食品卫生微生物学检测菌落总数的测定方案探讨

食品卫生微生物学检测菌落总数的测定方案探讨

袁帅

黑龙江省鹤岗市工农区卫生监督和健康服务中心 黑龙江 鹤岗 154101

【摘要】目的 研究食品卫生微生物学检测菌落总数的测定方案。方法：数据取自2019年5月-2020年5月疾病预防控制中心抽取的100份食品样品，均行菌落总数试片、平板菌落计数及TTC培养基法检测，分析3种方式的最终检测结果。结果：菌落总数测试片的合格率为90.00%，不合格率为10.00%；平板菌落计数的合格率为91%，不合格率为9.00%；TTC培养基的合格率为92.00%，不合格率为8.00%，3种检测方式的合格率比较无差异，P>0.05。结论：菌落总数试片、平板菌落计数及TTC培养基法用于食品卫生微生物学中，测定菌落总数的效果相当，检测时需结合实际合理选择方案、可保证人们食品卫生，效果较理想。

【关键词】食品卫生；微生物学检测；菌落总数；测定方案

近年来，随着人们生活水平提高，人们对食品安全问题愈加重视，国家相关部门也对相关监管加强力度、利于为食品安全提供可靠保障，目前检测食品是否合格的重要途径为检测食品中微生物菌落总数，最终检测结果与食品安全成正比^[1]。本文分析食品卫生微生物学检测菌落总数的测定方案，汇总：

1 资料和方法

1. 1. 基线资料

回顾性研究数据，样本采集2019年5月-2020年5月疾病预防控制中心抽取的100份食品样品，均有疾控中心管辖区域的食品加工厂提供数据。

1. 2. 检测方法

①菌落总数测试片检测：为3M petrifilm TM细菌总数测试片，厂家为美国3M公司，将提前准备的测试片放在水平台面，将纸片上所附着薄膜揭开，具体制备、稀释方式与平板菌落计数法呈一致性，然后利用无菌吸管吸出1ml样品液，将其垂直滴在测试片的中央，借助上层膜将其盖住，利用圆形培养膜完全覆盖混匀样品液，压板进行压盖处理，时间>1min，直到培养基完全凝固即可。

②平板菌落计数检测：培养基由北京陆桥计数有限责任公司提供，具体以国家GB4789.2-2010标准为基点作为检测标准，无菌环境下，取出25g样品，将225ml生理盐水倒入无菌锥形瓶，其中也放入取出的样品，轻微摇晃均匀，按照1：10比例，利用无菌吸管吸出1ml混合液，沿着管壁将混合液缓慢注入到无菌试管、对试管进行轻微摇晃，继而获得1:100样品液，制备1:1000样品液、1:10000样品液的方式与上述流程保持一致性，以样品液实际污染程度为基点，对稀释度合理的样品进行稀释，将其缓慢置入直径9cm无菌器皿，然后将1ml空白稀释液分别置入2个无菌平皿作为对照，且平皿中放置46摄氏度计数琼脂培养基，对平皿进行轻微转动，待已经明确琼脂凝固后，对平皿进行翻转，处于36-38摄氏度环境时、持续培养48-51h较适宜。

③TTC(氯化三苯四氮唑)培养基检测：以国际通用测定标准为参照标准，在100ml琼脂培养基中，放置0.5%TTC溶液1ml，制备TTC琼脂培养基，实际制备过程中，注意控制浓度为0.005%较适宜，具体的接种、培养方式与平板菌落计数检测保持一致性，对不同的样品液进行稀释时，注意接种2片，处于36-38摄氏度环境时、持续培养48-51h较适宜。

1. 3. 观察指标

检测结果：统计3种检测方式的合格例数、不合格例数。

1. 4. 统计学方法

数据经excel表整理，SPSS22.0统计软件分析，计量资料均数±标准差（ ±s）表示，t检验。计数资料构成比[n(%)]表示，x²检验。检验水准P=0.05。

2 结果

研究发现，菌落总数测试片的合格率为90.00%，不合格率为10.00%；平板菌落计数的合格率为91%，不合格率为9.00%；TTC培养基的合格率为92.00%，不合格率为8.00%，3种检测方式的合格率比较无差异，P>0.05，见表1。

表1 检测结果比较[(n),%]

3 讨论

经调查研究显示^[2]，目前我国频繁出现食品安全问题，对人们身体健康、生命安全造成严重威胁，随着人们生活水平提高、更多群体对食品安全问题开始广泛性关注，若检查时有食品不合格情况发现，尽早提供对症处理办法，可为食品卫生及安全提供可靠的保障。

研究报道^[3]，检测中心为保证检测结果的准确性，需从以下层面提高检测质量，即为：①日常生活中，定期对检测人员行专业培训，利于提高其专业技能、实践操作能力，确保实际检测食品安全时，保持崇高责任心、严谨态度切实开展检测流程，为相关检测工作的规范性提供可靠保障；②结合疾控中心实际情况，严格控制实验室环境有积极作用，尤其重视控制培养皿温度、湿度，避免环境影响培养皿、影响最终检测结果，定期校对检测仪器、设备等，保证获得准确检测结果；③平时重视控制培养基、试剂质量，尽量将其在干燥、通风的环境下保存，若需冷藏，需对温度严格控制，定期还需检查、记录培养基与试剂的生产日期，不再使用超过使用期限的试剂与培养基，避免过期培养基、试剂影响检测结果。

本研究示：菌落总数测试片的合格率为90.00%，不合格率为10.00%；平板菌落计数的合格率为91%，不合格率为9.00%；TTC培养基的合格率为92.00%，不合格率为8.00%，3种检测方式的合格率比较无差异，P>0.05，说明本文与高长凤^[5]文献相似，因此结合实际合理选检测方式，可切实观察食品情况、严格把控检测质量，可为人们食品安全提供保障。

综上所述：食品微生物学检测中，应用菌落总数试片、平板菌落计数及TTC培养基法检测对菌落总数测定，需结合实际选择方案，保证人们食品安全。

参考文献：

[1]赵淑雯,郑国鑫,夏泞泞,邢加烨,卓莉,周文斌.文成县2016年-2018年食品安全风险监测调查分析[J].中国卫生检验杂志,2020,30(05):627-631.

[2]杨红菊,胡汝源,张昆仑,吴艳萍.2016～2018年大理州市售食品中细菌性污染状况调查分析[J].食品安全质量检测学报,2019,10(22):7762-7767.

[3]刘杨,黄筱宇,邓晓东.2009—2018年成都双流国际机场航空食品微生物检验及分析[J].中国国境卫生检疫杂志,2019,42(03):185-187.