苦参软膏的制备及质量评价

苦参软膏的制备及质量评价

李华坚

广东省湛江卫生学校 广东 湛江 524037

[摘要] 目的：制备苦参软膏并建立其质量控制方法。方法：采用熔融法制备油脂性苦参软膏，采用高效液相法（HPLC）测定氧化苦参碱的含量。结果：所得制剂均匀细腻，氧化苦参碱在0.6 -9µg/ml内有良好的线性关系。结论：该软膏制备工艺可行，含量测定方法简便、准确，可用于苦参软膏的质量控制。

[关键词] 苦参； 软膏 ；质量控制

苦参为豆科槐属植物苦参 (Sophora flavescens Ait.)的干燥根。春、秋二季采挖，除去根头和小支根，洗净，干燥，或趁鲜切片，干燥^［1］。苦参又名水槐、地槐、白茎，始载于《 神农本草经》，列为中品，是我国常用传统中药。其味苦、性寒， 具有清热燥湿、杀虫、利尿之功效；用于热痢便血，黄疸尿闭，赤白带下，阴肿阴痒，湿疹，湿疮，皮肤瘙痒，疥癣麻风等病症；外用亦治滴虫性阴道炎。李时珍谓：“苦以味名，参以功名。”现代临床研究也证实苦参含有多种化学成分并具有广泛的生物活性。其传统药理作用以抑菌、抗心律失常为主，现代药理研究表明^［2］，苦参尚具有抗炎、抗肿瘤、抗病毒、抗肝损伤、抗肝纤维化、抑制中枢等多种药理活性。其化学成分主要为生物碱和黄酮类，其中生物碱以苦参碱和氧化苦参碱含量最高。由于苦参具有良好的治疗皮肤病的作用，故本实验将其制成软膏，并进行相关的质量评价。

1.实验样品及仪器

1.1仪器：YH系列电热器、HH-S恒温水浴锅、分析天平 AUW120D

旋转蒸发仪RE52-05(上海亚荣生化仪器厂）

SHZ-D（III)循环水式真空泵、TK-12A型透皮扩散试验仪

TGL-16B台式离心机、蛇形冷凝管、DIONEX P680

色谱柱：Diamonsil C18(2)(5um,250*4.6mm)

检测器：DIONEX UVD170U

1.2药品试剂：苦参（批号：101110 广州致信中药饮片有限公司）

氧化苦参碱（中国药品生物制品检定所 110780-200506）

羊毛脂、凡士林、氮酮均为化学纯

2.处方及其制备工艺

2.1处方 苦参总碱提取物 0.33g 羊毛脂 0.9g

凡士林 4g 氮酮 0.3g

2.2苦参提取纯化

将苦参1kg剪碎至于圆底烧瓶中，加八倍量的70%乙醇，分别回流提取4h、2h、1h，滤过，合并滤液，药液浓缩至半流体稠膏状（无醇味，搅拌无阻力），加膏体1/5体积的水，搅拌均匀，用氨水或氢氧化钠调碱（pH：9-10），通风橱内水浴蒸干至稠膏，将稠膏用保鲜膜封口，置于冰箱保存。

2.3软膏制备

熔融法制备：置苦参总碱提取物、羊毛脂于烧杯中加热混匀，加凡士林、氮酮，水浴至熔融后，停止水浴，不断搅拌至室温即得。

2.4方法与讨论

2.4.1 色谱条件: 色谱柱：Diamonsil C18(2)(5um,250*4.6mm)，流动相为甲醇：水=1:9，流速：1.0mL/min，检测波长：210nm，进样量为10μL，柱温:30℃。

2.4.2溶液的制备

对照品溶液的制备：取对照品氧化苦参碱适量，精密称定，加甲醇制成浓度为0.6mg∕ml的溶液，即得。

供试品溶液的制备：取以上制备的软膏约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液0.5ml，精密加入三氯甲烷20ml，密塞，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，加在中性氧化铝柱（100~200目，5g，内径1cm）上，依次以三氯甲烷、三氯甲烷-甲醇（7:3）混合溶液各20ml洗脱，合并收集洗脱液，回收溶剂至干，残渣加无水乙醇适量使溶解，转移至10ml量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀即得。

2.4.3线性关系考察

分别精密取对照品溶液1µl、2µl、2.5µl、5µl、7.5µl、10µl、12.5µl、15µl，注入HPLC中，测得的峰面积分别为5.8158、10.4347、13.9358、26.4304、37.7212、50.7370、65.4647、75.2658。以取样量为横坐标、峰面积为纵坐标进行线性回归，得回归方程：

y=5.0259x+0.8587 r=0.9994 n=8

结果表明：氧化苦参碱在0.6 -9µg/ml内有良好的线性关系

2.4.4 重复性试验

取同一供试样品溶液六份，分别精密吸取5µl，注入HPLC中，测得氧化苦参碱峰面积分别为 55.9884、56.4139、56.1462、56.2600、55.2486、54.1385，RSD为1.55％。结果表明本法重复性良好。

2.4.5稳定性试验

将供试品溶液分别放置0h、0.5h、1h、1.5h、2.5h进行测定，得氧化苦参碱峰面积分别为55.9884、56.4139、56.2600、56.1494、54.0524。RSD为1.75%。结果表明本法稳定性良好。

2.4.6精密度试验

分别吸取同一浓度的对照品溶液5µl进行测定按上述色谱条件测定，以氧化苦参碱峰面积计算，得RSD为1.56%。结果表明本法精密度较好。

3 质量控制

3.1外观 外观细腻，黄白色，稠度适宜，易涂布，但不宜洗涤。

3.2 pH 取少量膏体，加甲醇溶解，用pH试纸检测，其值为5.5。

3.3水值 取1g空白基质，逐渐加入少量水，研磨至不能吸收水而又无水滴渗出即为终点。

3.4耐寒性 将膏体至于-20度及-4度冰箱中，24h后，软膏无油水分离现象。

3.5刺激性 取家兔两只，于其背部剪毛，露出皮肤，左侧背部皮肤涂抹含药物膏体，右侧涂抹空白基质，观察24h。实验结果：家兔背部无发红、无过敏现象。

3.6透皮实验

3.6.1 取皮：取大鼠一只（约150g），用10%水合氯醛使其麻醉，用硫化钠脱去其腹部皮肤，12h后，将该鼠断颈处死，立即剥离腹部皮肤，去除皮下脂肪组织， 用生理盐水洗净，剪成适当大小皮肤块。

3.6.2 体外透皮实验：预热透皮扩散池至32℃，皮肤置于装有磁力搅拌子的改良Franz立式扩散池上，真皮层面向接收池，角质层面向供给池。取适量软膏，分别涂于皮肤表面，连接并固定接收池与供给池，在接收池中加入预热至32℃的70%乙醇，开始磁力搅拌，计时，分别于1、2、3、4h从接收池中取出0.5ml接收液，并及时补充32℃等量的70%乙醇。

将1、2、3、4h得到的接收液过微孔滤膜，分别精密吸取20µl注入高效液相中，以氧化苦参碱峰面积计算，得RSD为1.86%。结果表明苦参软膏透皮吸收良好

4 讨论

苦参抑菌、抗炎等机制使其在皮肤病的治疗中应用较广，一般作为洗剂来使用，但洗剂可粘附性较差，生物利用度较低，而制成软膏后可克服此缺点。

由于苦参软膏的基质是油脂性，涂药后不易清洗，透皮实验证明其透皮效果良好。在处方筛选过程中，曾对辅料进行了考察，发现羊毛脂有一定的易臭味，且粘稠度大。而采用研和法制备此软膏外观上并没有变化，但较繁琐，故采用熔和法制备。所制苦参软膏均匀细腻，氧化苦参碱在0.6 -9µg/ml内有良好的线性关系，采用高效液相法（HPLC）测定氧化苦参碱的含量，结果表明：该软膏制备工艺可行，含量测定方法简便、准确，可用于苦参软膏的质量控制。

5参考文献

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典2015版［M］.一部，中国医药科技出版社，2015：202

[2] 刘伟，唐金花，王亚娣.苦参的研究进展［J］.时珍国医国药，2006，17（5）：829