两种细菌鉴定法在临床血液检验中的应用探讨

两种细菌鉴定法在临床血液检验中的应用探讨

朱芳静

黑龙江省农垦九三管理局中心医院 161441

　　【摘要】目的：对比直接药敏检验与常规药敏检验在临床血液细菌检验与鉴定中的应用价值。方法：选择我院2016年6月～2018年6月接收治疗的发热合并全身感染的患者300例，以无菌操作对所有患者在发热或感染的高峰期时采集阳性血液标本300份，并对每份样品同时进行两种方法的鉴定。分析两种检测方法的细茵鉴定结果及药敏性。结果：在菌种检出率中，肠杆菌属的检出率最高，而在细菌抗生素敏感度的检出符合率的比较中，运用两种方法的药敏检验结果总的符合率高。结论：直接药敏检验具有多重优势，值得在临床上加以广泛应用和推广。  　　【关键词】细菌鉴定；血液检验  [Abstract] Objective: To compare the application value of direct drug sensitivity test and routine drug sensitivity test in clinical blood bacterial test and identification. Methods: 300 patients with fever and systemic infection who were treated in our hospital from June 2016 to June 2018 were selected. 300 positive blood samples were collected from all patients at the peak of fever or infection by aseptic operation, and each sample was identified by two methods at the same time. The identification results and drug sensitivity of the two methods were analyzed. Results: the detection rate of Enterobacteriaceae was the highest among the bacteria, and the results of the two methods were consistent with each other. Conclusion: the direct drug sensitivity test has multiple advantages and is worthy of wide application and promotion in clinical practice.

[Key words] bacterial identification; blood test

　　临床上抗生素的滥用导致各种细菌的耐药性及其对抗生素的敏感性发生变异，增加了临床检验工作的困难。不同和细菌有不同的抗药敏感性，因此，采用合适的测定方法准确测定出引起患者疾病的细菌及其抗药敏感性，对临床患者的诊断和治疗具有重要的意义。目前临床常用的细菌检测检验方法有常规检验、直接药敏检验、血清学凝集检验、镜检等。本确定采用常规检验、直接药敏检验两种细菌检验方法检测血液中细菌的抗药性，现将研究结果报告如下。  　　1资料与方法  　　1.1一般资料  　　选择我院2016年6月～2018年6月接收治疗的发热合并全身感染的患者300例。观察组患者男168例，女132例。年龄22～68岁，平均年龄（34.5±6.6）岁。所有患者在入院前48h内未接受相关治疗或服用任何药物，无血液系统疾病或凝血功能障碍，也无严重肝、肾、心等器质性病变，且患者在性别、年龄及病情等一般资料上无显著性差异（P>0.05），具有可比性。  　　1.2方法  　　以无菌操作对所有患者在发热或感染的高峰期时采集阳性血液标本300份。每人采集20ml，每位患者采集一次。采集好的血液样品尽快送至检验科，并进行冷藏保存，并对每份样品同时进行直接检验和常规检验。  　　1.2.1常规检验，将所有阳性样分别接种于血平板、麦康凯平板和巧克力平板，在35℃5.0%C02下孵育18～24 h后，取菌落涂片并进行革兰染色。根据检测结果选择酶。采用Walkaway 40系统进行鉴定与药敏试验[2]。  　　1.2.2直接药敏检验，将所有样本直接接种于全自动血培养仪中，进行自动培养和检测。当系统检出阳性时，用无菌注射器抽取10m阳性样品进行密度分离细菌，于离心机中以1500r/min离心5min后，取其上清液。将所得上清液继续以3000r/min离心15min后，去其上清液。将剩余液体再进行密度梯度离心分离细菌。所得液体用PBS洗涤沉淀两次后重悬。  　　取20μL悬液涂片并进行革兰氏染色，于显微镜下倒置观察：若发现呈链状G+菌，则进行药敏初试验（MH平板）。按药敏结果选择酶，并配配菌液浓度至（6.2×108）cfu/L， 接种菌液1～2滴于NC21综合板上进行细菌药敏测定。若为一般菌种（真菌例外），用无菌拭子将菌液均匀涂抹在MH平板上，贴上药敏纸片[2]。  　　1.3观察指标  　　观察药敏试验与细菌鉴定，判断敏感、耐药和中度敏感[2]  　　1.4统计学分析  　　采取统计学软件SPSS19.0对上述汇总数据进行分析和处理，计数资料采取率（%）表示，组间对比采取x2检验（或者采用T检验）；对比以P<0.05为有显著性差异和统计学意义。  　　2结果  　　在经过直接药敏检验后，300份样品中检出185份阳性样品，菌种检出率中，埃希氏菌、克雷柏杆菌及沙门菌等肠杆菌属的检出率最高，总的检出率达85.6%，在细菌抗生素敏感度的检出符合率的比较中，运用两种方法的药敏检验结果总的符合率高，其中检测G+球菌敏感、中度敏感、耐药符合率分别为96.2%、92.0%、96.8%；两种方法检测G-杆菌敏感、中度敏感、耐药的符合率分别为96.8%、93.3%、99.2%两种检测方法间敏感度均无明显差异，不具有统计学意义（P>0.05）。  　　3讨论  　　近年来，临床抗生素的滥用，使得细菌的耐药性不断增加，且耐药性出现比较大的分化。在临床感染中，多重耐药菌感染引发患者全身感染的病例占绝大多数。因此，在临床上采取及时、高效地检测方法对致病细菌进行鉴定与药敏性测定，以提高患者用药的合理性，是治疗细菌性感染患者的关键。临床检验血液细菌的方法多为药敏检测，但是这些传统的方法鉴定细菌及其药敏性所需的时间一般需要二至三天，甚至有些细菌在常规的细菌检验中无法得出确切的检验结果，从而导致误诊或延误了患者的最佳治疗时期。因而临床上迫切需要既能准确地鉴定细菌及耐药性同时又能够快速得出结论的细菌检验方法。  　　从本研究采用的直接药敏检验与常规检验的对比中，可以看出，采用直接药敏检验G+球菌及G-杆菌的检出率和符合率均很高，符合率均超过90%，两者检验方法的结果无明显差异（p>0.05）表明采用直接药敏检验对G+球菌及G-杆菌的鉴定与药敏性测定均有好的效果。直接药敏检验对肠杆菌属的检出符合率达100%，表明直接药敏检验对肠杆菌属具有较高的敏感性。从检验所需的时间上看，直接药敏检验所需的平均时间为10h左右，其所需的时间远远小于常规检验，为患者的及时治疗提供了更多的机会。此外，直接药敏检验在操作上较常规检验更为简便， 操作所耗材料更少。  　　总而言之，直接药敏检验具有多重优势，值得在临床上加以广泛应用和推广。  　　参考文献  　　[1]李祖新.临床血液检验中的两种不同细菌鉴定法应用分析[J].中外医疗，2013，32（6）：185-186.  　　[2]李文华，谢桃，余玲玲等.临床血液检验中两种细菌鉴定法的应用评价[J].健康之路，2014，（2）：360-361.  　　[3]张亚宾.血液检验中两种不同的细菌鉴定法临床分析[J].中国保健营养（上旬刊），2014，24（5）：2940-2941.