肠道病毒EV71型研究概述

肠道病毒EV71型研究概述

任启静1郭卫东2（通讯作者）海岩2张晋铭1

任启静1郭卫东2（通讯作者）海岩2张晋铭1

【摘要】肠道病毒71型感染典型症状为手、足、口病或疱疹性咽峡炎，少数重症病例还会引起脑炎、心肌炎、肺水肿、弛缓性麻痹等，已为社会经济发展带来一定阻碍。本文将对近年来有关EV71有关研究内容做一综合描述。

【关键词】手足口病；肠道病毒71；流行病学；预防

OverviewofresearchonEV71.RENQi-jing1,GUOWei-dong2*,HAIYan2,ZhANGJin-ming1.InnerMongoliaUniversty,Hohhot,InnerMongolia010059;2.InnerMongoliaCenterforDiseaseControlandPrevention,Hohhot,InnerMongolia010031)

【Abstract】Enterovirus71infectionsymptomstypicalforhand,footandmouthdiseaseorherpangina,afewseverecasescanalsocauseencephalitis,myocarditis,pulmonaryedema,flaccidparalysisandotherhasforthesocialandeconomicdevelopmentbringssomeobstacles.ThisarticlewillmakeacomprehensivedescriptionabouttheresearchcontentofEV71inrecentyears.

【KeyWords】Handfootandmouthdisease(HFMD);Enterovirus71;Epidemiolgy;Prevention

肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)属于小RNA病毒科肠道病毒A组，为二十面体立体对称球形结构，无包膜和突起。EV71感染典型症状为手、足、口病(hand,foot,andmouthdisease,HFMD)或疱疹性咽峡炎(herpangina)，人体的呼吸系统、中枢神经系统、心血管系统等亦可被EV71侵犯，并引起相应的肺水肿、脑炎、弛缓性麻痹、心肌炎等疾病[1]，已为社会经济发展带来一定阻碍。关于EV71研究内容已有众多报道，包括流行病学、分子流行病学、发病机制以及实验室诊断等，本文将对近年来有关EV71研究内容做一综合描述。

流行病学与分子流行病学

1．EV71流行概况

EV71型呈全球分布，无明显地域性，流行季节为夏秋季[2]，但全年均可发生感染。传染源主要是感染者，但大多数EV71型感染为隐性感染，因此为疾病的预防和控制带来困难。粪-口途径是传播EV71的主要方式，或是吸入感染者咳嗽、打喷嚏产生的飞沫等形式患病。人群对EV71普遍易感，但以婴幼儿和低年龄儿童感染为主[3]，感染后产生的免疫反应可获得特定型别的机体保护。

上世纪70年代在美国首次发现EV71，而后在欧洲各国相继出现EV71型HFMD暴发，我国在1987年首次分离出EV71，1998年台湾手足口病暴发，近2/3是EV71型HFMD。张昕[4]等研究表明，2008年HFMD出现全国性暴发以来，始终处于高流行状态，主要流行株为EV71和CVA16，总体呈波动上升趋势，但2015年有所回落，疫情的波动呈现“大小年”特点，预计2016年疫情将呈上升趋势(尚未得到证实)。

2．分子流行病学

BessaudM[5]等研究将EV71分为6个基因型：A-F，但Yip[6]等对EV71的VP4和VP1测序形成目前国际通用的基因型分类：A、B(B1~B5)和C(C1~C5)三型。A型仅有BrCr一个亚型别,早在1970年分离于美国加利福尼亚；在发现A型2年后，B型在美国亦被发现；最早的C型在1978年分离于日本[6～9]。据我国学者研究，2008年以前EV71的主要型别是C4b亚型，2008年后逐渐以C4a亚型为主，该亚型与重症和死亡病例高度相关[10]。

实验室诊断

实验室诊断在疾病确诊时具有极为重要的意义，EV71检测亦是如此。随着研究技术的深入，EV71检测越来越成熟，目前检测方法主要有核酸检测，血清学检测等。

1．EV71核酸检测

常用的EV71核酸检测技术主要包括RT-PCR、实时荧光定量PCR。

RT-PCR检测所需标本主要为咽试子、疱疹液、脑脊液、粪便，前三类标本最适宜的采集时间为发病前3日，粪便标本采集可以延至7日内，但实际情况与理想估计总会出现偏差，因此会存在检出率低等现象。标本预处理完毕后，一般按照商业化试剂盒说明提取RNA进行检测。Tsao[11]等建立了针对VP1区的EV71核酸特异性检测方法。常用的EV71核酸检测引物序列为：EV71-S（上游）：5’-GCAGCCCAAAAGAACTTCAC-3’、EV71-A（下游）：5’-ATTTCAGCAGCTTGGAGTGC-3’[12]。

实时荧光定量PCR（RealtimePCR）是利用荧光集团在PCR反应体系中产生的荧光信号累及实时监测整个PCR进程，一般常用检测EV71病毒方法有单通道检测法、双通道可以检测EV71和CVA16或通用型肠道病毒。相较于传统的RT-PCR，荧光PCR具有高灵敏度，无需通过凝胶电泳评价结果，节省时间，提高检测效率，减少交叉污染等优点[12]。常用的荧光标记有SYBRGreen、Taqman、分子信标等，前一种荧光标记为非特异性的，而后两种荧光标记为特异性的。众多研究报道[13～15]表明荧光PCR检测更敏感。

2．EV71抗体检测

李佳萌[16]等研究2009~2010年天津健康人群EV71隐性感染状况，对健康人静脉血标本进行EV71中和抗体测定，结果显示0~5岁组抗体阳性率最低，而16~25岁组的抗体阳性率高达76.67%，且结果经过检验有统计学意义。对于患者EV71抗体检测，则需要急性期和恢复期血清，结果判定标准为恢复期血清较急性期血清中和抗体滴度出现4倍或4倍以上增高即可确诊。该法的优点为具有很好的重复性，缺点为费时、费力且结果判断主观性强。2010年Huang[17]等建立了中和抗体酶联免疫检测方法克服了上述方法的缺点，但该法操作复杂，需使用活病毒，缺乏安全性，且无标准品准确定量。

预防及展望

目前预防和控制HFMD流行的主要措施是公共卫生监测与即时的对症治疗，尚未有效的抗病毒药物，因此EV71疫苗的研发成为热点[18]。而值得祝贺的是，我国于2015年12月3日已批准EV71灭活疫苗生产注册申请，而此类疫苗是由中国医学科学院医学生物研究院自主研发。据悉国内外尚无同类疫苗研发上市，该疫苗对EV71型HFMD的保护率可达97.3%[19]。据研究资料报道[4,20]，针对EV71的疫苗只对EV71型HFMD具有保护作用，而对其他基因型无作用，因此还需要研究者们继续努力，研制出更适合人群免疫的疫苗。

参考文献

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[16]李佳萌,张颖,高璐等.天津市2009—2010年健康人群肠道病毒71型中和抗体血清流行病学调查[J].中华流行病学杂志,2011,32(6):568-570.

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[19]中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会.预防手足口病有了国产疫苗.http://www.nhfpc.gov.cn.

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