高效液相色谱在药物分析中的应用进展

高效液相色谱在药物分析中的应用进展

谢秋红邵大志

谢秋红邵大志（四平市中心人民医院吉林四平136000）

【中图分类号】R96【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）32-0307-02

【摘要】高效液相色谱法(High—PerformanceLiquidChromatography，HPLC)是以液体作为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。其特点是分析速度快、分离效率高、检测灵敏度高、检测自动化、适用范围广、组分易回收、样品处理较简单。本文从以下几个方面综述了高效液相色谱法在药物分析中的研究进展。

【关键词】高效液相色谱法药物分析应用

现代药学的迅速发展促进药物及其代谢物在机体内处置过程的研究不断深入，一方面对体内药物分析研究方法和手段提出了越来越高的要求，另一方面也推动了体内药物分析研究方法的蓬勃发展[1]。如今，HPLC已成为反映世界各国药典水平先进性的指标之一[2]。

1高效液相色谱作为常规分析方法在药物分析中的应用

高效液相色谱法作为药物分析中的最主要的分析方法，常被作为常规分析检验方法而广泛应用[3]。近年来在这个方面的研究比较多，康自华等[4]针对近几年国际奥委会医学委员会公布的禁用表中新增药物及一系列利尿剂的相关化合物进行了研究，建立了同时分析13种利尿剂的高效液相色谱测定方法，检出限小于5ng。张晓青等[5]采用反相离子对高效液相色谱法研究了唑来膦酸及其有关化合物的色谱分析与分离方法，该方法简单快速，唑来膦酸与有关化合物的分离良好，适用于唑来膦酸的常规分析。另外，国内在这个方面的研究还应用在兴奋剂中几种易分解药物、乙酰螺旋霉素活性成分、嘌呤类化合物等药物上[6]。这些研究充分利用了高效液相色谱的特点，并使之与其他检测方法联用，使之在药物分析生命科学领域的应用更具重要意义[7]。

2临床生物样品分析及药代动力学研究

高效液相色谱法能同时进行分离和定量测定的优点在治疗药物检测和药物代谢动力学中体现地尤为突出[8]。为了达到药品应用的安全、有效、可靠，这就需要了解和研究药物及其制剂在体内过程（吸收、分布、代谢、排泄），以便研究药物的作用机制及药效学[9]。同时随着药物分析技术的不断进步和发展，可对人体和动物体内（体液、组织和血中）药物及其代谢物的浓度进行定量分析，它对药品的评价、指导临床合理用药和药代动力学研究均具有重要的意义和现实需要[10]。

高效液相色谱测定药物在肌体内的浓度，并结合一定的统计方法对数据进行处理可以对药物代谢动力学进行研究。刘湘新等[11]对家免单剂量静注和灌服儿茶素，用高效液相色谱法测定其血药浓度，注给药后的药时数据符合无吸收二室开放模型。张祚新等[12]应用HPLC法测定了单次混饲口服氧氟沙星(10mg／kg)后，鲤鱼体内不同时问的血浆药物浓度，结果表明，其药代动力学特征符合一级吸收一室开放模型，氧氟沙星适用于鱼类细菌性疾病的预防和治疗。李克等[13]建立了反相高效液相色谱法监测人口服地尔硫卓缓释片后血药浓度，监测了8名健康人口服盐酸地尔硫卓缓释片后的不同时间的血药浓度变化，计算了有关的药代动力学参数。结果表明，血药浓度在15～300ug／L范围内线性关系良好。

高效液相色谱在药物代谢动力学上的研究主要是为药物代谢动力学软件提供数据，并最终通过药代动力学软件处理得到药物动力学参数，以便有利的指导药物的开发、研制及合理用药，以达到安全有效可靠的治疗。[14]

另外,近年来药物制剂的生物利用度(bio-availability)[15]和生物等效性(bioequivalence)已成为一个国际上瞩目的重要问题，它极大地影响着药品的发展及管理。由于分析技术的飞速发展，从而奠定了比较药品生物利用度的基础。通过研究同一药物的不同制荆的生物利用度，可确定这些制剂的生物等效性[16]。

3高效液相色谱在药物含量的测定研究应用进展

高效液相色谱法应用于药物含量的测定在药物分析中是主要的一个方面，是一种集分离和测定为一体的分析方法，主要的特点是：专一性强，灵敏，快速简便[17]。下面按应用的不同从以下几个方面论述近年来的研究进展情况。

3.1高效液相色谱在药物(含草药)成分含量测定上的应用

中药材及其制剂组成复杂，基中不少有效成分的含量测定也越来越多地采用了高效液相色谱法[18]。关日晴[19]采用高效液相色谱法测定盐酸洛美沙星滴眼液中的洛美沙星含量。此外国内还对喹诺酮类抗菌药[20]、复方阿莫西林粉中阿莫西林和克拉维酸[21]、芩连口服液中黄芩苷[22]、饲料中氯羟吡啶[23]、注射用硫酸奈替米星[24]、小诺霉素中C2b[25]、保健食品中的西地那非和西力士[26]、植物愈伤组织中的喜树碱及其衍生物[27]、饲料中十三种磺胺类药物[28]等的测定进行了研究。

3.2高效液相色谱在药物残留测定上的应用

由于高效液相色谱能够对含量复杂组分进行定量分析，故被广泛使用于药物残留的测定上。周东海等以高效液相色谱法建立了猪、羊、鸡肝组织中西维因残留量的检测方法，进而确定了药物残留痕量符合分析要求。林海丹等研究了动物源性食品中甲氧苄胺嘧啶药物残留的提取、净化和高效液相色谱分析条件。此外，在人血中药物含量的测定中也有很多的应用。金鸣等建立了血浆及尿液中异烟肼的高效液相色谱快速测定方法,提高了对血浆及尿液中异烟肼浓度检测的准确性。本方法在药物评估、法医鉴定等方面有很大应用前景。

3.3在鉴别中的应用

在HPLC法中，保留时间与组分的结构和性质有关，是定性的参数，可用于药物的鉴别。如头抱拉定、头孢噻酚钠等头孢类药物以及地西泮注射液、曲安奈德注射液等多种药物均采用HPLC法进行鉴别。

3.4在杂质检查中的应用

HPLC分离效能高，灵敏，在药物的杂质检查中应用广泛。主要用于药物中有关物质的检查。若杂质是已知的，又有杂质的对照品，可用杂质对照品做对照进行检查；若杂质是未知的，可以采用主成分自身对照法或峰面积归一化法进行检查[33]。

4结语

本文论述了HPLC及其联用技术在常规药物分析、临床生物样品分析及药代动力学研究等方面的新进展。高效液相色谱法由于分析速度快、分离效率高、检测灵敏度高、检测自动化、适用范围广、组分易回收、样品处理较简单等优点，在确定药方案和治疗剂量，以及药物动力学分析和药效学评价方面提供了很好的基础，有着广泛的应用前景。HPLC的出现为现代药代动力学的发展创造了新的契机，能够满足现代药代动力学对高效能分析仪器的迫切需要，为现代药代动力学的发展提供更加强大的分析平台。随着HPLC联用技术的应用更加广泛，无疑将进一步促进我国仪器的发展，对我国生命科学研究的发展和环境监测都有重要意义。

参考文献

[1]杨杰.高效液相色谱仪检测器进展及其在药物分析中的应用[J].实用药物与临床,2007,(03).

[2]郭涛主编,新编药物动力学[M].中国科学技术出版社,2005.

[3]孙毓庆主编,现代色谱法及其在药物分析中的应用[M].科学出版社,2005.

[4]康自华,阳小成,陈婷.高效液相色谱法在药物分析中的应用[J].广东微量元素科学,2006,(08).

[5]张晓青，蒋晔．徐智儒．唑来膦酸及其有关化合物的反相离子对高效液相色谱分离[J].色谱，2004．22(4)：428—430．

[6]吕娟涛,杨伟丽,潘秋燕.高效液相色谱法在药学研究中的应用与进展[J].卫生职业教育,2002,22:91-92.

[7]ApproachestoHigh-PerformancePreparativeChromatographyofProteins.SunY,LiuFF,ShiQH.AdvBiochemEngBiotechnol.2009Apr17.

[8]PrashantMusmade,G.Subramanian,K.K.Srinivasan.Highperformanceliquidchromatographyandpharmacokineticsofaceclofenacinrats[J].AnalyticaChimicaActa,2007,585:103-109.

[9]张旭光,夏运成,彭佑铭,刘伏友.高效液相色谱在临床治疗药物监测中的应用进展[J].中国医师杂志,2004,(12).

[10]严基东.高效液相色谱在现代医药科研的应用[J].牡丹江医学院学报,2006,(03).

[11]刘湘新,何湘蓉,程印.等，儿茶素在家免体内的药物动力学及生物利用度研究[J].中国兽药杂志,2003,37(2):13～15．

[12]张祚新,张雅斌,刘艳辉.等,氧氟沙星在鲤鱼体内的药代动力学[J].中国兽医学报,2004.24(4):383～385．

[13]李克,袁倚盛,戴晓莉.等,反相高效液相色谱法测定雷公藤提取物中雷公藤甲素含量[J].色谱,1998.16(4):356～357．

[14]Progresstowardtotalsolid-phasesynthesisofdepsipeptideantibiotickatanosinB.StawikowskaR,StawikowskiM,CudicP.AdvExpMedBiol.2009;611:385-6.

[15]赵黎力,生物等效性评价—美国仿制药品的管理新药与临床NewDrugsandClinicalRemedies.l993,l2(6):373-374.

[16]刘会臣.药物控/缓释制剂生物等效性评价[J].解放军药学学报，1999,15（6）.

[17]王绪明.高效液相色谱及其联用技术在药物分析中的应用新进展(一)[J].解放军药学学报,2004,(05).

[18]刘丽敏.高效液相色谱在中草药和抗生素类药物分析中的应用[D].中国优秀硕士学位论文全文数据库,2008,(09).

[19]关日晴.HPLC法测定盐酸洛美沙星滴眼液中的洛美沙星含量[J].分析测试学报,2004.23(1):l2～113．

[20]孙雨安,王国庆,崔泉中.司帕沙星含量的HPLC测定[J].分析测试学报，2000.19(1)：62～64．

[21]胡海燕．高效液相色谱法测定复方阿莫西林粉中阿莫西林和克拉维酸含量[J].中国兽药杂志,2002.36(9):30～31．

[22]董玉中,陈萍.高效液相色谱法测定芩连口服液中芩苷的含量[J].安徽医药，2005．9(1)：38～39．

[23]李俊玲,强莉,宫玲玲.等，高效液相色谱法测定饲料中氯羟吡啶[J].山东畜牧兽医,2004:33～34．

[24]张锁西,张福珍.高效液相色谱反相离子法测定注射用硫酸奈替米星含量[J].江西中医学院学报,2004.16(6):66．

[25]侯莉,熊辉,黄庆.高效液相色谱蒸发光散射检测法测定小诺霉素C2b组分的含量[J].江西中医学院学报,2004.16(6)：67～68．

[26]陈波,朱小兰,姚守拙.等,高效液相色谱质谱联用测定保健食品中的西地那非和西力士[J].中国食品卫生杂志，2004.16(2):121～124．

[27]张虹,顾青,潘远江.高效液相色谱一质谱联用方法分析植物愈伤组织中的喜树碱及其衍生物[J].分析化学,2004.32(12):1695．

[28]杨方,李耀平,钱疆.等,固相萃取梯度洗脱高效液相色谱法同时检测饲料中十三种磺胺类药物[J].分析测试技术与仪器,2004.10(4):234～237．