临床细菌检验中 PCR检验法的准确性研究

临床细菌检验中 PCR检验法的准确性研究

汤东哲

黑龙江省绥化市北林区疾病预防控制中心 152000

【摘要】目的：研究在临床细菌分析中PCR检验法的应用准确性。方法：选取2018年9月至2019年9月收治并确诊的70例细菌性阴道炎患者为研究对象，对所有患者阴道分泌物分别进行细菌培养法检验（参考组）、PCR检验（观察组），对比分析两组患者的检验结果。结果 观察组的检出率显著高于参考组（P＜0.05）。观察组中的链球菌、肠球菌以及戛纳杆菌检的检出率均高于参考组的检出率（P＜0.05）。结论：PCR检验法检出率明显高于细菌培养法，临床意义更高，值得在临床上推广使用。

【关键词】细菌检验；PCR；准确性；检出率

Study on the accuracy of PCR assay in clinical bacterial examination

[Abstract] Objective: To study the application accuracy of PCR assay in clinical bacterial analysis.Methods: A total of 70 patients with bacterial vaginitis admitted and confirmed from September 2018 to September 2019 were selected as study subjects. Bacterial culture test (reference group) and PCR test (observation group) were performed on vaginal secretions of all patients, and the test results of the two groups were compared and analyzed.Results The detection rate in observation group was significantly higher than that in reference group (P < 0.05).The detection rate of streptococcus, enterococcus and Cann bacillus in the observation group was higher than that in the reference group (P < 0.05).Conclusion: The detection rate of PCR test is significantly higher than that of bacterial culture method, which has higher clinical significance and is worthy to be popularized in clinical practice.

【 Key words 】 Bacterial test;PCR;Accuracy;Detection rate

引言

细菌检验为临床检验学中重要组成部分，其检验结果可以为医师诊断疾病提供较为科学可靠的诊断依据，因此需要保证诊断结果的准确性，以便真实反映患者的疾病情况。临床上用于检验细菌的方法较多，其中细菌检验法较早应用于临床，而且较为常用，但是随着医学技术的发展，PCR检验法逐渐运用于临床，该方法具有检出率以及准确率较高的优点，临床应用价值较高。女性阴道细菌检验对保证女性健康有重要意义，阴道细菌感染会诱发阴道炎，若不能及时干预治疗，便会引发阴道感染，严重的状况甚至会导致女性不孕。及时对阴道内细菌状态的检测，依据检测结果采取相应治疗方法，有利于及时改善患者症状。因此为进一步验证PCR的临床优势。本次研究以细菌性阴道炎为例，研究报告如下。

1.资料与方法

1.1一般资料

本次实验研究纳入2018年9月至2019年9月接受阴道细菌检验、初步确诊是细菌性阴道炎的患者，按照随机数字表方法选择70例患者。所有患者均细菌培养法以及PCR检验，其中最大年龄患者为52岁，最小年龄患者为21岁，患者年龄均值为（35.09±2.88）岁。最长病程为3年，最短病程为2个月，患者病程均值为（1.12±0.24）年。本研究已经过本院伦理委员会通过，且入组病例均签署患者知情同意书。

1.2临床纳入与排除标准

纳入标准：临床表现有阴道炎、外阴瘙痒、异味、白带分泌物增多等。

排除标准：月经期患者；近期阴部局部用药者；妊娠期或哺乳期妇女；近两日有性生活者。

1.3方法

阴道分泌物采集：使用一次性医用无菌棉签，插入到阴道后穹窿的部位，通过轻轻旋转来蘸取、并采集到阴道分泌物，放到2ml无菌生理盐水当中，保存。

细菌培养法：以细菌培养法来做检测：首先把一份阴道分泌物标本放在阴道琼脂培养基当中，置于二氧化碳恒温箱做培养，培养时间48h，观察到培养基有菌落出现后，选择半透明状、光滑、灰色和露滴状的菌群做生化鉴定。

PCR检验法：经荧光PCR检验法进行检测，首先进行阴道分泌物生理盐水的离心处理，离心条件是每分钟12000转，持续时间15分钟，舍弃上清液，将碱性裂解液加入到沉淀当中。以上结束后，放到温度为60℃的水浴当中加热15分钟，再以与以上相同的条件做二次离心处理，这一次的持续时间是10分钟，完成离心处理后，取上清液用以制作DNA模板，放到荧光PCR仪当中做循环处理。

1.4观察指标

对两种不同方法检验准确性进行分析、比较。另外统计阴道内各细菌Sp情况

诊断标准：细菌性阴道炎感染患者同健康人群比较，加特纳菌DNA含量显著提高，意为加特纳菌对细菌性阴道炎感染的诊断有很高的特异性。

1.5统计学方法

采用SPSS20.00软件统计处理所得数据，计数资料采用x2检验。p<0.05说明差异有统计学意义。

2.结果

2.1对比分析两组患者的检出率

观察组的阳性检出率（86.25%）显著高于参考组（51.25%），且差异具有统计学意义（P＜0.05）。

表1对比分析两组患者的检出率（n，%）

2.2两种方法检验阴道细菌结果对比

采用PCR检验法对加特纳菌、棒状杆菌、肠球菌的检出率均要比细菌培养发检出率高（P＜0.05），检验值有统计学意义。

表2对比分析两组患者的检出率（n，%）

3.讨论

近些年以来，临床细菌性阴道炎的发生率可见有明显的增长趋势，给广大女性朋友们的日常生活造成巨大影响。该病导致患者有白带异常、外阴瘙痒等症状发生，发生诱因是阴道的内菌群平衡被打破，阴道杆菌数量骤然减少，使得致病菌所占比例提高。对患者阴道细菌做检测，早期诊断症状，对接下来的治疗指导有积极意义。

细菌培养法长时间以来，都是临床用于细菌检验的常规方法，这种方法虽然作为阴道细菌检测的“金标准”，应用广泛。但是其中不乏会因受到来自多方面因素的影响，因检验操作复杂，对细菌培养环境要求较高，所以会加大感染几率，导致最终得到的检验结果有一定误差几率，而且自标本采集再到得到结果报告，需要很长的时间：3~7天左右。

PCR检测方法是近年来新兴的一种检验方法，该法对感染性病原的检测主要包括两个方面：①对每一种病原单个特异基因的检测，能同时检测一种亦或是几种病原体是否存在；②对某一病原的多个基因进行检测，从而减少假阳性几率。PCR检验方法中既融合了RPC的敏感性，又联合了DNA杂交的特异性等优点，在临床上的应用具有检出率高、精准度高等应用优势。本文实验报告指出：在与阴道细菌培养法结果做对比，PCR检验方法的阳性检出率85.2%更高，而且检出加特纳菌、棒状杆菌、肠球菌的阳性率也都要比常规细菌培养法高。

综上所述，在临床细菌检验工作当中，采用PCR检验法能获得更准确的检验结果，阳性检出率高、特异性高。

参考文献

[1]袁征.细菌性阴道炎检验中采取PCR检验法和细菌培养法的临床应用意义[J].当代医学,2019,25(35):34-35.

[2]张婷,徐小婕,李静.阴道细菌检验应用PCR检验法和细菌培养法的临床价值体会[J].临床检验杂志(电子版),2019,8(04):60-61.

[3]王晓红.阴道细菌检验应用PCR检验法和细菌培养法的临床应用价值体会[J].中国实用医药,2018,13(16):196-197.