QuEChERS-液相色谱 -串联质谱法检测定韭菜中苯醚甲环唑的残留量

QuEChERS-液相色谱 -串联质谱法检测定韭菜中苯醚甲环唑的残留量

俞俊

芜湖市产品质量监督检验所，芜湖 241007

摘要：建立一种快速测定韭菜中苯醚甲环唑残留量的方法，样品用乙腈提取，经过QuEChERS法净化，使用液相串联质谱仪测定韭菜中苯醚甲环唑的浓度。结果表明：乙腈提取后，经过QuEChERS法净化，液相串联质谱仪测定韭菜中的苯醚甲环唑方法标准曲线线性良好，最低检出限为2.2ng/mL，回收率为92.0%～105.3%，RSD值为1.3%～4.7%。该方法操作简便、分析时间短，具有较好的精密度和准确度。

关键词:苯醚甲环唑; QuEChERS法;液相串联质谱

苯醚甲环唑又名恶醚唑，属于三唑类内吸性杀菌剂，主要抑制麦角甾醇的生物合成，破坏细胞膜的结构与功能。由于其安全性高，毒性低，成本少，对农产品如蔬菜和瓜果中多种的真菌性病害有很好的保护和治疗作用^[1]。但人体摄入后，经过长期积累最终会危害身体健康。目前，国内报道的农产品中测定苯醚甲环唑残留量的检测方法主要有气相色谱^[2-3]，气相色谱-质谱联用^[4]，反相高效液相色谱^[5]，液相串联质谱仪法^[6]。运用QuEChERS法检测苯醚甲环唑也有相关报道，但一般与气相色谱或气相色谱-质谱的联用，分析时间长、使成本升高和普及性下降。因此，建立一种运用QuEChERS前处理，液相串联质谱法测定韭菜样品中苯醚甲环唑的残留量。

1材料与方法

1.1材料

韭菜样品采自芜湖市农贸市场。

1.2仪器与试剂

LCMS/MS8040液相串联质谱仪（岛津），色谱柱: C18,2.1mmx100.0mm,2.5μm（PerkinElmer），食品搅拌机(苏泊尔)，FJ200均质机(上海标本)，TG16-WS离心机（长沙湘智），多管旋涡震荡器（QIQIAN），高速冷冻离心机(Tomos)。丙酮、乙酸乙酯、乙腈、正己烷、氯化钠和硫酸镁（国药集团）;N-丙基乙二胺(PSA，山东青云)，苯醚甲环唑标准品(农业部环境保护科研监测所)

1.3样品处理

1.3.1样品预处理

取200g待检测的韭菜样品，在食品粉碎机中匀浆混匀，待测。

1.3.2样品前处理

称取匀浆后的样品10g，置于100mL烧杯中，加入25mL乙腈，丙酮，乙酸乙酯、正己烷用均质器,均质2min，加入1g氯化钠和4g硫酸镁，旋涡振荡1min。4000r·min-1离心5min，取2mL上清液于装有50mgPSA和250mg硫酸镁的2mL离心管中，剧烈振荡1min，4℃10000rmin^-1离心1min，取1mL上清液至试管，待测。

1.4仪器条件

1.4.1色谱条件

色谱柱C18,2.1mmx100.0mm,2.5μm);进样体积5μL;流动相甲醇：水：甲酸（81.0:19.0:0.1,体积比）；流速0.3ml/min.

1.4.2质谱条件

离子化方式电喷雾电离，正离子，毛细管电压4.0kV传输区电压110、离子源温度120℃,去溶剂气温度350℃,去溶剂气流量为600L/h，多反应检测模式（MRM)以保留时间和母离子m/z337以及裂解离子m/z251进行定性分析；以母离子和响应值最高的子离子进行定量分析。定量离子为m/z251。碰撞能量分别为14eV和22eV.

1.5标准曲线

将质量浓度均为100μg/mL的苯醚甲环唑标准贮备液稀释成标准混合液，标准混合溶液的浓度为：5.00ng/mL、10.00ng/mL、25.00ng/mL、50.00ng/mL、100.00ng/mL，在1.4仪器条件下测定，根据定性离子定性，外标峰面积法定量。图1为10.0ng/mL苯醚甲环唑的标准色谱图。

图1 10.0ng/mL苯醚甲环唑的标准色谱图

2结果与分析

2.1样品的前处理条件优化

苯醚甲环唑易溶于有机溶剂如乙腈、丙酮、乙酸乙酯、正己烷。本试验对乙腈、丙酮、乙酸乙酯、正己烷提取韭菜中苯醚甲环唑效果进行了比较。结果显示，乙腈对苯醚甲环唑提取、QuEChERS法净化后直接上机检测的方法回收率和灵敏度最好。故该方法采用乙腈作为提取溶剂。

2.3方法线性范围和检出限

以5.00ng/mL、10.00ng/mL、25.00ng/mL、50.00ng/mL、100.00ng/mL为浓度的苯醚甲环唑标准工作曲线，在上述前处理方法和仪器条件下测试，得出相应的标准工作曲线，标准曲线的回归方程为Y=1.008x-3.134，相关系数r=0.9992。以色谱峰高是基线噪音高度3倍为标准得出检测下限，此方法苯醚甲环唑的检出限为2.2ng/mL。

2.3方法的精确度与精密度

加入高、中、低浓度分别是10μg/kg、50.0μg/kg、100.0μg/kg L三种含量的苯醚甲环唑标准溶液，按上述方法测定，分别平行测定6次，计算回收率在92.0％~105.3％之间，相对标准偏差为1.3%～4.7%。符合方法学要求，按上述方法和步骤进行检测。韭菜的加标回收率92.0%～105.3%，相对标准偏差(RSD)为1.3%～4.7% ，见(表1)。

表1韭菜中苯醚甲环唑的添加回收率与相对标准偏差(n=6)

3小结与讨论

综上所述，苯醚甲环唑质量浓度在5～100ng/mL之间相关系数为0.9992,标准曲线线性良好。韭菜中苯醚甲环唑添加浓度在10～100μg/kg,添加回收率为92.0%～105.3%,RSD值为1.3%～4.7%.该方法测定韭菜中的苯醚甲环唑残留量具有定量准确、重复性好、线性关系良好、分析速度快等特点，是测定韭菜中苯醚甲环唑理想方法。

参考文献

[1]王雯,梁颖，钱建亚等. 液相色谱-质谱联用检测番茄中苯醚甲环唑残留[J].江苏农业学报2011，27（3）：668-671

[2]张春冬，潘晓威，黄勇平. 气相色谱法对辣椒和土壤中苯醚甲环唑的残留测定分析[J].现代农业科技2014（19）：134-136

[3]张雪燕，吴文锐毛佳等. 气相色谱法测定三七中苯醚甲环唑残留量[J].湖南农业大学学报(自然科学版)2010.4，36（2）：229-232

[4]钱宗耀，周晓龙，刘河疆等. 气质联用法测定红枣中苯醚甲环唑残留量[J].现代农药2012，11（3）：37-39

[5]于康平，李楠，李翔宇等. 苯醚甲环唑的高效液相色谱分析[J].广东化工2013，9（40）：166-167

[6] 张新忠，罗逢健，陈宗懋等. 超高效液相色谱串联质谱法测定茶叶、茶汤和土壤中氟环唑、茚虫威和苯醚甲环唑残留[J]. 分析化学( FENXI HUAXUE)研究报告2013.2（41）：215-222

作者简介

俞俊（1981-），女，硕士，工程师，主要从事食品化学检测和分析工作