直接免疫荧光法检测呼吸道病毒抗原的临床应用

直接免疫荧光法检测呼吸道病毒抗原的临床应用

王超 1 王迪（通讯作者）

中国人民解放军联勤保障部队第九六二医院 检验科 150000

【摘要】目的：研究直接免疫荧光法检测呼吸道病毒抗原的临床应用的效果和意义。方法：选取我院500名呼吸道感染者作为实验对象。通过直接免疫荧光法为患者进行呼吸道病毒抗原检测，并进行统计分析。所检测的病毒抗原包括RSV、FB、FA、PIV1、PIV2、PIV3、ADV七种。结果：在这500名实验患者的检测报告中我们发现，其中有200名患者为病毒感染患者，占总比例的40%，其中检测出RSV病毒抗原的患者共109例，占总比例的54.5%。检测出混合病毒抗原的患者共36例，占总比的18%。45名患者是ADV病毒抗原，占总比例的22.5%。患者大部分为儿童，年纪越大，患呼吸道病毒感染的几率就越小。而呼吸道病毒感染的高发区通常在冬季和春季。夏季和秋季的感染数据明显减少。结论：直接免疫荧光法检测呼吸道病毒抗原的检测效果显著，而且高效快捷，在临床应用中的效果较好，值得推广。

【关键词】：呼吸道感染；病毒抗原；直接免疫荧光法

近几年，通过临床研究表明，呼吸道感染以及属于感染性疾病中最常见的一类疾病了。而这类疾病大多发生在儿童身上。其中病毒感染最为常见。大部分急性上呼吸道感染与下呼吸道感染都是由于病原体导致的。虽然现在的抗生素应用广泛，呼吸道细菌感染的数量也在逐渐下降。但是呼吸道病毒感染的数量仍然不断增加，且治愈周期长。而检测病毒感染的方式虽然多，却各有各的不足，要么价格贵，要么检查效果差。为了改变这个现状，本文就直接免疫荧光法检测展开了深入的研究，并做出如下报告。

1、资料与方法

1.1 一般资料

自2019年2月起，我院共选取了500例呼吸道感染患者作为实验患者，并为他们进行了直接免疫荧光法检测。这500名患者皆为自愿参加，其中女患者为260名，男患者为240名，年龄在5个月到12岁左右。我们采集了患者鼻咽分泌物，并在两个小时内完成检测。检测量在1-2毫升左右。

1.2 方法

本次研究的全部患者都是统一采用BX51型荧光显微镜仪器和呼吸道病毒诊断试剂，且分泌物都是采用了直接免疫荧光法检测进行。医务人员通过在患者的鼻腔处插入采样导管，大约7厘米到8厘米左右，让导管达到咽部下，然后通过诱导吸取的方式，采集1-2毫升的分泌物，并且将分泌物放入无菌瓶中等待检查。在这个过程中需要注意的是，要减少唾液的混入，因为唾液较多会影响检查的结果^【1】。分泌物取出后，医务人员需要快速的将分泌物送去检测地点进行检测，这样可以减少分泌物中的细胞分裂或者死亡。避免假阴性检查结果的出现。送到检测点后，医务人员开始打匀患者的分泌物，并且将其转移到尖底离心管中，并以每分钟1500次转速的频率进行离心处理。5分钟后，去除上面的清液，留下底下的沉淀物，需要主要的是，医务人员要尽量减少分泌物上的黏丝和黏液，避免非特异性荧光而影响正常检测。洗涤结束后，将分泌物放到0.5-1毫升的PBS溶液中进行溶解。并且将其吹打成细胞悬液。然后在玻璃片上点7个样品、经过室内温度风干后，再采用冷丙酮加以固定。最后将制作好的细胞样本玻璃片和病毒原体对照玻璃片放在一起，同时采用直接免疫荧光法进行检测^【2】。

1.3统计学分析

本次研究相关数据采用统计学软件SPSS18.0处理，计数资料用%表示，行χ2检验，以P<0.05差异为统计学有意义的标准。

2、结果

2.1病毒感染情况

通过检测发现，在这500例呼吸道患者中，有200名患者属于病毒感染患者，占总比例的40%，这200名患者中，检测出RSV病毒抗原的患者共109例，占总比例的54.5%。检测出混合病毒抗原的患者共36例，占总比的18%。剩下的45名患者是ADV病毒抗原，占总比例的27.5。具体数据见表一。

2.2不同年龄病毒感染检出情况

呼吸道病毒感染对于年龄尚小的儿童来讲更容易患病，年龄越大，患病率越低，在这200名患者中，1岁以下的宝宝患病率明显高于1到6岁的宝宝和6到12岁的青少年。具体数据见表二。

2.3不同季节感染情况

呼吸道病毒感染的高发期在冬季和春季两个季节，而对于夏季和秋季来讲，则属于低发季节。具体数据见表三。

3、讨论

通过以上的临床研究表明，呼吸道感染疾病多发生在儿童，且年龄越大，发病几率越小。0到1岁的婴儿更容易患有呼吸道病毒感染疾病^【3】。并且在冬季，春季两季为高发区。近年来，虽然检测此方面的方法有很多，但是都要局限性和不足，费用高的普通家庭无法接受，费用低的检查结果又容易出现假阴性的状况耽误治疗^【4】。而直接采用免疫荧光法，不仅方便快捷，而且误诊率低，因此在临床应用中效果极佳，值得推广。通过直接免疫荧光法检测，可以尽早的发现病情并且进行治疗，缩短患者患病时间，值得临床借鉴^【5】。

【参考资料】：

[1]倪淑芳,钟小芬,李建青, 等.直接免疫荧光法检测呼吸道病毒抗原的临床应用[J].现代医学与健康研究,2018,000(007):P.32-33.

[2]罗红英,何丹,罗如娟.直接免疫荧光法检测儿童呼吸道病毒抗原的结果分析[J].现代诊断与治疗,2019,30(21):3703-3705.

[3]杨泉,席金瓯.直接免疫荧光法检测儿童呼吸道病毒抗原的结果分析[J].国际检验医学杂志,2016,37(16):2331-2332,2333.

[4]吴鸿涛,凌敏.成人急性下呼吸道感染中直接免疫荧光法病毒抗原检测结果分析[J].新疆医学,2016,46(2):166-169.

[5]朱顺新,潘丽华,曾才秀, 等.直接免疫荧光法在多种呼吸道病毒抗原检测中的应用[J].中国卫生检验杂志,2015,25(14):2307-2309.