胶体金与 ELISA法检测乙型肝炎表面抗原的一致性探讨

胶体金与 ELISA法检测乙型肝炎表面抗原的一致性探讨

尹亚牛

大庆市第三医院 黑龙江省 163712

摘要：目的：分析胶体金、酶联免疫（ELISA）法在乙型肝炎表面抗原（HBsAg）检测中的运用价值。方法：将420份来自门诊患者的静脉血标本纳入研究，分离血清后，分别以胶体金法、ELISA法检测。结果：胶体金法检测HBsAg的符合率为93.33%；胶体金法的检测特异度、灵敏度分别为93.99%、83.78%。结论：与HBsAg的ELISA法检测相比，胶体金法的敏感性尚可，具有一定推广价值。

关键词：胶体金法；ELISA；HBsAg

前言：作为典型传染性疾病，乙肝管理始终是我国公共卫生管理的重要内容。目前，我国总人口中的HBsAg阳性者占比已经超出10%^[1]。早期筛查、检测，是遏制HBsAg传播的重要途径。胶体金法、ELISA法，均可为HBsAg的鉴别提供一定支持。为验证上述两方法的价值，本研究针对420份静脉血标本进行分析：

1资料与方法

1.1一般资料

将我院门诊于2018年7月-2019年2月收集的420份静脉血标本纳入研究。每一份标本均采集于1位门诊患者。其中，来自男性患者的标本236份，来自女性患者的标本184份。

1.2方法

所有标本均以胶体金法、ELISA法开展HBsAg检测：（1）标本预处理。以3000r/min速度将门诊患者的静脉血标本离心后，分离出血清标本。置于低温环境下保存，尽量于24h内完成HBsAg检测。（2）胶体金法检测。沿试剂盒所示方向（指引箭头）将试剂条充分置于门诊患者的血清标本内，并确保血清中试剂条的浸润深度未超出试剂条表面标记线的要求。根据试剂条呈现结果确定检验结果。（3）ELISA法检测。常规设置空白对照。于450nm波长范围内，参照试剂盒说明书完成HBsAg检测。

为弱化人为因素带来的影响，两种检测方法均由同一组检测人员完成。此外，实施HBsAg检测期间，检测环境均采用相同质控标准开展检测管理。

1.3统计学方法

以SPSS24.0软件统计。P＜0.05：差异显著。

2结果

2.1检测符合率

以血清标本的ELISA检测结果为金标准，评估胶体金法的检测符合率。胶体金法检测结果证实，该方法对420份标本的HBsAg检测符合率为93.33%。结果如表1所示。

表 1 检测符合率[n/%]

2.2检测价值

以ELISA法为金标准（420份标本中37份阳性，383份阴性），确定胶体金法特异度及灵敏度水平分别为93.99%（360/383）、83.78%（31/37）。

表 2 胶体金法的检测价值[n]

3讨论

随着我国乙肝患者规模的不断扩大，HBsAg检测逐渐成为人们的关注重点^[2]。近年来，随着乙肝宣传教育活动、传染病管理措施的不断实施，人们多已对乙肝这一疾病以及HBsAg检测等知识建立一定认知。结合既往管理经验可知，相对于其他方法而言，早期开展HBsAg检测，更有助于HBsAg阳性者的识别及乙肝发病率的控制。

实验室检查是临床筛查HBsAg阳性者的重要途径。从常用筛查方法来看，其中，国产胶体金法对HBsAg的检测原理为：按照抗原-抗原-抗体-胶体金的流程（夹心法），识别受检者的血清或血浆标本中有无HBsAg形成。这种检验方法的便捷性水平较高。如受检者血清标本中无HBsAg成分，将试剂条一端适当浸润于血清标本中后，胶体金-抗体缺乏反应物，因此，等待一段时间后，试剂条多无明显变化。而当血清标本中含有一定HBsAg时，该成分可迅速与试剂条中的胶体金-抗体发生结合反应，形成一定量复合物，并在层析作用的影响下，推动试剂条向前移动一段距离。在检测过程中，试剂条与血清中HBsAg生成的复合型夹心物，可逐渐出现凝聚作用，并发生显色反应，提示检出阳性。

HBsAg检测中，胶体金方法的应用价值体现为：（1）操作便捷，检测效率较高。随着乙肝患者规模及HBsAg阳性者规模的不断扩大，健康人群面临的乙肝病毒感染风险逐渐升高。在这一背景下，HBsAg检测逐渐成为一项常规检测项目。结合目前各医院HBsAg检测工作量来看，需检测HBsAg的标本量呈逐渐增长趋势。面对日益增加的工作量，如何提高检测效率，逐渐成为医院检验科面临的主要问题。ELISA法作为临床HBsAg检测的金标准，其检测结果可靠性较强。但该方法的检测流程较为复杂，且操作难度较高，该方法对检测人员的检测能力、技能掌握状况等提出了较高的要求。结合当前医院检验科人员构成来看，为应对标本量变化带来的工作压力，各检验科中的低年资检验人员占比逐渐增加。由于这类人员可能面临较高人为误差风险，因此，单纯以ELISA法开展HBsAg检测并不现实。相对于该方法而言，胶体金法则具有良好的操作便捷性特征。获取受检者的血清标本后，检验人员仅需按照胶体金检测试剂盒的要求，将试剂条沿标示方向置于血清标本内即可。除了操作方面的优势外，该检测方法还可于较短时间内为检测人员提供HBsAg检测结果。上述特征高度契合大量标本的HBsAg要求，且可于基层医院中推广。（2）成本低廉，可重复检测。在临床检验中，检验方法的经济性特征，也是影响受检者决策的重要因素。与其他实验室检测方法相比，胶体金法价格低廉。以该方法进行单次HBsAg检测或进行重复检测，均不易增加受检者的经济负担。这一优势有助于提升乙肝易感群体、HBsAg高风险群体对HBsAg检测的接受度。（3）敏感性尚可。随着HBsAg检测压力的增加，扩展HBsAg检测体系，逐渐成为临床乙肝及HBsAg阳性者管理面临的主要要求。从本研究结果来看，胶体金法的灵敏度尚可，为83.78%。基于上述结果，在乙肝早期筛查或大批量标本的健康检查中，可考虑利用胶体金法开展HBsAg检测，以便利用该方法的优势，实现快速筛查、识别HBsAg阳性者的目标，进而为HBsAg阳性者的早期抗病毒治疗提供良好支持。

综上所述，HBsAg检测中，ELISA法、胶体金法均具有一定价值，可考虑将胶体金法作为HBsAg ELISA检测的补充。

参考文献：

[1]王新梅,臧亮,邓雪莲,等.化学发光和酶免2种检测系统检测HBsAg情况分析[J].中国输血杂志,2020,33(03):222-226.

[2]丁川川.胶体金与酶联免疫法检测乙型肝炎表面抗原的效果探讨[J].国际医药卫生导报,2018,24(24):3858-3859.