免疫检验法在乙肝病毒血清标志物检测方面的应用体会

免疫检验法在乙肝病毒血清标志物检测方面的应用体会

刘红

四川省泸州市 泸县人民医院检验科 646100

肝脏是人体最为重要的消化及解毒器官，同时也是机体内部各类蛋白质分解、合成的重要场所，因而肝脏组织病变，最为直观的病理改变即为各类蛋白质水平的异常。慢性病毒性肝炎是由病毒感染导致的肝部损伤性病变，现阶段诊疗中以慢性乙型肝炎最为常见，本病呈慢性进行性发展，患者主要表现为食欲减退、恶心呕吐、躯体易疲惫等为症状，且本病患者具有较强的传染性，可通过母婴、性接触等途径传播。临床诊疗中根据病变严重程度一般分为轻度肝炎、中度肝炎、重度肝炎、重型肝炎、肝硬化、肝癌等类型，慢性病毒性肝炎的主要危害在于其病情的进展性，一旦发展成重型肝炎、肝硬化甚至肝癌，患者病死率将大大提高，而近年来各类慢性病毒性肝炎的高发趋势已成为较棘手的公共卫生问题之一。早期发现确诊并及早干预是提高预后、降低死亡率的关键，目前慢性病毒性肝炎的诊断方式较多，确诊则有赖于实验室检查、影像学检查等的联合实施，不利于早期快速有效筛查。目前诊疗中以免疫检验法最为常用，具有操作简便、价格低廉、可复性高等优势，本文主要就免疫检验法在乙肝病毒血清标志物检测方面的应用与效果进行分析。

1 免疫检验法的应用

目前诊疗中常用的免疫检验法有化学发光免疫分析法、酶联免疫法、时间分辨荧光免疫法等，具体检测方法如下：

①标本采集：分别采集每位患者（受检者）晨起（7:00~9:00）空腹静脉血5~6ml左右，置于真空抗凝管，同时做好标记，采集后立即送入实验室进行处理，给予5~10min左右的3000r/min离心处理，分离血清后置于零下20℃的冰箱中保存。

②检测方法，化学发光免疫分析法采用全自动化学发光免疫分析仪进行待检样本检测；酶联免疫法采用酶标免疫检测仪进行待检样本检测；时间分辨荧光免疫法采用时间分辨荧光免疫分析仪进行检测。各类检测均需要严格遵循仪器操作说明，采用原装试剂开展检测工作。

③检测指标：主要进行HBsAg、 HBeAb、 HBeAg、 HBcAb、 HBsAb等指标的定量检测，其中阳性标准标准为HBsAg＞0.5 IU/mL，HBeAb＞0.4 NCU/mL，HBeAg＞0.5 PEIU/mL，HBcAb＞0.9 NCU/mL，HBsAb＜10 mIU/mL，超出上述范围即可判断为阳性。

2 不同免疫检验法的差异分析

现阶段针对乙肝病毒血清标志物检测采用不同免疫检验法的研究较多，不同研究受样本个体化差异的影响，存在一定的差异性。

乙肝病毒血清标志物主要反映机体免疫反应，乙肝病毒感染机体后，HbsAg水平会显著升高，一般在感染1~2周左右呈阳性，伴随感染时间的延长呈现持续升高的特点。HBsAb是在机体感染乙肝病毒后产生的抗体，与HBsAg结合发挥抗乙肝病毒感染的效果，HBsAb水平能够反映机体免疫反应情况。HBeAg阳性反应患者病情严重程度及传染性，水平越高表示病情约活跃，传染性越高，同时其会刺激机体产生HBeAb，HBeAb阳性表明机体乙肝病毒的复制相对静止，传染性较低。

在大部分情况下，不同免疫检验法在乙肝病毒血清标志物炎性检出率方面的比较无显著差异，也有部分研究表明，不同免疫检测方法在HBeAg、HBeAb、HBsAg等血清标志物的检出率方面比较存在显著差异，这可能与酶联免疫法的检测结果与样本、试剂质量的影响较大，易在定量检测时发生一定误差，但酶联免疫法、时间分辨荧光免疫灵敏度方面具有较大的优势。

不同的免疫检验法均存在一定的优势与不足，近年来诊疗中为提升检验结果的准确性，降低漏诊及误诊风险，多采用联合检测的方式，提升检验结果的可靠性。

3 乙型病毒性肝炎的常见实验室检测方式

①肝功能检测：采用全自动生化分析仪及相应配套试剂对患者（受检者）进行肝功能检测，主要检测指标有丙氨酸转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、白蛋白（ALB）及碱性磷酸酶（ALP）等，正常参考范围分别为ALT：0~38U/L，AST：0~38U/L，ALB：35~55g/L，ALP：53~128U/L。

②甲胎蛋白检测：采用全自动化学发光检测仪及相应的试剂对患者（受检者）进行甲胎蛋白水平（AFP）的检测，其中正常参考值为＜20 µg/L。

③甲胎蛋白异质体检测：采用全自动化学发光检测仪及甲胎蛋白异质体试剂对患者进行甲胎蛋白异质体（AFP-L3）水平的定量检测，AFP-L3与AFP的比值即为AFP-L3％，一般以美国FDA中的相关参考范围AFP-L3％＞10％为阳性，即正常参考值为AFP-L3％≤10％。

上述检测方法主要用于评估乙肝病毒感染导致乙型肝炎后机体病理变化情况的诊断与鉴别，能够为临床诊疗工作的开展提供切实依据。

4 检测注意事项

各项检测均由实验室检测工作经验丰富的检验科医师完成，检验过程中检验室的温度控制在25℃左右，湿度控制在55％左右。检验室内各仪器均需有设备科进行定期的保养与维护，从而确保各类仪器设备的正常使用，降低假阳性、假阴性等的风险。