关于排石利胆片中绿原酸含量检测方法的研究

关于排石利胆片中绿原酸含量检测方法的研究

赵冰邓燕李岩许全利彭秀中杨义平

（华佗国药股份有限公司安徽亳州236800）

【中图分类号】R927.1【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2017）05-0155-02

排石利胆片是由金钱草、茵陈、柴胡(醋炙)、龙胆、赤芍、郁金、蒲黄、五灵脂、大黄、芒硝等10味药制成的中药复方制剂。具有舒肝理气，利胆排石的功效。用于胆囊炎，胆石症。方中茵陈苦泄下降，善清理肝胆之郁火，《神农本草经》云：“主黄疸”，现代药理学家发现茵陈有显著利胆作用，并能保护肝脏。与金钱草共起舒肝理气，利胆排石之效，为君药；为了更有效控制药品质量，对茵陈中药效成分绿原酸含量测定方法进行了研究，结果显示采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.4%磷酸（13:87）为流动相，流速为0.5ml/min；检测波长为328nm。经专属性、线性及线性范围、精密度、稳定性、重现性、回收率等试验，结果表明，该方法专属性强、灵敏度高、精密度高、回收率符合定量测定要求。

1.仪器与试剂

仪器：大连依利特高效液相色谱仪。

试剂：甲醇、磷酸均为分析纯，乙腈为色谱纯。

试药：绿原酸对照品，批号：753-200210，中国药品生物制品检定所提供；排石利胆片，批号：030907，030908，030909，050317，050318，050319，陕西合生医药研究发展公司提供。

2.色谱条件与系统适应性试验

色谱柱：Akasil-C184.6×250mm，5μm；流动相：乙腈-0.4%磷酸（13:87）。柱温：30℃。检测波长：328nm。流速：0.5ml/min。在以上条件下所测成分绿原酸与其它组分分离效果较好。

3.测定方法

对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品适量，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1ml含15g的溶液，即得（10℃以下保存）。

供试品溶液的制备：取本品20片，除去包衣，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率35kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，用微孔滤膜（0.45m）滤过，即得。

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

4.检测波长的选择

取绿原酸对照品溶液（0.0168mg/ml），以溶剂(50%甲醇)为空白，照紫外分光光度法试验，于200～400nm范围内扫描，结果表明，绿原酸在328nm处有最大吸收。因此，选择328nm作为本品含量的测定波长。吸光度扫描结果见附图1。

附图1

5.阴性对照干扰试验

按排石利胆片制备工艺制备缺茵陈阴性对照样品，依法测定，结果表明，在测定条件下，阴性对照无干扰。

6.线性关系考察

精密移取绿原酸对照品溶液（0.056mg/ml），1ml，2ml，3ml，5ml，10ml，分置于10ml容量瓶中，用50%甲醇定容至刻度，各精密吸取10l，进样测定，以进样浓度为x（mg/ml），峰面积为Y，进行线性回归，得回归方程为：y=71360x+53.253，r=0.9992，试验结果表明，在0.0056～0.0566mg/ml范围内，进样量与峰面积呈良好的线性关系。结果见表1及附图2。

结果表明，其含量为1.4911mg/g，RSD=0.89%。该方法重复性良好。

9.回收率试验

精密称取已知含量的同一批样品(批号：030909，含量1.4911mg/g)6份，分别精密加入绿原酸对照品溶液（0.36mg/ml）1ml，按供试品制备方法制备，进样测定，计算回收率，结果见表4。

10.结论

通过对本品的各项质量指标的检测，表明正文的各项方法基本可以控制本品的质量，本品的质量标准基本可行。