PCR、抗酸染色在肺结核病理学的诊断分析

PCR、抗酸染色在肺结核病理学的诊断分析

张㼆

厦门市第一医院杏林分院肺科， 361000

【摘要】目的 分析PCR技术、抗酸染色法在肺结核病理学诊断中的应用价值。方法 选取2018年10月-2019年7月本院收治的78例肺结核患者为研究对象，78例患者均进行PCR技术以及抗酸染色法诊断，并观察比较两种检验结果。结果 PCR技术检出74例肺结核患者，检出率为94.87%，抗酸染色法检出51例肺结核患者，检出率为65.34%；同时 PCR技术检出74例患者中，发现65例耐药结核菌感染，抗酸染色法发现22例耐药结核菌感染，两种检验结果比较差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 在肺结核病理学诊断中，PCR技术更优于抗酸染色法，其检检出率高，能有效发现耐药性结核菌感染，对临床治疗具有重要意义。

【关键词】PCR技术；抗酸染色法；肺结核；病理学；耐药结核菌感染；诊断分析

前言

肺结核是一种慢性传染性疾病，主要是由结核分枝杆菌所导致的。肺结核能侵及诸多脏器，特别是肺部，严重影响患者的身体健康及正常生活。肺结核具有较强的传播性，且致残率高等特点，属于我国重点预防治疗性疾病之一。若治疗不及时，可直接导致患者的肺功能下降以及衰退，严重时还会造成呼吸系统损伤，危及患者生命安全。因此，早期诊断及治疗对患者具有重要的意义。为了进一步研究肺结核病理学原理，本次研究以2018年10月-2019年7月我院收治的78例肺结核患者为研究对象，采用PCR技术、抗酸染色法对肺结核病理学诊断进行分析，探讨其诊断价值。现报告如下：

1.资料与方法

1.1一般资料

选取2018年10月-2019年7月本院收治的78例肺结核患者为研究对象，其中，男性患者45例，女性患者33例；年龄19-88岁，平均年龄（45.12±8.62）岁；体重40-69kg，平均体重（56.37±10.19）kg。纳入标准：①患者均符合《肺结核诊断和治疗指南》的相关诊断标准；②患者及其家属对本次研究均知情同意，并在仔细阅读知情同意书后签署；③本次研究已获得本院伦理委员会的审批，并正常开展。排除标准：①伴有心肝肾功能不全的患者；②合并恶性肿瘤的患者；③患有精神疾病或认知障碍的患者；④对本次研究不配合或中途退出的患者。

1.2方法

所有患者均进行PCR技术以及抗酸染色法诊断，所有患者进行手术前的常规纤维支气管镜检查，并通过活检针对病变目标进行穿刺，将标本置于中性福尔马林中固定后行组织病理学检查。分别给予抗酸染色和荧光定量PCR检测

PCR技术：使用武汉百泰基因工程有限公司的试剂盒并按照说明书进行组织DNA的提取。使用实时PCR系统，结核分枝杆菌TB诊断试剂盒，给予基因实时PCR。扩增反应条件为50℃2分钟，95℃3分钟，95℃10秒，60℃1分钟，40个循环。阴性质控品扩增曲线不成S型或Ct值为UNDET；阳性质控品有S型扩增曲线，Ct值≤30，否则此次实验视为无效。如果扩增曲线不呈S型、Ct值为UNDET或者40，则结果为阴性。如果扩增结果37

抗酸染色法：将肺活检组织标本使用中性福尔马林固定，常规组织脱水后进行石蜡包埋和切片，并给予HE染色，光镜观察后进行抗酸染色。石蜡切片常规脱蜡至水洗后，使用石碳酸复红溶液，染色后水洗^[2]。待上述操作完成后实施脱色，使用盐酸酒精，时间为1分钟，最后利用流水将其冲洗。复染选取碱性美兰溶液，时间为30秒，之后用水冲洗，等到玻片干燥后放在油镜下观察

1.3观察指标

观察比较PCR技术以及抗酸染色法检查结果；同时观察记录两种检查方法的耐药结核感染情况，主要包括单耐药、多耐药、原始单耐药以及原始多耐药。

1.4统计学方法

本次研究收集的所有数据处理均采用SPSS 20.0，（%）表示检出率等各项计数资料，采用卡方值检验，两组患者之间比较差异有统计学意义以P<0.05表示。

2. 结果

2.1 PCR技术以及抗酸染色法检出率比较

由表1可知，PCR技术的检出率明显高于抗酸染色法（P<0.05）。

表1 PCR技术以及抗酸染色法检出率比较（n=55）

2.2 PCR技术以及抗酸染色法检出的耐药结核感染比较

由表2可知，PCR技术的单耐药、多耐药、原始单耐药以及原始多耐药检出率高于抗酸染色法（P

<0.05）。

表2 PCR技术以及抗酸染色法检出的耐药结核感染比较

2. 讨论

近年来，肺结核已成为危害人类健康的重大传染病之一，虽然我国针对肺结核已积极采取有效的防治措施，但该疾病的临床发病率仍居高不下。针对肺结核，尽早通过诊断实施有效的治疗对患者的身心健康具有重大意义。目前，肺结核诊断的常用方法为抗酸染色法，但该方法的检验结果极易受人为因素影响，导致阳性检出率低，从而造成漏诊以及误诊的情况发生。近几年来，分子生物学技术的不断发展，使PCR技术被广泛应用于肺结核诊断中，据本次研究表明，PCR技术的检出率明显高于抗酸染色法，同时PCR技术的单耐药、多耐药、原始单耐药以及原始多耐药检出率高于抗酸染色法（P<0.05）；研究结果提示，在肺结核病理学诊断中采用PCR技术更优于抗酸染色法，其能有效发生耐药结核感染，具有较高的检出率。具体分析如下：PCR技术融合了DNA杂交技术、核酸扩增技术以及光谱技术，主要是将目的基因片在数小时内增数百万倍，随后通过一条结核分枝杆菌特异性荧光探针以及一对结核分枝杆菌特异性引物来对目的基因片进行识别，使诊断拥有较高的灵敏度，从而提高检出率。

综上所述，在肺结核的病理学诊断中，采用PCR技术更优于抗酸染色法，PCR技术不仅能有效检出肺结核，还能有效发现患者的耐药结核菌感染，从而为临床监测病情以及调整治疗方案提供可靠的数据信息。

参考文献

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