈癌SiHa细胞MMP-2转录表达的调控。

1.材料与方法

1.1材料

IL-37过表达载体由上海捷瑞生物工程有限公司构建。细胞DMEM培养基及胎牛血清购自Gibco。细胞转染试剂Hilymax购买自上海同仁化学。PCR相关试剂购买自大连Takara公司。

1.2方法

实验分组为对照组及实验组。各组分别收集6孔板2孔的细胞提取RNA。采用RealtimePCR法检测IL-37及MMP-2的mRNA水平改变。其中IL-37的引物序列为：F：GATCACAAAGTACTGGTCCTGG，R:TCCTTTATCCTTGTCACAGTAG.MMP-2的引物序列为：F：5'-GCGGATCCAGCGCCCAGAGAGACAC-3'；R：5'-TTAAGCTTCCACTCCGGGCAGGATT-3'。引物由上海生工合成。而后进行反转录及PCR检测mRNA的表达情况。

2.结果

2.1IL-37过表达载体转染宫颈癌SiHa细胞后，Trizol法提取两组的RNA。PCR结果显示，实验组IL-37mRNA表达较对照组升高约115倍(P<0.001)，显示IL-37重组质粒成功转染SiHa细胞，同时，这一结果也表明SiHa细胞中IL-37的基础表达量很低。

2.2在MMP-2的表达方面，实验组与对照组相比，MMP-2的mRNA水平下降约31.2%(P<0.05)，表明IL-37对MMP-2的表达具有良好的抑制作用。

3.讨论

IL-37是IL-37b成员的简称，是最新命名的一种具有炎症抑制作用的细胞因子。IL-37原属于IL-1家族，2010年底，美国科罗拉多大学的Dinarello院士正式对其命名[1]。目前对IL-37的生物学功能及基因本身的研究尚处于起始阶段。现有研究表明，IL-37不仅对结直肠炎，肝炎等炎症疾病具有良好的治疗作用，其对多种肿瘤如宫颈癌[2]，肝癌[3]，纤维瘤[4]等亦具有抗癌作用，很可能是一种潜在的抗癌分子。

在本研究中，我们探索了该因子对宫颈癌MMP-2表达的影响。我们发现，转染IL-37能够有效抑制宫颈癌SiHa细胞MMP-2的mRNA水平，由于MMP-2与肿瘤转移密切相关，这显示其对肿瘤细胞的迁移侵袭可能具有潜在的抑制作用。总之，IL-37的更多功能仍有待发掘，本研究为该因子在肿瘤防治方面的应用提供了新的线索。

【参考文献】

[1]NoldMF,Nold-PetryCA,ZeppJA,etal.IL-37isafundamentalinhibitorofinnateimmunity[J].Natureimmunology2010,11(11):1014-1022.

[2]WangS,AnW,YaoY,etal.Interleukin37ExpressionInhibitsSTAT3toSuppresstheProliferationandInvasionofHumanCervicalCancerCells[J].JournalofCancer,2015,6(10):962-969.

[3]ZhaoJJ,PanQZ,PanK,etal.Interleukin-37mediatestheantitumoractivityinhepatocellularcarcinoma:roleforCD57+NKcells.SciRep[J].2014，4:5177-5185.

[4]GaoW,KumarS,LotzeMT,etal.InnateimmunitymediatedbythecytokineIL-1homologue4(IL-1H4/IL-1F7)inducesIL-12-dependentadaptiveandprofoundantitumorimmunity[J].JImmunol,2003,170(1):107-113.

本课题由东莞市科技计划社会发展项目（编号2014108101004）资助。