细胞块石蜡包埋及免疫组化染色在胸腹水细胞病理学诊断中的价值分析

细胞块石蜡包埋及免疫组化染色在胸腹水细胞病理学诊断中的价值分析

周小华

武警湖南总队医院病理科湖南长沙410006

摘要：目的：分析细胞块石蜡包埋及免疫组化染色在胸腹水细胞病理学诊断中的应用价值。方法：收集46例胸腹水患者的标本进行离心涂片、细胞块切片及HE染色，并选用CK（pan）、CEA、P53、Vimentin、PCNA和Cal等抗体进行免疫组化染色，观察胸腹水细胞块石蜡包埋切片、细胞涂片及免疫组化染色情况。结果：本组诊断鳞癌3例（6.5%），腺癌23例（50.0%），增生的间皮细胞20例（43.5%）；细胞块石蜡包埋切片染色鲜艳，背景清晰，细胞多而集中，有一定组织结构，免疫组化染色的阳性定位比较准确。结论：在胸腹水细胞病理学诊断中，细胞块石蜡包埋并结合免疫组化染色具有较高的应用价值，有助于对肿瘤疾病的鉴别诊断及细胞来源的确定。

关键词：胸腹水；免疫组化；石蜡包埋

目前，各级医院的病理科重点开展脱落细胞病检工作，但胸腹水细胞学检查的制片及诊断依然存在较多问题。临床上，一般对有胸腹腔积液的病人通过直接离心涂片法对恶性肿瘤细胞的存在与否进行证实[1]。但实际操作中，常规细胞学诊断实施的直接离心涂片法存在较多缺点，如细胞重叠，结构模糊，细胞量少，阳性检出率不高等；尤其是利用直接离心涂片法很难对不典型形态的间皮细胞、转移癌细胞进行鉴别和诊断。实践证明[2]，采取细胞块石蜡包埋切片、免疫组化染色相结合的方法进行诊断，可以提高胸腹水肿瘤细胞诊断的准确性。因此，细胞块石蜡包埋及免疫组化染色对细胞来源的确定及肿瘤的诊断和鉴别具有重要意义。本次研究以我院2013年10月至2015年10月接受治疗的46例胸腹水患者为对象，利用细胞块包埋切片法及涂片法对其胸腹水样本进行检测。现报告如下。

1材料与方法

1.1材料

本组临床送检的共46份，其中男性18例，女性28例；年龄33-80岁，平均年龄（57.8±6.2）岁。胸水34例，腹水12例。免疫组化试剂、DAB显色剂等均由广州健仑生物科技有限公司提供，并按照说明书进行实验操作。

1.2方法

抽取患者的胸腹水50-300ml，离心处理10min，2000r/min；离心后弃去上清液，取沉淀物进行细胞涂片；加入消化液体稀释沉淀物至30ml，震荡2min后，离心处理10min，2000r/min；再次离心后弃去上清液，加入10%福尔马林液体50ml，震荡10min，进行离心处理。离心后静置2-3h，除去福尔马林液体，沉淀物用滤纸包裹进行脱水处理；石蜡包埋、切片、染色、封固，选用CK（pan）、CEA、P53、Vimentin、PCNA和Cal等抗体进行免疫组化染色；腹水加做CA125，胸水加做TTF-1，DAB显色，试剂盒提供的对照作为阴阳性对照。

2结果

胸腹水细胞块石蜡包埋切片及细胞涂片结果显示：⑴胸腹水涂片：诊断鳞癌3例，占比6.5%；腺癌18例，占比39.1%；增生的间皮细胞19例，占比41.3%；可疑癌6例，占比13.0%。⑵细胞块切片：诊断鳞癌3例，占比6.5%；腺癌23例，占比50.0%；增生的间皮细胞20例，占比43.5%；无可疑癌。此次切片制作方法与常规涂片有所不同，采用苏木精-伊红染色（HE染色），切片色彩鲜艳，背景清晰，能够获取更多的细胞，且组织结构稳定。不同抗体表达的阳性部位与组织学相同，免疫组化染色显示细胞浆内的阳性颗粒呈棕黄色。本组标本的免疫组化染色结果见表1。

3讨论

病理科进行胸腹水细胞学检查，是诊断恶性肿瘤细胞存在与否的重要方法。但受多种因素的影响，部分胸腹水的临床鉴别及鉴别诊断存在诸多问题[3]。例如，炎性胸腹水增生、退变的间皮细胞与一些恶性细胞的形态比较相似，两者在诊断过程中容易引起混淆，这一特点在腺癌细胞的体现上更甚。直接采取细胞涂片对恶性胸腹水进行临床诊断，存在涂片厚，红细胞含量大，细胞结构重叠，背景模糊等缺点，其敏感度仅为50-78%[4]。利用细胞块石蜡包埋切片法对胸腹水标本进行收集，可以获取更多的核细胞，且结构清晰，若结合常规涂片法进行检测，可促使细胞学阳性检出率显著升高。与此同时，免疫组化染色可对细胞块连续进行切片，通过多种组合抗体的观察，可以对组织来源进行判别，也能够满足临床诊断需求。本次诊断鳞癌3例，腺癌23例，增生的间皮细胞20例，发现Vimentin、Cal阳性主要提示为增生的间皮细胞，TTF-1阳性主要提示为原发性肺腺癌细胞来源。需要注意的是[5]，抗体组织的特异性不是绝对的，多种组合抗体的免疫组化染色有助于解决部分抗体表达意义不明的问题。对于一些晚期肿瘤患者由于难以直接获取病理组织，细胞块石蜡包埋可以弥补其不足，并联合免疫组化可指导治疗[6]。总之，胸腹水细胞病理学诊断中细胞块石蜡包埋并结合免疫组化染色的价值较高，值得进一步推广和运用。

参考文献：

[1]陈建华，陈中，丁博.血浆凝固法胸腹水细胞块技术的临床应用[J].实验与检验医学，2012，30（4）：412-413.

[2]黄勇进，陈争春，张桂琴等.236例胸腹水液基细胞学检测及免疫细胞化学分析[J].检验医学与临床，2014，12（z1）：332-334.

[3]左定祥，梁根秀，杨小燕等.胸腹水沉淀物琼脂包裹-石蜡包埋切片与液基薄层涂片检查结果对比分析[J].宁夏医科大学学报，2012，34（4）：391-393.

[4]王守梅，杨秋红，魏静静等.比较胸腹水液基细胞学剩余标本制作细胞块的3种方法[J].第二军医大学学报，2013，34（2）：160-163.

[5]彭先高，罗孟疌.免疫细胞化学在浆膜腔积液细胞病理学诊断中的应用[J].按摩与康复医学（下旬刊），2010，01（5）：2-3.

[6]李潇，田保玲，刘娟娟等.胸腹水细胞沉渣石蜡包埋免疫组化检测法指导晚期卵巢癌新辅助化疗研究[J].中国实用妇科与产科杂志，2016，32（9）：890-895.