糖足促愈剂治疗糖尿病足大鼠溃疡的实验研究

糖足促愈剂治疗糖尿病足大鼠溃疡的实验研究

于文慧 徐恒 *

黑龙江中医药大学附属第一医院 黑龙江哈尔滨 150040 黑龙江省医院 黑龙江哈尔滨 150001

摘要　目的:观察糖足促愈剂对糖尿病足大鼠溃疡的作用。方法: 80只大鼠造模成功后，中药组局部外用中药糖足促愈剂，空白组外用生理盐水，对照组外用贝复剂，采集标本及血样，检测EGF。结果: 糖足促愈剂能有效改善溃疡创面，提高EGF,治疗效果优于其他对照组。结论:糖足促愈剂对糖尿病足大鼠溃疡有显著治疗作用。

[关键词]:糖足促愈剂;糖尿病足;溃疡；实验

糖尿病足溃疡，愈合时间比正常人长，且容易进展为难以愈合的慢性创面，发病率与致残率均日渐增多,是医学界困扰临床医生的难题之一。本课题在建立糖尿病足溃疡模型的基础上,应用糖足促愈剂进行治疗，结合实验研究结果,探讨中药治疗糖尿病足溃疡的新思路。

一、材料

1　实验动物 雄性Wistar大鼠 ,（0.2±0. 05) kg,由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。

2 试剂 大鼠表皮生长因子（EGF）北京北免东雅生物技术研究所提供。

3 实验药物 链脲佐菌素溶液　北京化学试剂公司产品。贝复剂（外用重组牛碱性成纤维细胞生长因子）：珠海亿胜生物制药有限公

司。糖足促愈剂(大黄、三七、地榆、老鹳草、刘寄奴组成) ，由黑龙江中医药大学制剂室制作

4 仪器设备752Ｃ紫外可见分光光度计(上海第三分析仪器厂) ,Qwin550CW图像分析系统(德国Leica公司).JEM-1220型透射电镜。

二、方法

1造模 雄性Wistar大鼠80只，空腹腹腔注射链脲佐菌素溶液(浓度为50 mg/kg)1次，1周后测外周空腹血糖≥16.7 mmol/L，在大鼠的双后足背部做一3 mm×7 mm的全层矩形皮肤缺损，即为足部溃疡造模成功。

2 分组及治疗方法 造模成功后随机分空白组、糖足促愈剂组、贝复剂治疗组。空白对照组局部外用盐水，贝复剂组 局部外喷贝复剂，中药治疗组：局部进行中药糖足促愈剂治疗。

3 指标检测及取血方法　治疗后第0，7，10天经内眦静脉取外周血1.5 mL，进行ELISA检测EGF水平。

4统计学处理　数据采用SPSS 17.0统计软件包进行统计学分析，所得数据用 ±s表示，组间比较进行t检验。以P＜0.05为差异具有统计学意义。

三、结果

血清检测 血清EGF浓度呈抛物线变化，达到峰值后降低，但仍高于正常水平。血清EGF治疗7天后，中药治疗组血清EGF浓度达到峰值，达到峰值的时间提前，浓度明显高于空白组、贝复剂组（P<0.01）。治疗10天后，中药治疗组血清EGF浓度开始下降，但仍高于空白组、贝复剂组（P<0.01）。

见表1。

表1治疗前后血清EGF浓度变化（pg/ml）

与空白组比较： P<0.01，与贝复剂组比较^△P<0.01。

四、讨论

糖尿病溃疡的形成原因是因为局部组织缺血、缺氧和感染三种因素共同作用的结果^[1]。创伤修复是一个很复杂的生物学过程，创伤部位的多样性和合成活性由各种生长因子调节^[2]。在形成血管组织中，创伤诱导血液凝集，血小板失去颗粒，释放PDGF、EGF等生长因子，起动修复的过程^[3]。生长因子在创伤修复的一系列过程中起着关键作用，对于炎性细胞、成纤维细胞、表皮细胞、血管内皮细胞有趋化作用^[4]，使其向创伤部位移动，分裂增生。慢性皮肤溃疡，难以治愈的重要因素是由于创面内源性生长因子含量缺乏或其受体活性呈下调状态，创面局部的生长因子来源有两个，一是血源，一是局部组织的细胞分泌^[5]。糖足促愈剂就是通过激活内源性生长因子活性或上调生长因子表达，促进溃疡愈合的。糖足促愈剂是大黄、三七、地榆、老鹳草、刘寄奴组成。方中大黄气味重浊，直降下行，号为“将军”，因其苦寒之性，清热解毒之功显，外用能清火消肿，凉血解毒，治热毒痈肿疔疮，烧烫伤。方中用量亦重，既清热解毒，又消肿活血，是为君药。地榆苦寒，能泻火解毒，又味酸涩，可敛疮。既能清降，又能收涩，且清不虑其过泄,涩亦不虑其过滞，为外科治疗血热盛、火毒为患之疮疡肿毒、烫伤诸症所常用。在方中助君药清热解毒消肿之力，并可敛疮生肌，以为臣。三七既能止血，又能散瘀，具有止血不留瘀，散血不伤正之特点，为血证之良药，其瘀活血化瘀之功又可消肿定痛，为外科常用药。虽其性温，但在大量苦寒之性的大黄、地榆的配伍下，其温性减，而行血散瘀之功存，与地榆相伍，散瘀消肿，以助君药之力。方中又佐以老鹳草、刘寄奴。老鹳草苦辛之性，能透邪外出，具有清热解毒之功。刘寄奴其味苦，性温，揉杂辛香之气，苦能降下，辛温通行，故能主破血下脓，两药相配，清热解毒，破血散瘀，以助君臣。诸药合用，辛苦偏凉，共奏清热解毒，活血散瘀通经、消肿生肌敛疮之功。

本研究通过检查治疗前后血浆EGF水平，发现本方法能促进创伤组织中大量细胞出现高强度的增殖及血管内皮因子的高表达，能够针对病因，改善缺氧，控制感染，增加供血，提高临床疗效。

参考文献

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[3]潘长玉, 高妍, 袁申元, 等. 2型糖尿病下肢血管病变发生率及相关因素调查[J]. 中国糖尿病杂志, 2001, 9(6): 323−326.

[4] Alsheikh-Ali AA,Kitsions GD,Balk EM, et al. The vulnerable atherosclerotic plaque:scope of the literature[J].Ann Intern Med,2010,153:387-395.

[5] Canani LH, Copstein E, Pecis M, et al. Cardiovascular autonomic neuropathy in type 2 diabetes mellitus patients with peripheral artery disease[J]. Diabetol Metab Syndr, 2013, 5(1): 54.

项目名称：黑龙江中医药科技创新项目 ZHY19-035

通讯作者：简介姓名：徐恒 科室：血管外科; 职称： 副主任医师 性别：男 、出生年月（具体到月份）1977.8： 民族：汉 籍贯：黑龙江哈尔滨 学历： 博士 研究方向：血管外科