藤茶水提液对肢体缺血再灌注大鼠肝脏的保护作用

藤茶水提液对肢体缺血再灌注大鼠肝脏的保护作用

袁杰

藤茶水提液对肢体缺血再灌注大鼠肝脏的保护作用

袁杰（湖北民族学院附属医院检验科湖北恩施445000）

【中图分类号】R975+.5【文献标识码】B【文章编号】1672-5085(2009)06-0212-03

【摘要】目的观察藤茶水提液对大鼠肢体缺血再灌注后肝脏损伤的影响，以进一步探讨藤茶水提液对肢体缺血再灌注后肝脏功能的保护作用。方法实验用雄性Wistar大鼠18只，随机分为对照(Contro1)组，缺血再灌注(IRI)组和藤茶水提液处理(Treating)组。每组6只。分别测定血浆谷草转氨酶(ALT)、谷丙转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)，血浆和肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、丙二醛(MDA)的含量变化及肝组织的湿／干重比值(W/D)。结果发现藤茶水提液减轻了肢体IR后引起的ALT、AST、LDH、XOD、MDA、W/D含量的升高，并且增强了SOD的活性。结论藤茶水提液对肢体IRI继发的肝脏功能损伤具有保护作用。

【关键词】再灌注损伤肝脏功能肢体藤茶水提液

TheEffectsofAmpelopsisgrossedentataonLiverFunctioninlimbIschemia-ReperfusionInjureRats

YUAN-Jie

(AffiliatedHospital,MedicalSchoolofHubeiInstituteforNationalities,HubeiEnshi445000)

【Abstract】ObjectiveToobservetheprotectiveeffectofAmpelopsisgrossedentataontheliverfunctionafterlimbischemiareperfusioninjury(IRI).MethodsUsinglimbIRImodelrats.Animalwererandomlypidedintothreegroups：controlgroup;IRIgroupandtreatinggroup.ThevaluesofALT、ASTandLDHintheplasmawereobserved.Thecontentsofsuperoxidedismutase(SOD).xanthinoxidase(XOD).malondialldehyde(MDA)intheplasmaandtheliverweremeasured.Thelevelsofwet/dryratio(W/D).ResultItwasfoundthatAmpelopsisgrossedentataattenuatedtheincreasecontentsofALT、AST、LDH、XOD、MDAandW/D.ItwasalsofoundthatAmpelopsisgrossedentataincreasedthevaluesofSOD.ConclusionAmpelopsisgrossedentataprotectedliverfunctionfromlimbischemiareperfusioninjuryinrats．

【Keywords】reperfusioninjury；liverfunction；limb；Ampelopsisgrossedentata

藤茶系葡萄科蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄Ampelopsisgrossedentata(Hand-Mazz)W.T.Wang的茎叶。又名甜藤茶、甜婆茶，主要分布在我国湖北、湖南、广西、江西、福建等地，为民间茶、药两用植物。该药味甘、淡，性凉，在民间已有数百年的饮用历史了，具有清热解毒之功效。研究表明[1-2]，藤茶具有抗炎、镇痛、抑菌、抗高血压、降血糖及增强免疫等作用。本研究探讨藤茶水提液对大鼠肢体缺血再灌注后肝脏损伤的影响。

l材料与方法

l.1模型复制与分组

雄性Wistar大鼠(体重212±15.8g)由同济医科大学实验动物中心提供。随机分为三组，每组6只：对照(Contro1)组、缺血再灌注(IRI)组和藤茶水提液处理(Treating)组。藤茶，由湖北恩施自治州农业科学院提供，制成20％藤茶嫩茎叶水提液。对照(Contro1)组和缺血再灌注(IRI)组用生理盐水灌胃四周，藤茶水提液处理(Treating)组用藤茶水提液灌胃四周，各组每天灌胃剂量为10.5ml·kg-1。术前禁食12小时，自由饮水，乙醚浅麻醉下以橡皮带环绕结扎大鼠双后肢根部，阻断血流4小时后松解。恢复血流灌注，复制肢体缺血再灌注损伤模型。于松解结扎前向腹腔注入20%乌拉坦(5ml／kg)麻醉。颈外静脉注入1000u／kg肝素抗凝。缺血再灌注(IRI)组和藤茶水提液处理(Treating)组，缺血4小时再灌注4小时，模型制作如上，对照(Contro1)组，模拟性肢体松绕橡皮带但不结扎。

1.2指标观察

1.2.1血浆生化指标测定结束实验时经腹主动脉取血，离心取血浆，测定谷草转氨酶(ALT)、谷丙转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、及黄嘌呤氧化酶(XOD)含量。

1.2.2肝组织生化指标测定结束实验时迅速取出肝组织冻存部分制成匀浆，测定肝组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)并留取定量肝组织烘干记录组织湿/干重比值(W/D)。ALT、AST、LDH用日立7060型全自动生化分析仪检测；MDA、SOD、XOD用比色法测定（756MC型紫外可见分光光度计，上海分析仪器总厂），试剂盒购自南京建成生物制品公司，其余试剂为市售分析纯产品。

1.2.3统计处理结果以均数±标准差（±S）表示，以

SPSSFORWINDOWS10.0软件进行t检验统计学处理。

2结果

2.1血浆ALT、AST、LDH、MDA、SOD、XOD含量的变化。见表1

2.2各组动物肝组织中SOD、XOD、MDA和W/D值变化。见表2

3讨论

大量研究表明肢体缺血再灌注后可发生再灌注损伤，并且可引起一些远隔组织器官的损伤，但具体机制不很清楚。可能与氧自由基有关。肢体IRI后可产生大量氧自由基，使缺血肢休发生再灌注损伤，同时，自由基也可通过血流转移至远隔组织器官，直接或通过激活中性粒细胞，使易感组织损伤，这种损伤主要是由于自由基引发的脂质过氧化反应造成的[3]。

许多研究表明：藤茶有降脂、抗炎及免疫调节作用[4、5、6]:藤茶对实验大鼠有辅助降血脂作用；能显著抑制大鼠巴豆油性肉芽肿（抑制率分别为21％、43％）的形成。这表明藤茶对炎症晚期的纤维结缔组织增生有较强的抑制作用；藤茶对机体的免疫功能有显著的调节作用，可以抑制机体的非特异性免疫功能而增强机体的特异性免疫功能，同时还可以增强免疫低下小鼠的非特异性免疫功能。

本实验在肢体缺血再灌注损伤动物模型中发现，肢体再灌注后可引起血和肝组织中自由基清除酶SOD减少而促进自由基生成的酶XOD含量升高、脂质过氧化物MDA的含量增加；反映肝组织水肿情况的W/D升高；肝功能受损导致血中ALT、AST含量升高，LDH漏出增多。而藤茶水提液则减轻了IRI后引起的血中转氨酶升高、LDH漏出及XOD、MDA、W/D的升高，并且增加了SOD的活性。提示藤茶水提液对肢体IRI继发的肝脏损伤有明显的保护作用。

本实验结果显示肢体IRI后可引起肝脏水肿、自由基生成增多、中性粒细胞浸润、肝功能受损。藤茶水提液可减轻肢体IRI后引起的肝脏水肿、降低体内自由基水平，减轻组织脂质过氧化反应程度及中性粒细胞浸润、保护肝脏功能。但是，这种保护作用的机制较为复杂，尚待进一步探讨。湖北恩施藤茶资源极为丰富，为珍贵的药饮两用植物，产量较高，其经济价值不断有新的发现，有待于进一步研究开发。

参考文献

[1]熊大胜，朱金桃，刘朝阳．显齿蛇葡萄嫩茎叶提取物抑菌作用的研究[J]．食品科学，2000，2：48-51.

[2]郑作文，曾春晖，林英辉．广西藤茶中双氢杨梅素皮素对小鼠急性肝损伤的保护作用[J]．广西中医学院学报，2002，5：10-11.

[3]王保强，张连元，门秀丽，等．缺血预适应对肢体缺血

再灌注大鼠肝脏的保护效应[J]．肝胆外科杂志，2004，12（1）：58-60.

[4]陈玉琼，向班贵，倪德江，等恩施富硒藤茶降血脂作用研究[J]营养学报，2006，28（5）：448-449.

[5]崔晓燕，王刚．藤茶提取物的抗炎作用研究[J]．中华实用中西医杂志，2007，20（17）：1473-1475.

[6]崔晓燕，王刚，董玫．藤茶提取物的免疫调节作用研究[J]．中华实用中西医杂志，20（4）：317-319.