摘要 地龙作为一种动物药材,有着广泛的用途。本文从地龙药材和饮片的各种鉴别方法、质量标准、质量评价等几方面研究现状进行系统的论述,提出了各方面研究存在的研究重点,为后续地龙相关研究提供参考依据。
关键词:地龙;药材和饮片;鉴别;质量评价
地龙是常用的动物类药材,来源于钜蚓科动物参环毛蚓Pheretima aspergillum(E. Perrier)、通俗环毛蚓Pheretima vulgaris Chen、威廉环毛蚓Pheretima guill elmi(Michaelsen)或栉盲环毛蚓Pheretima pectinifera Michaelsen的干燥体。地龙具有清热定惊,通络,平喘,利尿的功效。用于高热神昏,惊痫抽搐,关节痹痛,肢体麻木,半身不遂,肺热喘咳、水肿尿少[1]。文献报道,目前药材和饮片市场地龙的来源和品种混杂、浑伪和掺假现象较为严重[2]。为确保其安全有效地应用,故有必要对地龙加强真伪鉴别,进行质量控制和评价。在查阅并分析关于地龙的相关文献的基础上,本文就地龙药材和饮片常用鉴别方法的研究现状及其质量评价方面进行综述。
1 性状和显微鉴别
地龙的性状鉴别包括形状、大小、颜色、质地、折断面、气、味等特征等[1],性状和显微特征初步判断其样品的真伪[2]。
2 理化鉴别
2.1 化学反应
最早报道取地龙粉末,通过荧光和显色反应等方法对地龙药材进行质量评价[3,4]。
2.2 薄层色谱法(TLC)
《中国药典》上地龙药材和饮片的鉴别均采用此方法。采用层析,显色,紫外监视等方法,分离样品。本方已成为地龙鉴别最常用,简便,快速的鉴别方法。
2.3 高效液相色谱法(HPLC)
《中国药典》2015版中对地龙指标成分的含量测定没有明确规定,缺乏定量的评价方法[1]。研究发现地龙富含蛋白质,氨基酸,核苷酸,脂类,酶类和多种微量元素[5],而这些活性成分与其抗血栓、抗凝血、降压、增强免疫调节、抗肿瘤[6],可以作为地龙药材和饮片质量评价的指标。如关水清等[7]采用HPLC法同时测定广地龙中五种核苷类成分的含量。王莎莎等[8]采用HPLC法测定地龙药材中次黄嘌呤、肌苷的含量,并按照“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”软件建立地龙药材的HPLC指纹图谱并进行相似度评价,为提高地龙药材的质量标准提供一定参考。
2.4 DNA条形码技术
DNA条形码技术在PCR和DNA测序基础上,建立物种DNA条形码的一种技术,其在中药尤其是动物药的鉴别中应用较多[9],用DNA条形码技术可以准确鉴别地龙及其混淆品[10]。吕国庆[11]等对不同来源地龙中COI基因和16S rRNA 基因序列进行PCR扩增、测序及数据分析,建立了地龙的条形码。孙洁[12]等采用DNA条形码技术,对市售地龙饮片进行鉴别,为地龙饮片的质量监控和临床用药安全提供实验依据。
2.5 蛋白质电泳法
该方法利用聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS - PAGE)技术,对不同来源地龙及其炮制品的蛋白质差异进行比较研究,这种方法为地龙药材和饮片的鉴别提供准确,有效的参考[13]。
2.6 生物活性检测方法
鉴于2015年版药典上评价地龙药材和饮片质量的方法针对性不强,对地龙的生物活性成分没有质控项的质量问题,研究人员[14]报道与地龙活血化淤功能相关的生物活性检测方法,通过琼脂糖纤维蛋白平板法测定地龙药材的蚓激酶生物活性,建立成熟可行的生物活性测定质量控制方法。
3 地龙药材和饮片质量控制和评价现状
药材和饮片的质量直接影响临床治疗和用药安全。近年来,随着药品市场监管力度的不断增强,我国中药材及饮片的质量不断提升,但还是存在一些问题。如地龙饮片杂非药用部位等杂质超标问题严重,未严格按照标准除去地龙体内的内脏 、泥沙等异物;杂质 、总灰分 、酸不溶性灰分和水溶性浸出物不合格[15,16,17]。此外,2018年来公布[18]的中药材质量分析结果显示地龙等饮片普遍存在重金属超标和总灰分不符、二氧化硫残留量、水分含量和农药残留量超标等问题。
4 结论与展望
地龙作为我国传统中药材,其鉴别方法,质量控制,质量评价等方面的研究也取得了一定的进展。今后的研究需要以专属性强的有效成分作为指标,采用TLC、HPLC、DNA条形码技术等检测手段,建立地龙药材和饮片质量评价体系。应用科学方法提供的客观数据,达到地龙在临床治疗领域中发挥更重要的药效性的目的。
参考文献:
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