体液和细胞免疫检测对脓毒症的诊断分析

体液和细胞免疫检测对脓毒症的诊断分析

姚庆利

吉林大学基础医学院 吉林 长春 130021

【摘要】目的 研究体液和细胞免疫检测用于脓毒症诊断上的临床价值。方法 选取2018年5月至2020年5月于我院治疗的50例脓毒症患者，根据病情差异将其分为脓毒症组（n=32）、脓毒症休克组（n=18），并选取同期于我院接受健康检查的50例健康人作为对照组。三组研究对象均接受体液和细胞免疫检测，对比三组的检测结果。结果 脓毒症组与脓毒症休克组患者的IgA、IgG、IgM水平均显著低于对照组，差异显著；脓毒症休克组的CD4CD25Treg显著高于脓毒症组和对照组，CD3、CD4、CD8均显著低于脓毒症组和对照组，脓毒症组患者的CD4/CD8显著低于对照组和脓毒症休克组，差异显著。结论 在脓毒症的临床诊断上，运用体液和细胞免疫检测可反映出脓毒症患者的病情严重程度，在评估预后上有积极意义，值得推广。

【关键词】体液；细胞免疫检测；脓毒症；诊断价值

脓毒症为临床常见疾病之一,发生发展的主要原因在于机体免疫功能紊乱,主要死因为多器官障碍综合征,据统计其死亡率约为 30%～50%。 适应性与固有免疫反应在促炎性反应中均有所参与,CARS 期宿主会将炎性介质与体液因子释放出来,影响血管渗透性与张力后诱发微循环障碍,导致促炎/抗炎反应动态失衡,此为脓毒症向严重脓毒症、多器官功能不全及脓毒症休克等严重后果进展的主要原因之一。脓毒症是因感染引起的全身炎症反应综合征，可累及多个脏器器官，严重情况下会引发脏器功能损害或脏器功能衰竭。关于脓毒症的具体发病机制，目前临床上尚无统一的定论，普遍认为是疾病发生发展过程中的炎症反应过度所引发的连锁反应。虽然关于脓毒症治疗的研究日益深入，治疗有效率有所提高，但致死率依然居高不下^[1-2]。制定治疗方案的前提是有效的诊断，而免疫功能紊乱是脓毒症发生发展的一个主要因素。本研究旨在深入研究体液检测和细胞免疫检测在脓毒症临床诊断上的应用价值，详述如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取的研究对象是50例脓毒症患者和50例健康人，纳入时间段是2018年5月至2020年5月。50例健康人为对照组，其中男27例，女23例；年龄42~76（58.94±3.28）岁。50例脓毒症患者根据病情的不同将其分为脓毒症组（n=32）、脓毒症休克组（n=18）。脓毒症组中：男19例，女13例；年龄40~75（58.45±3.17）岁。脓毒症休克组中：男11例，女7例；年龄41~77（58.72±3.28）岁。通过对比三组研究对象的年龄和性别，发现P均大于0.05，这说明是存在可比性的。

1.2研究方法

对照组的健康人常规收集静脉血进行免疫检测，脓毒症患者和脓毒症休克患者均在发病后采集4ml外周静脉血，并添加20U/ml肝素抗凝。使用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞悬液，检测T细胞亚群，检测方法为间接免疫荧光染色法。取出制备好的淋巴细胞悬液，共100μL，并按照1:100的比例进行稀释，并加入抗CD3、CD4、CD8单克隆抗体，而后放置在室温下孵育，孵育时间为半小时。加入1:200稀释的100μL二抗，放置在室温下孵育，孵育半小时，添加2mlPBS液进行检测。使用流式细胞仪进行检测，每份标本检测1万个细胞，并在计算机系统中输入检测数据，而后使用软件对数据进行处理，输出CD3、CD4、CD8、CD4/CD8数据结果。测定IgA、IgM、IgG，使用免疫比浊法。

1.3观察指标

（1）对脓毒症患者、脓毒症休克患者、对照组健康人的体液免疫指标进行测定，并将三组的IgA、IgM、IgG测定结果进行组间统计学处理。

（2）对脓毒症患者、脓毒症休克患者、对照组健康人的细胞免疫指标进行测定，并将三组的CD4CD25Treg、CD3、CD4、CD8、CD4/CD8水平的测定结果进行组间统计学处理。

1.4统计学处理

数据统计时使用的软件是SPSS25.0，研究过程中涉及到的计量和计数资料表示方法分别是n/%、 ±s,检验方法分别是卡方、t，统计学结果P＜0.05则说明存在显著差异。

2结果

2.1对比脓毒症组、脓毒症休克组、对照组的体液免疫水平

脓毒症组与脓毒症休克组患者的IgA、IgG、IgM水平均显著低于对照组，差异显著（P＜0.05），见表1。

表1脓毒症组、脓毒症休克组、对照组的体液免疫水平对比（ ±s）

2.2对比脓毒症组、脓毒症休克组、对照组的细胞免疫水平

脓毒症休克组的CD4CD25Treg显著高于脓毒症组和对照组，CD3、CD4、CD8均显著低于脓毒症组和对照组，脓毒症组患者的CD4/CD8显著低于对照组和脓毒症休克组，差异显著（P＜0.05），见表2。

表2脓毒症组、脓毒症休克组、对照组的细胞免疫水平对比（ ±s）

3讨论

脓毒症是临床上常见的危重症，发病机制复杂，感染、炎症、凝血、免疫、组织损伤均有可能引发脓毒症，而及早诊断、及早干预，是改善预后的关键。脓毒症进展后机体表现为免疫激活，随后转变为免疫抑制，也可能保持免疫紊乱的状态^[3-4]。本研究显示，CD4CD25Treg作为主要的免疫抑制细胞，参与了多种免疫调节机制，其作用是对细胞免疫形成抑制，以形成天然免疫。本研究结果显示，脓毒症休克组的CD4CD25Treg较脓毒症患者和健康人比相对较高，CD3、CD4、CD8、CD4/CD8更低，这说明免疫因子可反映出脓毒症患者病情的严重程度，以此预测预后。此外，脓毒症组与脓毒症休克组患者的IgA、IgG、IgM水平较健康人相比相对较低，这说明预后不良的主要原因是严重感染者抗体滴度下降。由此可见体液免疫的变化程度与预后之间存在一定相关性^[5]。

CD4CD25Treg 为人类主要免疫抑制细胞，在多种免疫调节机制中发挥参与作用。 研究表明在脓毒症患者免疫调节机制中 CD4CD25Treg 主要作用为抑制细胞免疫，可对机体获得性与天然免疫产生影响。脓毒症患者机体主要为 Th2 型免疫反应，Th2 型细胞因子产生量增加后 Th1 型会明显减少，导致细胞免疫功能受损明显。诸多研究表明 Treg 细胞水平密切关联于脓毒症的发生发展，机体一旦患上脓毒症 Treg 水平便会大幅度上升，而CD4CD25Treg 水平多在因脓毒症致死患者中上升，说明该免疫因子在一定程度上能够将脓毒症患者病情进展严重程度反映出来，便于临床据此对预后进行预测。

在机体免疫细胞中 T 细胞为功能最强与数量最多的功能细胞，其可抗肿瘤与感染，成熟 T 细胞主要包括2 个亚群，分别为 CD4、CD8，前者主要在辅助 T 细胞上表达，对抗原信号转导予以识别;后者主要在抑制性 T细胞上表达，可杀伤癌细胞与被感染细胞。 二者相互协调，维持机体免疫功能平衡。此外 CD3 细胞亚群亦可反映机体免疫功能状态。该组研究结果表明脓毒症休克组 CD3 水平明显低于脓毒症组与健康组(P<0.05);脓毒症组与休克组CD4水平均低于健康组(P<0.05)，休克组 CD8 低于健康组与脓毒症组(P<0.05)，脓毒症组 CD4/CD8 低于健康组与休克组(P<0.05)。 说明脓毒症细胞早期免疫紊乱主要对 CD4细胞产生影响，并未影响 CD8 细胞;而病情越严重 CD8水平越低，故健康组 CD4/CD8 为(1.93±0.12)，休克组为(1.95±0.04)(P>0.05)。

综上所述，运用体液检测和细胞免疫检测能够反映出脓毒症患者的病情严重程度，同时也可用于预后评估，故值得推广。

参考文献：

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