双歧杆菌V9发酵液功能性成分研究

双歧杆菌 V9发酵液功能性成分研究

李磊 李翠平 孙洁宇 韩毅峰 闫继彪

内蒙古普泽生物制品有限责任公司 内蒙古 呼和浩特 010080 摘要：目的：研究双歧杆菌 V9发酵液的营养成分，为益生菌资源的开发和利用提供理论依据。方法：分离纯化后的双歧杆菌 V9进行发酵研究，并用高效液相色谱（ HPLC）法测定发酵液中有机酸、氨基酸和维生素的含量。结果：双歧杆菌 V9发酵液有机酸丰富，富含多种氨基酸和维生素。结论：双歧杆菌 V9发酵液富含多种营养物质，适宜大量开发和生产。

关键词：发酵液；有机酸；氨基酸；维生素

双歧杆菌作为有益于人体健康的益生菌，渐渐成为微生态制剂研究的一大热点趋势，且广泛应用于食品、畜禽养殖、医疗保健和基因工程等领域^[1]。双歧杆菌还具有降低胆固醇和血脂的功能，主要的作用机制包括共沉淀作用、吸附结合作用以及抑制肠道中胆酸的重新吸收等^[5]。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

双歧杆菌V9菌株由内蒙古普泽生物制品有限责任公司提供，本试验所用试剂部分为分析纯，部分离密度发酵所用原料为食品级。测定主要依据国标，试剂和试剂的配制均由内蒙古普泽生物制品有限责任公司提供。

1.2 实验方法

称取5 g发酵液（精确至0.01 g）均匀试样，放入25 mL容量瓶中，加水至刻度经0.45 pm水相滤膜过滤，注入高效液相色谱仪分析，以保留时间定性，外标法定量，得到峰及峰面积之后，根据标准曲线得到发酵液中有机酸的浓度。

2 结果与分析

2.1 发酵液有机酸含量分析

色谱图如图1所示，从左到右依次为标准有机酸出峰顺序，分别为，甲酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸、丙酸和丁酸。样品的浓度如表1所示，其中乙酸的含量最高，其次为甲酸和乳酸。采用益生菌双歧杆菌V9作为发酵剂制作的产品，产生的有机酸可以在提升胃肠道免疫功能、抑制病原菌生长繁殖、改善消化功能、降低血浆胆固醇浓度乃至抑制肿瘤发生等方面起到重要作用。

图1 发酵液有机酸色谱图

表1 发酵液有机酸回归方程、相关系数R²和样品含量

2.2 发酵液氨基酸含量分析

游离氨基酸是既含有氨基（-NH2）又含有羧基（-COOH）的一类有机化合物，是重要的生物活性物质。游离氨基酸可为人体活动提供能量，对合成蛋白质起着至关重要的作用。发酵液中含有丰富的游离氨基酸，为人体提供必需和非必需氨基酸，通过测定其含量可以为人们的日常饮食提供数据依据。结果表明（表1），双歧杆菌V9发酵液中氨基酸种类丰富，多达16种，且含量丰富，1 L发酵液中氨基酸总量达到4.05 g/100；超过0.2g/100的氨基酸达到9种。其中含量最高的氨基酸为谷氨酸，可以参与人体脑内蛋白质和糖类代谢，促进发生氧化，在人体中可以与氨结合生成谷酰胺，从而降低血氨，

表1 双歧杆菌V9发酵液中氨基酸含量（含量由高到低）

2.3 发酵液维生素含量分析

VB₅（泛酸）是人体脂肪酸合成类固醇所必需的物质，还可减轻抗生素等药物引起的毒副作用，参与多种营养成分的吸收和利用。泛酸也是植物乳杆菌生长所必需的营养素，在一定控制条件下，将植物乳杆菌接种到含有发酵液的培养液中，测定其吸光值，并根据标准曲线计算出泛酸的含量。

表2 双歧杆菌V9发酵液中维生素的含量

3 结论

双歧杆菌V9发酵液的营养成分，如有机酸、氨基酸还是维生素含量丰富，可以扩大生产进行制备生产日用品、调味品、食品添加剂及饲料添加剂等。从生产规模、产品周期和产生的经济效益角度分析，发酵液具有一定的发展前景。此外，再接下来生产的过程中，可向发酵液投入一定量的微量元素，并调节加入时间和加入量，具有更好的功能性，并加以市场化。

参考文献：

2. 陈霞. 具有益生功能的Bifidobacterium animalis subsp.lactisV9 的安全性评估,生理功效及其全基因组学研究[D]. 内蒙古农业大学, 2010.

3. Ma C , Huo D , You Z , et al. Differential pattern of indigenous microbiome responses to probiotic Bifidobacterium lactis V9 consumption across subjects[J]. Food Research International, 2020, 136:109496.