三种血清方法检测梅毒的结果比较

邓秀环

湖南省嘉禾县塘村镇中心卫生院 湖南 嘉禾 424512

[摘要]目的 对临床中检测梅毒常用的三种血清方法，即酶联免疫吸附试验、梅毒甲苯胺红不加热血清学试验以及梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验进行对比，评价这3种方法在梅毒诊治中的应用价值及各自的优缺点。方法 分别用酶联免疫吸附试验、梅毒甲苯胺红不加热血清学试验以及梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验检测皮肤科门诊及住院患者血清标本547例，收集阳性检出率数据并分析。结果 TPPA法的检出率最高，为34%，其次是TP-ELISA法，略低于TPPA法，为30.3%，最后是TRUST法，仅有19.2%。两两比较中，TPPA法与TP-ELISA法之间没有显著性差异（P＞0.05），而TPPA法与TRUST法之间的差异性非常显著（P＜0.01），TRUST法与TP-ELISA法之间也有显著性差异（P＜0.05）。结论 TP-ELISA法阳性检出率高且操作方便，可作为常规筛选检测；TPPA法检出率高，但是其操作时间较长且成本偏高，适用于TP-ELISA法筛选出阳性标本的进一步检测。

[关键词]梅毒；酶联免疫吸附试验；梅毒甲苯胺红不加热血清学试验；梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验

梅毒是一种由苍白螺旋体引起的性传播性疾病，在临床中通常将它分为一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒和潜伏梅毒等。近年来我国梅毒患者数量剧增，且已经成为报告病例数目最多的性病，以潜伏梅毒为主，其次是一期、二期梅毒。梅毒最主要的传播途径是血液传播和性传播，病情复杂，可侵犯全身各组织与器官，且病情时隐时现，所以前期的筛查和检测是防止其蔓延的关键。临床上检测梅毒的方法主要有三种，分别是酶联免疫吸附试验(Treponema Pallidum Enzyme linked immunosorbent assay , TP-ELISA）、梅毒甲苯胺红不加热血清学试验(Toluidine red untreated serum test , TRUST）以及梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(Treponema pallidum particleagglutination, TPPA）。本研究通过收集本院患者病例数据，对三种检验方法检验出的阳性病例进行了数据统计分析，现将其报道如下。

1材料与方法

1.1一般资料

收集本院2016年9月至2017年11月皮肤科门诊及住院患者547例，男性327例，女性220例，平均年龄（36±11）岁。

1.2方法

病人就诊后抽取静脉血5ml做为实验标本，在实验室内37°水浴30分钟，后离心取血清备用。收集到的标本同时用TP-ELISA法、TRUST法和TPPA法三种方法检测，检测操作严格按照说明书进行，操作者均为本院接受过培训的专业医师。检测中仪器有酶标仪、振荡器、洗板机、水浴箱等，试剂分别是上海荣盛生物药业有限公司生产的TRUST试剂、上海科华生物工程股份有限公司的TP-ELISA试剂以及日本富士株式会社的TPPA试剂。

1.3评价指标

用阳性率评价三种检测方法的检出情况，用敏感性和特异性评价三种检测方法的优缺。

1.4统计学分析

采用SPSS19.0统计软件对计量资料进行整理分析。三种检验方法阳性率的比较采用X²检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1三种检测方法对梅毒检出率的比较

分别用三种方法检测547份血清标本，结果显示TPPA法的检出率最高，为34%，其次是TP-ELISA法，略低于TPPA法，为30.3%，最后是TRUST法，仅有19.2%。具体见表1。

表1：三种检测方法阳性检出率结果

2.2三种检测方法两两比较结果

在两两比较中，TPPA法与TP-ELISA法两者之间没有显著性差异（P＞0.05），而在TPPA法与TRUST法之间两者的差异性非常显著（P＜0.01），结合检出率可以看出TPPA法的检出率远高于TRUST法，TRUST法与TP-ELISA法之间也有显著性差异（P＜0.05）。具体见表2。

表2：三中检测方法检出率两两比较结果

注：*表示P＜0.05，两组间有显著性差异；**表示P＜0.01，两组间有非常显著性差异。

3讨论

TP-ELISA法的检测原理是在微孔板上预包被梅毒螺旋体基因重组抗原，再加入酶标记的基因重组抗原与待测血清中的梅毒螺旋体抗体特异结合，显色，通过酶标仪检测吸光度，观察显色情况。因为其原理简单操作容易，灵敏度高、特异性强，准确度高，所以非常适用于大规模、大数量的常规筛查。从本研究的结果可以看出TP-ELISA法的阳性检出率并不低，所以很适合用于广泛筛查。赖宇丽^[1]的研究显示TP-ELISA法和TPPA法在检出率上差异无统计学意义，这与本研究的结果一致，可以看出TP-ELISA法有很好的检出率。

TPPA法是用超声裂解的梅毒螺旋体为抗原，致敏红色明胶颗粒与人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体结合，产生肉眼可见红色凝集反应。因其具有敏感性高、特异性强等特点，所以被誉为梅毒诊断的“金标准”^[2]。本研究中TPPA法的检出率是三种方法里最高的，也足以证明其高敏感性和强特异性。但它有一个缺点是检测时间较长，检测成本较大，检测结果受人为因素影响较大，结果判断难以自动化，不适用于大范围的筛选检测。

TRUST法用正常牛心肌的心类脂作为抗原，而不是用螺旋体作为抗原，来测定病人血清中的反应素（非特异性抗体-抗心磷脂抗体）。因反应素在初期梅毒病灶出现后1~2周就可测出，所以常用来检测二期梅毒的患者。一期梅毒大约在2~4周时出现硬下疳，在这个时间段TRUST法检测结果为阴性，直到7~8左右才会由阴性转化为阳性，所以在早期潜伏期、一期以及三期中很容易出现假阳性，这也是其常用来检测二期梅毒的重要原因。本研究中TRUST法的检出率低可能是因为标本中有各期梅毒，而其只对二期梅毒特异性高。叶秀仪的研究结果认为只有通过TPPA法和TP-ELISA法这两种方法的有效性结合起来，才可以有效防止误诊、漏诊,还有良好的重复性的优势，与本研究结果一致^[3]。

以上三种方法各有优缺，合理的运用这三种方法应该可以有效地提高梅毒检测效率，在大批量梅毒检测时，TP-ELISA法的效率远高于其他两种方法，TPPA法可以用于难以确诊的病人或处于潜伏期的病人，TRUST法在不同时期的检出率差别太大，更适用于二期梅毒，当患者患有某些感染、自身免疫系统疾病、结缔组织疾病时常常出现假阳性，影响检验效率。在今后的研究中还应扩大样本量，同时纳入不同地区的受试者，这样的结果会更加客观更加真实，这也是本实验的不足。

综上所述，TP-ELISA法阳性检出率高且操作方便，可作为常规筛选检测；TPPA法检出率高，但是其操作时间较长且成本偏高，适用于TP-ELISA法筛选出阳性标本的进一步检测。TRUST法在TP-ELISA法和TPPA法检测结果均为阳性的情况下可以观察病情的进展。

参考文献

[1]赖宇丽, 杨志鹏, 王禹淇. 酶联免疫吸附试验梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验 甲苯胺红不加热血清学试验三种梅毒检测的方法学比较[J]. 实用医技杂志, 2016, 23(1):68-70.

[2]Cole M J, Perry K R, Parry J V. Comparative evaluation of 15 serological assays for the detection of syphilis infection[J]. European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases, 2007, 26(10):705-713.

[3]叶秀仪. 探讨TPPA法及酶联免疫吸附法应用在梅毒诊断中的有效性[J]. 中国医学工程, 2015(12):86-86.