327株下呼吸道感染病原菌的鉴定及耐药性分析

327株下呼吸道感染病原菌的鉴定及耐药性分析

刘书敏

江苏省连云港市东方医院检验科江苏连云港222042

[摘要]目的：分析我院下呼吸道感染患者痰培养的主要病原菌分布及耐药情况，指导临床合理使用抗菌药物。方法:对我院2014年1月-2014年12月978例下呼吸道感染患者痰液标本进行培养鉴定及药敏分析。结果：从978份痰标本中检出病原菌327株，阳性率为33.44%。其中革兰阴性杆菌271株（82.87％），革兰阳性球菌56株（17.13％）。下呼吸道病原菌检出率最高的5种细菌分别为：肺炎克雷伯氏菌，铜绿假单胞菌，大肠埃希氏菌，鲍曼/溶血不动杆菌和金黄色葡萄球菌。结论：革兰阴性杆菌仍是下呼吸道感染的主要病原菌，由于耐药菌株不断增多，临床应重视病原菌检测及药敏试验，避免盲目大量用药和不合理用药而导致多重耐药菌株的产生。

[关键词]下呼吸道感染；痰培养；病原菌鉴定；耐药性分析

【中图分类号】R459.7【文献标识码】A【文章编号】1001-5213(2016)08-0069-02

呼吸道感染是一种常见的疾病,近年来随着抗菌药物的广泛应用，呼吸道感病原菌的种类也在不断发生变化，新的耐药菌株也相继增加。为掌握我院细菌耐药情况，以及最近一年我院下呼吸道病原菌的分布及耐药情况，为临床医生合理选用抗菌药物提供依据，我们对我院2014年1月1日至2014年12月31日送检的978份痰标本进行培养、鉴定和耐药分析。现报告如下：

1．材料与方法

1.1标本来源收集本院2014年1月1日至2014年12月31日疑似呼吸道感染的门诊及住院患者送检的合格痰标本978份，分离到病原菌327株，标本严格按要求留取。

1.2标本采集嘱病人清晨用清水反复漱口后，用力自气管咳出第一口痰，于无菌密封容器内2h内送检，或用无菌技术取呼吸道分泌物送检。

1.3细菌培养鉴定痰标本合格性检查：鳞状上皮细胞小于等于10个/LP，白细胞大于等于25个/LP，镜检合格的痰标本经培养前处理后接种血琼脂平板、巧克力琼脂平板、麦康凯平板以及念珠菌显色平板上（血平板、巧克力平板、麦康凯平板以及念珠菌显色平板均购自郑州安图生物工程有限公司）。置5％－10％CO235оC培养18－24小时，观察菌落生长情况，选取不同单个菌落作涂片染色、镜检。细菌培养及鉴定均按《全国临床检验操作规程》进行[1]。

1.4仪器与试剂MicroscanautoSCAN-4细菌鉴定分析仪，PC33、NC50细菌鉴定药敏板及配套试剂均购自美国德灵公司。

1.5细菌鉴定及药敏试验可疑菌落分纯后进行革兰染色、触酶及氧化酶试验。触酶阳性的革兰阳性球菌接种PC33鉴定药敏板，革兰阴性杆菌接种NC50鉴定药敏板。35оC非CO2培养箱中培养16-24小时。滴加相应试剂后，放入AS－4细菌鉴定药敏分析仪判读结果。常用质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922，铜绿假单胞菌ATCC27853，金黄色葡萄球菌ATCC25923，均购自卫生部药品鉴定所。

1.6统计学方法采用回顾性调查，分别统计各病原菌的构成比，并用世界卫生组织细菌耐药性监测中心推荐的WHONET5．5软件进行革兰阴性杆菌及革兰阳性球菌对常用抗生素的耐药率数据处理和分析。

2．结果

2.1从978份痰标本中检出病原菌327株，阳性率为33.44%，与国内相关报道相符[2]，其中革兰阴性杆菌271株（82.87％），革兰阳性球菌56株（17.13％）。下呼吸道病原菌检出率最高的5种细菌分别为：肺炎克雷伯氏菌，铜绿假单胞菌，大肠埃希氏菌，鲍曼/溶血不动杆菌和金黄色葡萄球菌，具体比率见表1。

3．讨论

近几年,随着抗生素的不断研发和大量广泛的应用，随之而来的耐药菌株也逐年增多。以上对我院下呼吸道感染患者痰培养的培养、鉴定和分析结果表明，革兰氏阴性杆菌仍是下呼吸道感染的主要病原菌，与文献报道的78.5%相接近[3]，而革兰阳性球菌仅占17.13％，低于国内报道的21.92%[4]，可能与我院对抗菌药物的慎用和使用的抗菌药物种类不同，故病原菌的构成比不同。我院下呼吸道感染以革兰阴性杆菌为主要致病菌，分离的271株革兰阴性杆菌中病原菌检出率最高细菌为肺炎克雷伯氏菌(24.46%)，其次是铜绿假单胞菌(19.57%)，大肠埃希氏菌(10.7%)，革兰阳性球菌检出率最高的为金黄色葡萄球菌(7.34%)。以上分析结果表明肺炎克雷伯氏菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌等条件致病菌已成为下呼吸道感染的重要病原菌，与文献报道相一致[5]。肺炎克雷伯氏菌及大肠埃希菌对常用抗菌药物氨苄西林、哌拉西林和氨曲南的耐药率较高。对碳青梅烯类耐药率最低,表明碳青梅烯类仍是多重耐药革兰阴性杆菌重症感染的首选药物。从药敏分析可看出铜绿假单胞菌对氨基糖苷类耐药率较低，但因其肾毒性、耳毒性较大而临床慎用，铜绿假单胞菌对头孢他啶的耐药率为31.1％，故可作为治疗的首选药物，亚胺培南及氟喹诺酮类次之，由于铜绿假单胞菌对多种抗菌药物具有天然耐药，给临床治疗带来很大困难。随着抗菌药物的大量使用及铜绿假单胞菌感染的日益增多，铜绿假单胞菌的耐药株也相应增多，这给临床用药带来极大困难。因此，需加强药敏监测以启示临床医生合理选择抗菌药物。鲍曼／溶血不动杆菌是本次统计耐药率最高的细菌，除对阿米卡星与妥布霉素耐药率较低外，对其它抗生素的耐药率均在87％以上。不动杆菌广泛分布于自然界和医院各种环境中，在非发酵菌引起的感染中其分离率仅次于铜绿假单胞菌，近些年已成为院内感染菌之一[6]。本次分析未发现耐万古霉素的金黄色葡萄球菌，表明万古霉素对MRSA仍保持很高的抗菌活性。对其他常用抗生素也都表现出较高的耐药率，但对喹奴普丁/达福普汀、利奈唑胺、呋喃妥因、复方新诺明、和达托霉素都有较好的敏感性，因为呋喃妥因仅限于对尿路感染的治疗，故复方新诺明、利奈唑胺喹奴普丁/达福普汀、和达托霉素可作为临床治疗金黄色葡萄球菌感染的首选药物。

综上所述,下呼吸道感染是医院抗感染治疗的重点，由于近年来呼吸道感染菌群变迁及其耐药性增强，病原菌在构成和药物敏感性上发生了很大变化，为了更加合理的使用抗生素，减少用药的盲目性，规范抗生素的管理，预防细菌耐药性的增加。临床医生应严格按照痰培养和体外药敏试验结果选择敏感的抗生素，才能有效控制耐药菌株以及耐药率的进一步增加。

参考文献：

[1]叶应妩，王毓三，全国临床检验操作规程[M].3版，南京：东南大学出版社，2006：736－753.

[2]黄旭东，魏育生。1253份痰标本的培养及药敏试验结果分析[J].检验医学与临床，2011,8（10）：1253.

[3]叶惠芬，吕苏成，苏丹虹，等。广州地区呼吸道感染常见病原菌的分布与耐药性[J].中国抗感染化疗杂志2002,2:146-150

[4]李雪峰，王厚照，藤少辉，等．下呼吸道感染患者痰培养病原菌分布及耐药性分析[J]．职业与健康，2009，25(6)：591—593．

[5]黄秀荣，刘爱菊，张群先。某院患者痰培养病原菌菌谱及耐药性分析[J].中国感染控制杂志，2011,9（5）：372.

[6]陈东科，孙长贵，实用临床微生物学检验与图谱[M].1版，北京：人民卫生出版社，2011：403－407