RGS4蛋白在肝癌组织中的表达及临床意义

RGS4蛋白在肝癌组织中的表达及临床意义

许新征1张国志2

许新征1张国志2

【摘要】目的检测G蛋白信号调节蛋白RGS4在肝细胞肝癌组织中的表达，研究RGS4在肝癌和癌旁肝组织中的表达差异，分析RGS4与肝癌临床病理特征的关系。方法收集75例肝癌患者术后肝癌及癌旁正常肝组织，采用免疫组织化学染色、Westernblot方法检测RGS4蛋白的表达水平，分析其与肝癌临床病理的关系。结果免疫组织化学结果显示，RGS4在癌旁肝组织中表达较高，在肝癌组织中下调表达，差异有统计学意义（P<0.05）；Westernblot检测结果与免疫组化结果一致。经过分析发现RGS4在肝癌组织中的低表达与患者的性别、年龄、肿瘤的大小、TNM分期及肝癌的侵袭转移无显著相关，但高分期肝癌组织中RGS4的下调率更高。结论RGS4在肝癌组织中异常的低表达，可能与肝癌的发生发展相关，也可能是潜在的肝癌分子诊疗靶点。

【关键词】肝癌；肝癌组织；G蛋白信号调节蛋白4；基因表达；表达下调

【Abstract】ObjectiveTodeterminetheexpressionofRGS4inhepaticcanceranditsclinicalsignificance.MethodsTodeterminetheexpressionlevelsofRGS4of75patientswithhepaticcancerbyimmunohistochemistryandwesternblot.ResultsResultsofimmunohistochemistryandwesternblotshowedthattheexpressionofRGS4wassignificantlylowerthanthatintheadjacentpericancerouslivertissues.Thedifferencewasstatisticallysignificant(P<0.05).CorrelationanalysisfoundthatthelowexpressionofRGS4inhepaticcancertissuewasnotsignificantlyrelatedtogender,age,tumorsize,TNMstage,invasionandmetastasisofhepaticcancer.ConclusionRGS4isabnormallowexpressioninhepaticcancertissues,andmayberelatedtotheoccurrenceanddevelopmentofhepaticcancer.Itmayalsobeapotentialtargetforhepaticcancerdiagnosisandtreatment.

【Keywords】hepaticcancer;HCC;RGS4;geneexpression;down-expression;

肝癌的全球发病率位居恶性肿瘤第五位，其中约70%-85%属于肝细胞肝癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）。HCC诱因复杂，起病隐匿，极易转移复发，这是影响HCC术后治疗效果和预后的最大障碍。因此，研究HCC发生发展的分子机制，寻找HCC特异性分子标志物，对于HCC的诊疗及预防具有重要意义。G蛋白信号转导通路在肝组织生长及再生过程中起着重要的作用。G蛋白信号通路调节蛋白（regulatorofG-proteinsignaling，RGS）是一类GTPase激活蛋白，RGS可以负性调控G蛋白的信号转导过程，进而可以影响细胞内信号转导过程，参与人体的各项生理活动。近年来，普遍认为RGS蛋白是疾病治疗的潜在靶点。RGS4被证明参与了乳腺癌的发生发展过程，但目前尚无RGS4在HCC发生发展过程中的相关报道，本文通过RGS4在肝癌组织中的表达来探讨它是否在HCC发生发展中发挥一定的作用。

材料与方法

1．材料

75例组织标本来源住院手术患者，经术后病理检查诊断为HCC，术前均未进行化疗。

2．方法

采用Barnes法统计分析，按以下标准计分：显色细胞的比例：0（0%）；1（1%~10%）；2（11%~50%）；3（51%~80%）；4（＞80%）。（0：阴性；1~4：弱阳性；＞4：强阳性）

采用SPSS17.0软件进行统计学分析，对计数资料进行χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

结果

1．RGS4在肝癌组织及癌旁组织中的表达

染色结果显示正常肝组织细胞染色着色较深，呈深棕色（图1CD）；肝癌组织细胞着色较浅，为浅棕色（图1AB），这显示了RGS4在正常肝组织中表达量较高，而在肝癌组织中RGS4表达量较低，且两者具有明显显著性（P<0.05，表1）。因此，我们认为RGS4在肝癌组织中表达明显下调（图1）。

为进一步证明免疫组化结果，选取6例样本对RGS4的蛋白表达水平进行WesternBlot分析，结果显示，RGS4蛋白在正常肝组织中表达较高，而在HCC组织表达量低，这与免疫组织化学染色结果一致（图2）。

讨论

目前认为RGS可以作为中枢神经系统疾病、心血管疾病以及糖尿病等疾病的潜在治疗靶点。RGS作为G蛋白信号转导的负性调节子可以调节其信号转导的频率和持续时间，而细胞内RGS蛋白的分布和活性则决定了G蛋白信号转导的效率以及不同G蛋白信号转导之间的平衡。G蛋白信号通路对正常肝组织发育及再生起关键作用，同样在HCC的发生发展中也发挥着重要的作用。G蛋白偶联受体（Gprotein-coupledreceptors，GPCRs）在肿瘤的发生发展过程中也发挥重要的作用，GPR87与GPR5都参与了肝癌的发生发展过程。已经有研究证明RGS家族的某些成员在某些肿瘤中也发挥作用，被抑制表达的RGS2与膀胱癌的发展有关，RGS5、RGS10参与卵巢癌的发生发展过程，RGS6、RGS16与乳腺癌细胞的凋亡与增殖相关，RGS17可以通过cAMP-PKA-CREB信号转导途径促进肺癌细胞的增殖，RGS22能抑制胰腺癌细胞的迁移[21]。RGS4作为RGS调节蛋白大家族中的一员，它在调节G蛋白信号转导通路偶联功能中发挥了重要的作用。因此，我们推测RGS4可能在HCC的发生发展过程中发挥一定的作用。

通过对75例病例的研究发现，肝癌组织中的RGS4表达比正常肝组织中的明显下调，Ⅲ-Ⅳ期的患者肝癌组织的RGS4的下调率（70%）要比Ⅰ-Ⅱ期的下调率（53.33%）高。因此，我们推测RGS4可能与HCC的发生发展有关，可能对肝癌肿瘤细胞有抑制作用。但是关于RGS4参与HCC发生发展过程的分子机制还尚未明确，我们猜测可能是由于RGS4调节G蛋白信号转导的频率和持续时间而影响了肝的发育，影响了HCC的发生发展。也可能是RGS4通过影响细胞凋亡而影响了HCC的发生发展过程。但RGS4的具体作用及其分子机制还需要继续深入的研究及探讨。

本研究发现RGS4在肝癌组织中下调表达，暗示了它可能参与了HCC的发生发展。这为HCC发病机制的研究提供了新的思路，为肝癌的预防治疗提供了新的分子靶点，但RGS4在HCC中发挥的具体作用及其分子机制还需要进一步的研究及探讨。

参考文献

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