摘要目的从原发性肝癌（HCC）患者术后的肿瘤组织中提取、培养肿瘤浸润性淋巴细胞（TILs），进一步分选、扩增其CD8阳性亚群（CD8+TILs），并研究其特性。方法标本取自38例肝癌根治术后的肿瘤组织，免疫组织化学染色观察癌巢组织和癌旁组织TILs的分布，通过机械剪碎、混合酶消化和不连续密度梯度离心法分离提取TIL前体细胞。采用重组人白介素2进行激活，抗CD3、抗CD28抗体进行共刺激扩增，用磁珠分选出CD8+TILs，CCK8法观察CD8+TILs对肝癌细胞Hep3B、HepG2生长的影响。结果TILs富集于癌旁组织，12例成功提取TILs，6例培养并实现大量扩增，扩增17~50倍后细胞数为（1.2~2.5）×108个，CD3+细胞比例为（77.53±16.37）%，CD3+CD4+比例为（27.08±21.56）%，CD3+CD8+比例（44.55±12.73）%，细胞活力为（90.5±3.0）%，CD8+TILs对肿瘤细胞系Hep3B、HepG2有较强的生长抑制作用。结论本研究成功建立高效提取、培养CD8+TILs的方法，获得具有高抗肿瘤活性的CD8+TILs，为晚期肝癌等实体瘤的过继免疫治疗提供研究基础。
