3704例泌尿生殖道标本支原体检出率与耐药性分析

王秀菊 赵水娣

南京金域医学检验所有限公司 江苏 南京 210042

[摘要]目的 分析泌尿生殖道标本解脲脲原体(UU)和人型支原体(MH）的感染状况与药物的耐药性。方法 收集3704例泌尿生殖道支原体培养的标本，分析支原体感染的阳性率及药敏的耐药情况。结果 3704例标本中支原体感染阳性2313例（62.45%），其中单纯UU生长1607例（69.48%），单纯MH生长81例（3.50%），UU和MH混合生长625例（27.02%），女性感染率（58.72%）明显高于男性（3.73%）。药敏试验结果统计显示，单纯UU生长的，仅对环丙沙星表现较高的耐药率，其次为司帕沙星；生长MH及UU+MH的，喹诺酮类药物（环丙沙星、司帕沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星）及大环内酯类药物（罗红霉素、红霉素）均表现出较高的耐药率。结论 泌尿生殖道支原标本培养女性感染率较高，UU感染率明显高于MH及UU+MH混合生长的标本；单纯UU感染抗生素的耐药率明显低于单纯MH及UU+MH混合感染的。

[关键词] 泌尿生殖道 支原体感染 解脲脲原体 人型支原体 耐药率

Detection rate and drug resistance of mycoplasma in 3704 urogenital tract specimens

[Abstract] Objective The infection status and drug resistance of ureaplasma urealyticum (UU) and mycoplasma humanum (MH) in urogenital specimens were analyzed. Methods 3704 samples of mycoplasma culture of urogenital tract were collected and the positive rate of mycoplasma infection and drug resistance were analyzed. Results Among the 3704 samples, 2313 (62.45%) were positive for mycoplasma infection, among which 1607 (69.48%) were pure UU growth, 81 (3.50%) were pure MH growth, and 625 (27.02%) were mixed UU and MH growth. The infection rate among women (58.72%) was significantly higher than that among men (3.73%). The results of drug sensitivity test showed that the drug resistance rate to ciprofloxacin was higher only for UU growth alone, followed by sparfloxacin. Quinolones (ciprofloxacin, starfloxacin, levofloxacin, ofloxacin) and macrolides (roxithromycin, erythromycin) showed higher drug resistance to MH and UU+MH. Conclusion The infection rate of UU was higher than that of MH and UU+MH. The antibiotic resistance rate of UU infection was significantly lower than that of MH and UU+MH.

[Key words]: Mycoplasma urogenital tract infection ;Ureaplasma urealyticum; Mycoplasma humanum; Drug resistance rate.

支原体(Mycoplasma) 是一类缺乏细胞壁，呈现高度多形态性，能在无生命的培养基中生长繁殖的最小的原核细胞型微生物^[1]。解脲脲原体（Ureaplasma urealyticum，UU）寄居于人泌尿生殖道，主要传播途径为性传播和母婴传播，所引起的疾病最常见的是非淋菌性尿道炎，人型支原体（Mycoplasma hominis，MH）主要寄居于生殖道，通过性接触传播，可引起盆腔炎、输卵管炎、产后热、阴道炎与宫颈炎、肾盂肾炎等

^[2]。现分析本地区支原体感染情况及耐药率，寻找UU感染和MH感染结果的相关性，为临床正确并合理用药提供依据，减缓耐药菌株的产生。本研究将南京金域医学检验所收集的3671例泌尿生殖道标本进行支原体培养鉴定及药物敏感试验，现报道如下。

1资料与方法

1.1标本来源

收集2019年3月至2020年3月3704例泌尿生殖道患者的宫颈、阴道分泌物、前列腺液等标本。年龄3-79岁，其中男性326例，女性3378例。

1.2采集方法

治疗前或停药一周后采集标本，无菌操作，拭子不宜干燥。男性患者：用男性无菌拭子由前尿道1～2cm处取

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作者单位：210042 南京金域医学检验所微生物实验室

通讯作者：赵水娣，

Email：125107899@qq.com

尿道分泌物，根据病情需要，也可取前列腺按摩液、精液。女性患者：采集宫颈分泌物，标本采集时应先擦去宫颈口多余粘液，再用另一拭子在宫颈管内1～2cm处取宫颈分泌物。取材时要在宫颈内旋转并至少停留20秒，以便获得较多的细胞。容器在转运过程中密闭、样本采集后需及时冷藏，不可冷冻。

1.3试剂

1.3.1 试剂 采用珠海迪尔有限公司生产的支原体鉴定、药敏试剂盒。

1.3.2 药敏试验所用药物 四环素类：四环素（TET）、强力霉素（DOX）、美满霉素（MIN）；大环内脂类：交沙霉素（JOS）、罗红霉素（ROX）、克拉霉素（CLA）、阿奇霉素（AZI），红霉素（ERY）。喹诺酮类：氧氟沙星（OFL）、司帕沙星（SPA）、左氧氟沙星（LEV）、环丙沙星（CIP）。

1.4检测方法及结果判定

1.4.1试验步骤

取培养基试剂盒复温至室温、编号，于阴性对照孔加入100μL支原体培养基，然后将已采样的拭子置入培养基内，搅动数次后将拭子于瓶壁上挤压其中的液体，取出拭子并盖上瓶塞，将已接种的培养基按100μL/ 孔的接种量接入检测板除对照孔以外的29个孔中，然后于各检测孔滴入 1滴液体石蜡油，最后将培养基检测板置于35℃的恒温培养箱中培养，于24h和48h对解脲脲原体和人型支原体分别观察颜色变化并记录结果。操作判读过程严格按照试剂盒说明书进行。

1.4.2判断标准

阴性对照孔为黄色，阳性对照孔为红色时再判读其他结果。通过观察接种后培养基的颜色判断有无支原体感染，红色为阳性，黄色为阴性，结果可分为UU感染，MH感染，UU+MH双感染。药敏结果判断，每种抗生素有高、低两种浓度，高、低两种浓度孔均为红色时判为耐药（R）。

2结果

2.1支原体培养结果

表1 3704例支原体感染率[n(%)]

从表1可以看出，3704例标本中，支原体感染者2313例，总感染率为62.45%。 其中男性138例，感染率为3.73%，女性2175例，感染率为58.72%，女性感染率明显高于男性（P<0.05）。UU 感染阳性率 43.39%，MH感染阳性率2.19%，UU+MH混合感染阳性率16.87%。

表2 2313例支原体培养阳性标本药敏结果（%）

从表2可以看出，单纯UU感染的，CIP的耐药率最高（87.12%）,其次为SPA（36.22%）；单纯MH的，四环素类药物（TET、DOX、MIN）和JOS的敏感性较高，SPA差别不大（37.40%）,其他药物耐药率超过45%；UU+MH混合感染的，依旧四环素类药物和JOS药物敏感性高，喹诺酮类药物(OFL、LEV、SPA)耐药率超过70%，大环内酯类其他药物(ERY、ROX、AZI、CLA)耐药率已达到90%以上。

3讨论

支原体对不利的环境极其敏感，尤其是干燥和高温。应尽可能床边接种并选择合适的运送和(或)生长培养基，大多数通用运送培养基含有抑制剂，防止非无菌部位正常菌群中细菌和真菌的过度生长^[3]。本实验室系采用Amies转运培养基（含活性炭）运送支原体标本。支原体在此培养基中放置室温可保存8小时。在4℃条件下可保存24小时。

支原体可寄居于人的生殖道，是泌尿生殖道感染的常见病原之一^［4,5］，近年来由于耐药日趋严重^［6］。从本研究发现泌尿生殖道支原体感染仍然以女性为主，感染的支原体又以解脲支原体为主。其阳性率与大型三甲医院^[7]研究结果无明显差异。对于支原体感染，临床检验治疗仍然以大环内酯类为主，本研究表明:单纯解脲支原体感染喹诺酮类总体耐药率较高，不再适合经验用药。但大环内酯类、四环素类耐药率都很低，可以作为支原体感染的经验用药。单纯人型支原体感染，目前检出率不是很高，耐药率也不高。但人型支原体和解脲支原体常常被同时被检出（阳性率达16.87%），且耐药率高。除了TET、JOS、DOX、MIN其他药物耐药率均已超过70%，超过了警戒值，不再适合支原体经验用药。说明由于抗菌药物的广泛应用，支原体对临床常用的抗菌药物产生了不同程度的耐药性，因此，支原体培养结果与药敏实验的研究对临床合理用药具有一定的指导作用。

[参考文献]

2. 张凤民,肖纯凌.医学微生物学.第3版.北京大学医学出版社,2013

3. 倪宇星,尚红.临床微生物学检验.第5版.北京:人民卫生出版社,2014.

4. 王辉,马筱玲等译.临床微生物手册.第11版.北京:中华医学电子音像出版社,2017.

5. Yoon JW,Yoon CS,Lim HW,et al.Control of autoimmune diabetes in NOD mice by GAD expression or suppression in β cells［J］.Science,1999,284( 5417) :1183-1187.

6. 李玲.糖尿病自身抗体测定在糖尿病诊断分型及治疗方面的应用［J］.中国保健营养，2014( 1) : 555－556.

7. Chimienti F,Devergnas S,Favier A,et al Identification and cloning of a beta-cell-specific zinc transporter,ZnT-8,localized into insulin secretory granules[J].Diabete,2004,53（9）:2330－ 2337

8. 陈潇楷 钟月春 1780 例泌尿生殖道标本支原体培养与药敏结果分析[J].中国当代医药，2019,26(3):158-160.