论三种多糖针对 CAF细胞的药效对比

论三种多糖针对 CAF细胞的药效对比

周烜

大连理工大学，辽宁 盘锦 124221

摘要：针对肿瘤的治疗一直备受世界人民关注，但直至今日，临床上最常实施的治疗方式仍然是化疗和放疗，尽管人们已经了解该疗法的诸多弊端。而免疫治疗肿瘤的方式则可以弥补前者的许多不足并大幅度减轻了副作用损害，它通过诱导、激发人体的自身免疫去进行抗肿瘤免疫应答。据研究，肿瘤微环境中CAF细胞可调控肿瘤细胞生长，其干扰T细胞 - 肿瘤细胞相互作用并最终阻碍肿瘤破坏，阻碍免疫应答，故CAF细胞是一个有效的免疫治疗靶点。此处将三种针对CAF细胞治疗的药物进行药效对比。

关键词：CAF细胞、药效对比、诱导细胞凋亡、MPSSS、GQP、lentinan

背景介绍和治疗思路原理

CAF细胞：促进癌变细胞生长的成纤维细胞，有助于癌细胞发生、生长、血管形成。还会产生一些细胞因子抑制肿瘤的免疫应答。在文献《Awaking immunity》中也提到，成纤维细胞的去除不改变肿瘤浸润性T细胞数量或亚型，而确实可以导致干扰素（IFN-）和肿瘤坏死因子的激活和分泌，可见该细胞的作用原理。

香菇多糖：香菇的主要有效成分，是一种宿主免疫增强剂，具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等作用，通过抑制精氨酸酶活性和通过激活p38和ERK的去磷酸化来抑制精氨酸酶活性和TNFR2的表达而诱导MSC2细胞的分化并损害其免疫抑制功能，作用于CAF细胞就显示为抑制CAF细胞介导的免疫抑制。

枸杞多糖：一种生物活性物质，具有促进T、B、CTL、NK和巨噬细胞等免疫功能，促进IL-2、IL-3和TNFβ等细胞因子产生，有调节免疫、延缓衰老多种功效，可制药。

治疗思路原理：利用有效药物（如上述香菇多糖）损害CAF细胞的免疫抑制功能，处理后的CAF功能减弱，免疫应答便可以正常进行，肿瘤细胞可被自身免疫系统清除，即免疫激活，由此达到肿瘤治疗的目的。

实验设计和目的

实验目的：在了解香菇多糖治疗肿瘤的原理和相关背景知识的情况下，进行实验对比三种多糖，分别是lentinan、MPSSS、GQP，对CAF细胞的作用以及对正常免疫细胞的伤害程度，并综合分析三者药效，进行进一步的讨论。

实验设计：

1. 材料与仪器：lentinan、MPSSS、GQP、CAF细胞悬液、MTT染料、酶联免疫检测仪、流式细胞仪、12孔板、96孔板、三联药物、PBS缓冲液、DMEM、RPMI-1640培养基、胰酶。

2. 实验方法

1）细胞提取及培养，提取、培养小鼠脾细胞及骨髓细胞。2）CAF细胞培养3）MTT实验

4）凋亡检测实验

结果及分析结论

结果

1. 小鼠脾细胞MTT检测结果

Lentinan作用组的脾细胞检测结果明显低于对照组和另外两组实验结果，GQP与对照组持平，MPSSS作用的脾细胞检测结果高于对照组和GQP作用组。说明Lentinan 杀死了大量脾细胞；MPSSS、GQP并无明显抑制作用;MPSSS一定程度促进脾细胞的生长,GPQ无明显促进作用。

2. 小鼠骨髓细胞MTT检测结果

Lentinan作用组的骨髓细胞检测结果明显低于对照组和另外两组实验结果，MPSSS与对照组持平，GQP作用的骨髓细胞检测结果高于对照组和MPSSS作用组。说明Lentinan 杀死了大量骨髓细胞；MPSSS、GQP无明显抑制作用；GQP有一定促进骨髓细胞生长的作用,MPSSS无明显促进作用。

3. CAF细胞凋亡检测实验结果

lentinan作用的结果显示CAF细胞早期凋亡较其他两种多糖处理组与对照组明显增多。GQP、MPSSS作用组的CAF细胞早期凋亡并不突出。说明lentinan有明显杀死CAF的药效，疗效显著；MPSSS有一定药效，并不显著。枸杞有一定药效，与MPSSS效果相仿，疗效不显著。

分析结论

根据实验结果分析，Lentinan具有良好的诱导CAF细胞凋亡的能力，药效显著，但同时对免疫细胞也有较强的损害作用。MPSSS、GQP诱导CAF细胞凋亡的作用均远低于lentinan，但仍具有一定药效，且对免疫细胞没有强烈杀伤作用，还具有一定的促进生长的作用。但究竟哪种多糖是相对而言最佳药剂，还要进行进一步研究、实验和统计学分析。

讨论

思考一：MPSSS和GQP并没有强烈诱导CAF细胞凋亡的效应，猜测MPSSS、GQP可能让CAF细胞功能改变，失去免疫抑制效应从而促进免疫应答，益于肿瘤免疫治疗。但该猜测需要进一步做实验验证与分析。

思考二：经查询，关于研究GQP是否抑制CAF细胞的文献较少，此文章里的数据可作为参考。

参考文献

[1]《MPSSS impairs the immunosuppressive function of cancer-associated fibroblasts via the TLR4-NF-κB pathway》PMID: 30992392 PMCID: PMC6509060 DOI: 10.1042/BSR20182171

[2]《Awakening immunity》DOI：10.1126 / science.1198345