HPLC法测定比阿培南相关物质

HPLC法测定比阿培南相关物质

叶晶晶张伟军韩平谢万喜章玉华

叶晶晶张伟军韩平谢万喜章玉华

（浙江海翔川南药业有限公司317016）

【摘要】目的通过对比阿培南进行质量研究，建立一种专属性好、灵敏度高、快速、准确的测定比阿培南相关物质的HPLC分析方法。结果该方法系统精密度RSD为0.2%，各杂质与主峰间的最小分离度为2.1，实现基线分离；LOD为1.313×10-5mg/mL（相当于供试品溶液浓度的0.0007%）；LOQ为3.195×10-5mg/mL（相当于供试品溶液浓度的0.002%）；线性良好，相关系数γ=0.99999；准确度/回收率为92.9%～100.6%。结论本方法对于检测比阿培南相关物质专属性好，灵敏度高，准确度和精密度都较好，结果可靠。

【关键词】比阿培南高效液相色谱法相关物质

【中图分类号】R92【文献标识码】B【文章编号】2095-1752（2014）31-0326-02

比阿培南（Biapenem）是一种新型胃肠外给药的碳青霉烯类抗菌药[1]，抗菌谱广，可抑制细菌细胞壁的合成。临床上广泛应用于对比阿培南敏感的革兰氏阳性和阴性菌、需氧菌等引起的急慢性感染。此外，比阿培南在治疗整形手术感染、妇科感染以及耳鼻喉感染时均具有很好的疗效[2]。比阿培南是一个结构复杂的杂环类化合物。化学名称为6-[[(4R,5S,6S)-2-羧基-6-((1R)-1-羟乙基)-4-甲基-7-氧代-1-氮杂双环[3.2.0]庚-2-烯-3-基]硫]-6,7-双氢-5H-哌唑酮[1,2-a][1,2,4]三氮杂-4-内盐，分子式为C15H18N4O4S，分子量为350.40。类盐白色或类白色粉末，溶于水，不溶于一般有机溶剂。结构见图1。本文建立高效液相色谱分析方法有效测定比阿培南的相关物质，并对建立的方法进行验证。

图1：比阿培南的化学结构式

1.方法

1.1色谱条件

仪器：高效液相色谱仪（岛津公司）；色谱柱：Lichrospher100RP18e5μm,250×4.6mm；流动相：称取7.8g磷酸二氢钠和0.4g磷酸氢二钠溶于1000mL水中，再加入60mL甲醇，摇匀；流速：约0.6mL/min(调节流速使比阿培南的保留时间6.5min)；检测波长：225nm；进样量：20μL；运行时间：40min。

1.2溶液配制

供试品溶液：称取本品50mg置于25mL容量瓶中用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。

对照溶液：移取1.0mL供试品溶液于100mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。

2.结果与讨论

2.1系统精密度

配制对照溶液，重复进样6针，峰面积的RSD为0.2%，表明该方法精密度良好。

2.2专属性

供试品溶液中各杂质与主峰间的最小分离度为2.1（仪器计算），见图2，表明该方法的专属性好。

图2：比阿培南检测图谱

2.3准确度/回收率

配制浓度分别为0.0032mg/mL、0.0046mg/mL、0.0061mg/mL的供试品溶液各一份，重复平行进样3次，回收率为92.9%～100.6，准确度较好。

2.4线性

配制0.03ug/mL，0.82ug/mL、1.62ug/mL、3.19ug/mL、4.03ug/mL、4.76ug/mL、6.09ug/mL浓度的比阿培南溶液（相当于样品量的0.002%～0.3%），以X轴为浓度，Y轴为峰面积响应值做线性回归曲线，为f（x）=17705106x-1063.78，相关系数是γ=0.99999，该方法线性良好。

2.5定量限和检出限

溶液浓度为1.313×10-5mg/mL（相当于供试品溶液浓度的0.0007%），信噪比为4；溶液浓度为3.195×10-5mg/mL（相当于供试品溶液浓度的0.002%），信噪比为11。

2.6溶液稳定性

样品溶液常温放置1h考察稳定性，结果溶液并不是很稳定，需新鲜配制进样。

3.结论

本方法成功将比阿培南中的杂质分离，并对专属性、定量限、检测限、线性、精密度、稳定性进行论证，结果符合相关法规要求，表明本方法对比阿培南相关物质定量分析专属性好，灵敏度高，准确度和精密度都较好，结果可靠；同时本方法对以后杂环类化合物分析具有一定的参考价值。

参考文献

[1]PerryCM,IbbotsonT.Biapenem[J].Drugs,2002,62(15):2221-2234.

[2]IIaraK,BabaS,MatsumotoF,etal.Clinicalevaluationofbiapeneminvariousinfectionsdiseases[J].JpnJAntibiot,1999,52(11):629-660.