迈瑞BC－６８００血细胞分析仪复检规则的建立和评价

迈瑞BC－６８００血细胞分析仪复检规则的建立和评价

王文工宋涛马杰

王文工宋涛马杰湖北省新华医院湖北武汉４３００００

【摘要】目的建立迈瑞BC－６８００血细胞分析仪的复检规则.方法依据国际血液学复检组推荐的血细胞分析仪复检规则结合湖北省临床实验室血液学复检规则,应用迈瑞BC－６８００血细胞分析仪对来我院就诊的门诊和住院患者共１２００份,其中包括门诊患者３００例,住院患者９００例.进行检测,并进行血涂片显微镜镜检.结果对１０００份样品的检测结果进行分析,真阳性率:２１．７％,真阴性率:４６．６％,假阳性率:２６．２％,假阴性率:５．５％.假阴性率超过预期５％,复检率为４７．９％.根据假阴性和假阳性的构成,适当调整规则后,根据此规则统计实验数据,真阳性率:１５．７％,真阴性率:６４．６％,假阳性率:１６．２％,假阴性率:３．５％.假阴性率小于５％,复检率为３１．９％,符合预期.２００份标本的验证试验结果显示假阴性率为３．４％,假阳性率为１６．８％.没有漏检恶性血液病标本.结论我们研究制定出适合我院的迈瑞BC－６８００血细胞分析仪的复检规则.但要保证规则在日常工作中的严格执行,还需要严格的管理和检验人员的责任心.【关键词】血细胞分析仪复检规则【中图分类号】R４６６．１１【文献标识码】B【文章编号】１００８－６３１５(２０１５)１２－１３６０－０２

随着各种类型的血细胞分析仪的大量使用于临床检验科,全血细胞分析的精密度和检验效率大幅提高.但是,这类仪器在鉴别血细胞的形态和结构等方面还不够完善,目前仅可作为全血细胞分析的一种过筛手段.在遇见疑问时,还必须在显微镜下复查血片,经过确认、修正或补充后才能发出报告[１].随着现代医疗事业和医疗改革的发展,各家医院检验科的检测标本快速增加,但TAT要求越来越高,现在卫生部三甲医院实施细则要求临检常规项目要在３０分钟内发出结果.因此,必须建立适合于本实验室血细胞分析仪的复检规则,在不影响实验室检测质量的前提下,尽量提高检测效率,保证我们的结果在规定的时间内发出.２００５年国际血液学复检专家组提出了４１条自动血细胞分析仪和分类复检规则.由于中国人群的血细胞分析参考范围不同于西方人群,有必要建立适用于我国人群的血细胞分析仪复检规则.我国复检专家组已经发表了Sysmex和Beckman－Coulter系统血细胞分析仪的附件规则[２－３].我院使用迈瑞BC－６８００血细胞分析仪,我们参考国际血细胞分析仪复检规则和湖北省临床实验室血液学复检规则,就建立迈瑞BC－６８００血细胞分析仪复检规则开展研究.材料与方法

１材料

１．１标本来源:２０１３年７月至２０１３年８月来我院就诊的门诊和住院患者共１２００份,其中包括门诊患者３００例,住院患者９００例.１０００例样本用于建立迈瑞BC－６８００血细胞分析仪的附件规则,２００例样本用于验证试验.

１．２仪器和试剂:迈瑞BC－６８００全自动血细胞分析仪,均使用配套的试剂和质控物.OLYMPUSCX２１双目生物显微镜.２方法２．１仪器的校准和质控:仪器按规定时间用配套校准物进行校准,每天均使用配套高、中、低值质控物进行检测,结果均在控.仪器在安装时已做过性能验证,且性能评价符合厂家的标准.２．２人员:挑选本院检验科在形态学检查上有经验的工作人员,并统一镜检阳性标准.２．３血涂片检查:每份样品同时涂两张血片,瑞氏染色并编号,由两名实验人员双盲法镜检,各分类计数１００个白细胞,取平均值.同时观察血细胞形态和分布情况.２．４血涂片阳性的评定标准为至少包括下列条件之一:(１)细胞形态学改变:包括①RBC明显大小不等,形态、染色异常RBC＞０．３;②巨大PLT＞０．１５;③见到血小板聚集;④存在Dohle小体的细胞＞０．１;⑤中毒颗粒中性粒细胞＞０．１;⑥空泡变性中性粒细胞＞０．１;(２)细胞数量/比例改变:包括①原始细胞≥０．０１;②早幼/中幼粒细胞≥０．０１;③晚幼粒细胞＞０．０２;④杆状核粒细胞＞０．０５;⑤异常淋巴细胞＞０．０５;⑥嗜酸粒细胞细胞＞０．０５;⑦嗜碱粒细胞＞０．０１;⑧有核红细胞(NRBC)＞０．０１;⑨浆细胞＞０．０１;⑩单核细胞＞８％.２．５迈瑞BC－６８００血细胞分析仪复检规则的建立:根据血涂片复审４１条国际规则和此仪器的功能及形态学报警,制定初选标准.希望通过此标准使复检率＜４０％、假阴性率＜５％.根据此规则和我国血液学专家制定出的血涂片镜检阳性标准对迈瑞BC－６８００血细胞分析仪检测的１０００份样本结果进行分析,根据分析结果并结合我院临床工作的实际情况对此规则进行调整,建立适合我院迈瑞BC－６８００血细胞分析仪的复检规则,并用２００例样本进行验证试验,验证制定的复检规则的合理性和有效性.２．６结果判读:以人工镜检为金标准,真阳性为仪器及镜检结果均为阳性;假阳性为仪器结果为阳性,镜检结果为阴性;真阴性为仪器及镜检结果均为阴性;假阴性为仪器结果为阴性,镜检结果为阳性;复检率＝真阳性率＋假阳性率.３结果根据国际血液学复检专家组推荐的复检规则和我国血液学复检专家组制定的阳性镜检判断标准,对１０００份样品的检测结果进行分析,真阳性率:２１．７％,真阴性率:４６．６％,假阳性率:２６．２％,假阴性率:５．５％.假阴性率超过预期５％,复检率为４７．９％.根据假阴性标本的构成,适当修改了涂片镜检阳性标准,将中性杆状核粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和单核细胞这四项参数的百分比提高了.另外根据假阳性标本的构成,适当降低了复检规则中白细胞和血小板首次结果的下线,将白细胞计数由＜４．０?１０９/L改为２．５?１０９/L,血小板计数由＜１００?１０９/L改为７０?１０９/L,MCV的下限由７５fl改为７０fl;上限由１０５fl改为１１０fl.调整后,根据此规则统计实验数据,真阳性率:１５．７％,真阴性率:６４．６％,假阳性率:１６．２％,假阴性率:３．５％.假阴性率小于５％,复检率为３１．９％,符合预期.２００份标本的验证试验结果显示假阴性率为３．４％,假阳性率为１６．８％.没有漏检恶性血液病标本.最终确定的迈瑞BC－６８００血细胞分析仪复检规则见表

１.４讨论随着血细胞分析仪的广泛使用,复检越来越受到检验工作者的重视.它不仅能弥补仪器在血细胞形态识别能力上的不足,而且能评估和验证仪器分析结果的准确性.它通常分为两步:首先是一般性浏览涂片,观察和估计白细胞、血小板的数量是否大致相符;红细胞的形态、染色有无异常;有无寄生虫;血小板、白细胞形态有无异常;有无幼稚细胞等等.上述浏览如未发现异常,或未见与仪器的报告不符,即可按仪器的结果报告.如发现任何细胞有形态(含染色)异常,应加以描述并报告.如发现白细胞分类两者不符,则进行下一步人工分类;如估计的血小板或白细胞数与仪器明显不符,必要时还应用手工法进行计数、核对或校正[４].复检规则的制定是保证血细胞分析检验结果准确性工作中很重要的一个环节.本研究结果显示,根据国际血液分析仪复检规则对BC－６８００血液分析检测的１２００份样本分析显示,假阴性率:５．５％,假阴性率超过预期５％;复检率为４７．９％,复检率较高,不能达到设置复检规则的目的.我们根据假阴性中嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞、杆状核粒细胞所占的比例较高,修改了涂片镜检阳性标准,提高了这四项参数的百分比.根据假阳性标本的构成中白细胞、血小板数量异常,MCV异常导致的比例较高,其中白细胞数量异常导致的复检占总复检数的３１％,血小板数量异常和血小板聚集报警导致的复检率也较高,经复检观察,白细胞计数数量与镜下相符.血小板聚集报警假阳性较多,太敏感.数量报警只有极少数不相符的情况,也是由于血小板出现聚集的情况.当血小板数量太低时,仅依靠浏览血片无法精确评估血小板的数量,建议用光学通道对血小板重新检测.因此依据我国人群白细胞和血小板的参考范围下线低于西方国家[５],降低复检规则中这几项的参数的下线.降低了假阳性率和复检率,提高了工作效率.通过２００例标本的验证,没有漏检一例恶性血液病样本.制定复检规则一定要结合本院使用的仪器和标本来源.不同的仪器或面对不同的标本来源,对于门诊患者,对于这些样本,筛出可疑标本更重要,复检率可以适当提高.对于住院来源的标本,可能已反复检查多次,复检规则的制定要考虑和上次结果的比较情况.另外随着实验室信息系统(LIS)的广泛应用,它在方便我的工作的同时,也带来了一些问题.由于有一些LIS系统没有接受血细胞分析仪的图形信息和仪器报警信息,我们有些工作人员在分析检验结果时只注意了数据的分析而忽视了仪器的形态学报警,导致复检率人为降低,质量下降了.因此我们在审核结果时一定要看仪器自带的接受软件,注意仪器的形态学报警,这一点很重要.EDTA抗凝血不同于皮肤穿刺末梢血,在细胞形态上有一些不同.由于制片和染色的原因导致细胞形态的改变我们要和病理状态进行区分,当抗凝血片中异形淋巴细胞大于３０％时建议取末梢血涂片复检.综上所述,我们依据国际血液学复检组推荐的血细胞分析仪复检规则结合湖北省临床实验室血液学复检规则,研究制定出适合我院的迈瑞BC－６８００血细胞分析仪的复检规则.但要保证规则在日常工作中的严格执行,还需要严格的管理和检验人员的责任心.另外随着全自动推片机和血细胞工作站的逐渐应用,我们可以将复检规则储存在软件中,当符合复检规则时,可以自动推片染色,然后再人工镜检.这样即可以保证规则的实施又提高了工作效率.

参考文献[１]朱晓辉,何菊英,朱忠勇．应用血液分析仪后复查血片的内容方法及程序．中华检验医学杂志,２００３,２:７８５．[２]XE－２１００血细胞分析复检标准制定协作组．SysmexXE－２１００自动血细胞分析和白细胞分类的复检规则探讨．中华检验医学杂志,２００８,３１:７５２－７５７．[３]王厚芳,孙沛,于贵杰,等．国际血细胞复检规则在贝克曼－库尔特系列血细胞分析仪上的应用及改进方案．中华检验医学杂志,２００８,３１:７５８－７６２．[４]朱忠勇．怎样看待血液及尿液分析仪的过筛作用．临床检验杂志,２００３,[２１:３２２．５]丛玉隆,金大鸣．中国人群成人静脉血细胞分析参考范围调查[J]．中国医学杂志,２００３,８３(１０):１２０１－１２０５．