应用碳-13呼气试验检测系统诊断儿童幽门螺杆菌感染

应用碳-13呼气试验检测系统诊断儿童幽门螺杆菌感染

苗岩1齐绍伟1王君龙1王伟1李俊2

苗岩1齐绍伟1王君龙1王伟1李俊2

(1哈尔滨市红十字中心医院150076;2哈尔滨市儿童医院150010)

【中图分类号】R725.7【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）14-0105-02

幽门螺杆菌(helicobacterpylori，Hp)是澳大利亚学者Warren和Marshall于1983年首次从胃炎患者的胃黏膜中分离出的一种螺旋杆菌。诸多研究已证实Hp感染是慢性胃炎、消化性溃疡的致病因素，与胃癌及胃黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤的发生关系密切[1]。近年来，来自成人的流行病学资料显示50%以上成人幽门螺杆菌相关疾病患者其Hp感染是在儿童期获得，绝大多数儿童均有短暂或持续存在的Hp感染，感染的高发年龄在10岁左右，所以儿童是Hp感染的易感人群，并且Hp感染与儿童生长发育及儿童成年后消化性溃疡及胃癌发病有关。因此,在儿童期快速、准确的检测出Hp,早诊断，早治疗具有及其重要的意义，寻求适合儿童的诊断Hp感染的检测技术是我们临床迫切关注的问题。我院采用碳-13呼气实验检测系统，应用于儿童幽门螺杆菌检测，取得满意的效果，现报告如下：

1材料与方法

1.1标本来源：2009年1月—2011年2月，来我院门诊接受碳-13呼气试验检查的儿童患者556例,其中男313例,女243例;年龄2-15岁,临床均有不同程度的反复腹痛、厌食、呕吐、消化不良等症状。这些患者1个月内未使用过抑酸剂、铋剂、抗生素等H.pylori敏感药物。

1.2试剂提供：尿素胶囊药盒由北京原子高科公司提供。红外线同位素能谱分析仪(德国IRIS)由德国Wagner公司提供。

1.3检测程序：受检者隔夜空腹，在安静状态下,先收集受检者服药前的呼气样本，即零时气样本，随后用150ml柠檬酸酸化水送服碳-13尿素胶囊，静坐,按时用气袋收集呼气样本，各试验的具体步骤和结果判读严格按照仪器、试剂盒所附使用说明书进行。

2结果

附表：556例不同年龄（2-15岁）、性别儿童Hp阳性检出例数

3讨论

3.1Hp分离培养：是诊断Hp感染最经典、最可靠的方法之一，其敏感性和特异性分别可达98%和100%,可作为验证其他诊断性实验的金标准。Hp数量过少，细菌繁殖能力差等。Hp培养法费时，操作复杂，目前主要用于科研及药敏试验。因细菌培养依赖于胃镜检查，故在儿童Hp感染诊断中存在一定难度。

3.2尿素酶试验检测:是所有检测手段中最为简便迅速的一种方法，一般与胃镜检查同时进行,为临床上常用的方法。儿童尽快制定治疗方案提供依据,但在采用这一方法时,不能过分追求缩短检测时间，否则会引起假阳性结果的大量增加。

3.3碳-13尿素或碳-14尿素呼气试验（13C-UBT或14C-UBT）

Hp产生的尿素酶可以将内源性和外源性的尿素分解成NH3和CO2,使后者在小肠上段吸收后进入血中随呼气排出,口服一定量的碳-13尿素或碳-14尿素后，可通过质谱仪或液闪仪分别测定呼气中13CO2或14CO2的量来判断有无Hp感染。如无Hp感染，碳-13或碳-14尿素就自尿中排出，则在呼气中不能测得碳-13或碳-14。标准操作为患者隔夜禁食，服用13C或14C标记的混合尿素试剂（服用时可加服营养餐，以延长尿素在胃内滞留时间）,休息30min后收集足量呼气进行检测。此法有两个突出优点:不需通过胃镜获取标本；可对胃内Hp的感染密度作半定量评估，克服由于Hp在胃内呈灶状分布造成的胃活检取样误差,检测Hp感染特异性、敏感性高。该法主要受临界值高低的影响，因此临界值的确定非常重要，此外,也受服药至呼气收集间隔时间长短的影响。碳-13是一种稳定性核素，不具任何放射性，临床上应用无禁忌或限制，敏感性、特异性高，有极好重复性，可常规用于Hp诊断和检测Hp是否根除。而14C最大的不足是具有放射性,故不适用于孕妇、儿童。碳-13、碳-14为根除治疗后复查的首选方法。国外已将其作为追踪观察治疗效果的最好办法,适合大规模流调。它优于血清学的一个明显特征是可以表明目前是否有Hp感染。[2]

3.413C-UBT应用：C-UBT检测胃内H.pylori感染，属于非侵入性诊断方法,且13C为稳定同位素，无防射性,故此检查安全、无痛苦，适用于包括儿童和孕妇在内的所有人群。由于碳-13尿素在胃内均匀分布，可与胃黏膜充分接触，避免了因H.pylori灶性分布所造成的采样误差，具有高度的敏感性和特异性，是一种简单、可靠的诊断方法。研究发现，与快速尿素酶试验、组织学检查和血清H.pylori抗体检测等单项诊断方法相比，碳-13-UBT的敏感性和特异性较高，已被认为是取代传统方法诊断H.pylori感染和监测抗H.pylori药物疗效的金标准[3]。

3.513C-UBT灵敏度和特异性的影响：碳-13-UBT结果时应考虑到某些因素的影响可出现假阳性和假阴性结果，若近期服用抗生素、铋剂、抑酸剂等药物，可抑制H.pylori尿素酶活性而出现假阴性,故本试验选择的病例要求在一个月内未服用过相关药物。为避免胃内杂菌的影响造成假阳性，试验中采用了柠檬酸试验餐进行胃内酸化，降低pH值,一方面激活H.pylori尿素酶，灭活非H.pylori尿素酶,另一方面延缓胃排空，使H.pylori尿素酶与碳-13尿素有充分的作用面积和时间，从而提高试验的特异性和准确性。

通过556例13C-UBT检测结果分析，发现儿童与成年人的碳-13-UBT检测方法，在呼气样本收集时间上不能采用同一标准。成年人在服药后20-30min收集呼气样本就能得到理想可靠的检测结果，而根据我们的试验数据分析，儿童呼气样本的收集时间要延长到服药后40min，才能得到准确可靠的检测结果。

参考文献

[1]WangKX，WangXF，PengJL，etal.DetectionofserumantirHelicobacterpyloriimmunoglobulinGinpatientswithdifferentdigestivemalignanttumors[J].WorldJGastroenterol，2003，9(11):2501-2504.

[2]王青霞，安会波，郭大丽，等.两种不同样本收集时间对13C-尿素呼气试验检测儿童幽门螺杆菌的结果比较.河北医药，2009，31,（22）：3093-3094.

[3]KleinPD，MalatyHM，GrahamDY，etalNoninvasivedetectionofHelicobacterpyloriinfectioninclinicalpractice:the13C-ureabreathtest.AmJGastroenterol1996，91:690-694.