养阴活血降糖方对高热量饮食加STZ致糖尿病大鼠血清皮质醇的影响

养阴活血降糖方对高热量饮食加STZ致糖尿病大鼠血清皮质醇的影响

刘玉梅

天津市南开区中医医院天津300101

摘要：[目的]：研究中药自拟养阴活血降糖方对高热量饮食加STZ致糖尿病大鼠血清皮质醇的影响；[方法]：通过高热量饮食加STZ造成糖尿病模型，通过放免分析法测定血清中的皮质醇含量的变化，评价养阴活血降糖方对其影响；[结果]：模型组大鼠血清皮质醇含量显著升高，与对照组比有显著性差异（P<0.05），血脂康及二甲双胍组也不同程度的降低血清皮质醇的含量，但作用弱于养阴活血降糖方高剂量组，养阴活血降糖方高剂量组及中低剂量组均可以降低糖尿病大鼠血清皮质醇的含量，并且与模型组有显著性差异（P<0.05），与对照组无显著性差异。[结论]：养阴活血降糖方可以降低糖尿病大鼠血清皮质醇含量，并且养阴活血降糖方对血清皮质醇的影响有剂量依赖性。

关键词：糖尿病；养阴活血降糖方；皮质醇；大鼠

养阴活血降糖方是临床经验方，多年来在临床中应用于治疗各型糖尿病，取得了有效成果，但是关于中药作用机理的研究目前还很少，中药作用的多靶点既是优势也是劣势，为了更加明确养阴活血降糖方作用机理，我们复制了高热量饮食致糖尿病的模型，意于探讨养阴活血降糖方对糖尿病患者内分泌系统的影响，进而更加明确养阴活血降糖方治疗糖尿病的机理。

1、材料和方法

1.1实验药物：

养阴活血降糖方（桃仁10g红花g川芎12g地黄30g白芍15g当归15g炙黄芪30g党参20g枸杞15g山茱萸15g等20余味中药）由南开中医院制剂室制备，实验时用蒸馏水配制成所需浓度的溶液。

盐酸二甲双胍片：由天津中新药业有限集团股份公司生产，批号P0906042，实验时研成细粉用蒸馏水配制成所需浓度的溶液。

血脂康胶囊：由北京北大维信生物科技有限公司生产，批号20060611，实验时用蒸馏水配制成所需浓度的溶液。

链脲佐菌素（STZ）美国sigma公司

葡萄糖测定试剂盒批号060651北京中生生物工程高技术公司

1.2实验动物：

雄性Wister大鼠100只，体重180－220g，由北京维通利华动物实验中心提供，合格证编号：SCXK（京）2002－2003，饲养于18℃－20℃清洁级动物实验室内。

1.3实验主要仪器

VITALABMTCRO半自动生化仪荷兰威图公司；OneTouchUltra血糖仪美国强生公司；电子恒温水浴箱北京长风仪器仪表公司；MDF-382E超低温保存箱日本SANYO公司；DX51TR荧光显微镜日本OLYMPUS公司；

1.4糖尿病大鼠模型复制

选择雄性Wistar大鼠102只，体重180±10g，适应性喂养一周后，按体重随机区组法分为正常对照组和模型组，其中正常对照组12只，模型组90只。正常对照组每天喂饲普通饲料。模型组参照杨架林[1]报道，每天喂饲10%猪油，1.5%胆固醇，0.5%牛胆酸钠，88%基础饲料配成的高热量饲料，连续8周。8周后，禁食不禁水24h后，30mg·kg-1剂量一次性腹腔注射2%STZ柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液（临用时取适量STZ0.1mmol·L-1柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液冰浴中配制，ph=4.2），正常对照组腹腔注射同剂量柠檬酸－柠檬酸钠缓冲液，72小时后检测空腹血糖，血清TC，TG，以空腹血糖>11mmol·L-1，血清TC、TG含量升高，与正常对照组存在显著差异的大鼠为造模成功，纳入实验。

1.5分组及给药方法

保留正常对照组12只，选择造模成功的模型组大鼠72只，根据测得的空腹血糖值，采用随机区组法分为模型组对照组、阳性药二甲双胍对照组、阳性药血脂康对照组、养阴活血降糖方高剂量组、养阴活血降糖方中剂量组、养阴活血降糖方低剂量组6组，每组12只。正常及模型对照组：灌服同体积蒸馏水；阳性药二甲双胍对照组：灌服二甲双胍，每日用药剂量为250mg·kg-1；阳性药血脂康对照组：灌胃血脂康溶液，每日用药剂量为250mg·kg-1；养阴活血降糖方高中低剂量组：每日用药剂量为6g生药·kg-1，3g生药·kg-1及1.5g生药·kg-1。各组每日灌胃1次，连续30天。用药治疗期间各组大鼠均饲以普通饲料。

1.6标本制作及皮质醇的测定

用药治疗第30天，禁食不禁水8h，末次灌胃给药lh后，3.5%水合氯醛腹腔注射麻醉。腹主动脉取血，离心，分离血清，采用放免分析法测定血清中皮质醇的含量。

1.7统计方法

实验数据以均数±标准差（±S）表示，采用SPSS10.0统计软件，单因素方差分析进行组间比较。

2、结果

*与模型组比较有显著性差异（P<0.05）△与空白组比较有显著性差异（P<0.05）

从表一看出，模型组大鼠血清皮质醇含量显著升高，与对照组相比有显著性差异（P<0.05），血脂康及二甲双胍组也不同程度的降低血清皮质醇的含量，但作用弱于养阴活血降糖方高剂量组，养阴活血降糖方高剂量组养阴活血降糖方高剂量组及中低剂量组均可以降低糖尿病大鼠血清皮质醇的含量，并且与模型组有显著性差异（P<0.05），与对照组无显著性差异。

3、讨论

糖尿病是一组由于胰岛素分泌缺陷及其生物学作用障碍引起的以高血糖为特征的内分泌代谢性疾病。目前关于其发病机制的研究主要集中在胰岛功能的限制上，糖尿病的治疗也主要体现在激活胰岛的功能，近年来对神经内分泌免疫网络的深入研究使我们越来越认识到糖尿病的发生及发展与人整体有密切的关系，并且随着现代循证医学的发展，认识到糖尿病不是一个单纯的糖代谢性疾病，糖尿病的发生发展过程中，往往伴随着蛋白质，脂肪等的代谢同时失调，导致人体代谢失常，而人体的三大营养物质的代谢都是受神经－内分泌－免疫这个总体水平上调节的，近年来有学者提出糖尿病患者中可能存在HPA轴功能改变［1－2］。

糖代谢与神经内分泌免疫调节网络由于血糖在正常状态下维持稳定，即糖的生成与糖的利用维持相对稳定，这些生化过程又受到各种酶的调节，在高等动物，酶活性调节主要受激素的控制。胰岛素是体内唯一能降低血糖的激素。是由胰岛的B细胞合成的蛋白质类激素，胰岛素的分泌受多种因素的影响。糖皮质激素是肾上腺皮质在下丘脑和垂体调节下分泌的一种物质，有学者发现，糖皮质激素分泌减少者，如垂体或肾上腺皮质功能减退，胰岛素的敏感性升高［3-4］.除了胰岛素以外，体内还存在一些升高血糖的激素，即胰岛素反调素，主要有胰升糖素、生长激素、肾上腺皮质激素、儿茶酚胺类激素、甲状腺激素等。目前研究较多的与神经内分泌有关的激素主要集中在肾上腺皮质激素及其调节激素上，血糖浓度对激素的分泌起重要的调节作用，明显的血糖升高或降低可刺激或抑制其分泌。糖尿病胰岛素抵抗产生机制可能包括垂体－肾上腺轴CRF、ACTH及皮质醇引起IR，胰岛素与皮质醇是一方面，睾酮与生长激素是另一方面，这种平衡的失调引起神经内分泌失常而导致IR[5]。2型糖尿病患者早期无明显的垂体和肾上腺疾患，呈现以皮质醇分泌亢进为主要表现的慢性垂体一肾上腺轴功能紊乱现象[6]，垂体－肾上腺轴活性增强—血浆皮质醇、促肾上腺皮质素（ACTH）水平升高，国外研究表明，在糖尿病患者下丘脑中发现轴突的缺失和脱髓鞘现象。来自外周神经元的传入冲动，可能参与上行性儿茶酚胺通路的激活，进一步激活HPA轴，使血皮质醇升高。过高的血清皮质醇可通过促进脂解，促进糖原异生，减少细胞对葡萄糖的摄取而消弱胰岛素的作用，造成或加重组织胰岛素抵抗，使糖代谢紊乱难以控制；另一方面，糖尿病患者长期血糖控制不佳及弥漫性微血管病变可能造成参与调节HPA轴的海马区结构与功能损害，海马的损害可使HPA轴对多种应激原的敏感性增强，从而导致HPA功能亢进，血皮质醇水平增高，同时[7]皮质醇还可直接作用于胰岛β细胞，使胰岛分泌功能下降；也可间接通过刺激胰高血糖素的分泌，从而造成和加重血糖的升高，如此恶性循环，使糖尿病患者病情加重，难以控制。因此，DM2患者高皮质醇的分泌与体内高血糖的发生，两者存在互为因果的关系。

本研究结果显示，养阴活血降糖方可以明显降低糖尿病患者血清皮质醇的含量，对于改善患者神经内分泌网络的紊乱起到一定的作用，通过调节糖尿病患者的激素分泌的紊乱达到改善症状，缓解痛苦的作用，提示中药养阴活血降糖方可能在调整神经内分泌网络紊乱方面起到一定的作用，进而改善患者的高血糖状态，对于预防各种并发症有重要的意义，在现代医学治疗糖尿病的过程中，也遇到了许多难以解决的问题，其中对于如何更加有效的控制并发症，提高患者生活质量一直是具有挑战性的医学难题，中医以整体观念和辩证论治为基础，中药治疗糖尿病的基本原则也是注重从整体上加以调节，最终达到阴阳平衡，这与现代医学从神经内分泌网络上的调节不谋而合，糖尿病属于中医消渴病，根据疾病表现部位的侧重，分为上中下三消，相应的采用不同的方剂来治疗，在多年的临床实践中显示了巨大的优势，本研究在中药作用机理方面的探讨，无疑为中医中药在今后的防病治病中提供了更加有利的依据，也为患者带来了很大的利益。

参考文献：

[1]RebeccaMR，MarkWJ，JavierL，etal.Morningcortisollevelsandcognitiveabilitiesinpeoplewithtype2diabetes［J］．DiabetesCare，2010，33（4）：714－720.

[2]ChanO，InouyeK，AkiravEM，etal.Hyperactivationofthehypothalamo－pituitary－adrenal（HPA）indiabetesisnotmediatedbyglucoseperse［J］．Diabetes，2002，51：49

[3]付慧稳，权学莲，王金燕，等.糖皮质激素继发糖尿病血糖变化特点及综合防治的临床研究［J］．河北医药，2009，31（7）：811.

[4]NomuraS，ShouzuA，OmotoS，etal.GeneticanalysisofHLA，NAandHPAtypingintype2diabetesandASO［J］．IntJImmunogenet，2006，33（2）：117－122.

[5]张汝学等，糖尿病发病机制与神经内分泌免疫调节网络中医药学刊2003，21（6）：916-918

[6]邱宁岩等2型糖尿病患者垂体-肾上腺轴的变化与胰岛素抵抗放射免疫学杂志2006，19（6）：517-519

[7]李滢刘伟*阮书平DM2患者皮质醇水平与糖代谢和胰岛素抵抗的关系放射免疫学杂志2013，26（5）680-681

作者简介：刘玉梅（1980.8），女，汉族，河北保定阜平，天津南开区中医医院，主治医师，硕士，主要研究方向为中医内科学。