动物疫病的检测方法研究

动物疫病的检测方法研究

季竹敏

江苏东辛农产品检测有限公司

引言

动物检疫结果能否达到预期，主要与动物疾病的检测方法有关，所获得的标本和检疫方法是否合理。检测方法因样本而异，这意味着不同的样本可能需要考虑哪种方法更合适、适当。本文着重探讨动物疾病的检疫方法和关键事项在动物疾病检测领域的有效应用，充分保证了动物的健康成长和动物产品的质量安全。

关键词：动物；疫病；检测方法

一、动物疫病检测技术

1动物疫病的常规检测技术

1.1临床检测

主要基于常规测试。必须对动物的血液、尿液和粪便进行测试，必要时可以使用其他方法补充测试内容。

1.2流行病学检测

调查动物疾病的流行情况，包括：疾病的传播地点，时间和传播形式。

1.3病理学检测

通过解剖死动物的尸体，观察病理变化，取出患病材料进行检查，然后开始组织病理学检查。

1.4微生物学检测

它是指从死动物中分离和培养病菌，然后检测培养的病原微生物并鉴定其特征。

1.5免疫学检测

它涉及许多方面，包括：细胞和组织过敏，血清反应，细胞免疫等。

2动物疫病检测新技术

2.1化学发光免疫检测技术

它是通过独特的抗原和抗体反应以及化学发光反应的有机融合而创建的一种新的检测技术，具有很高的灵敏度。该技术主要在化学发光系统中使用某些物质，包括：发光催化酶，化学发光剂等，以及与发光反应有关的各种标记抗体和抗原。当标记抗原时，抗体与相应的抗体和抗原结合，然后发光底物可以在发光催化酶和试剂的作用下引起氧化还原反应。在这种方法中，释放可见光并发射荧光物质，然后使用适当的化学发光检测装置进行适当的检测工作。在这一阶段，化学发光免疫分析技术具有很高的灵敏度和特异性，可以检测10至5mmol/L的抗原，并且具有相对较快的检测效率。对病原微生物，抗体和代谢产物的检测效果特别好。另外，当前的化学发光免疫测定技术被广泛用于许多动物疾病。经过进一步的研究其检测效率和检测质量将进一步提高。

2.2杂交检测技术

近年来，核酸杂交技术已广泛用于动物病毒疾病的特异性，灵敏和快速诊断。该技术的主要原理是将两个单链核酸与互补碱基杂交以形成新的双链核酸，该双链核酸主要应用于待测样品核酸中的特定基因序列。不同的病原体具有不同的核酸片段。通过分离和标记核酸片段并产生合适的探针，可以对动物疾病进行科学而有效的检测。原位杂交检测技术作为杂交检测技术的重要组成部分，如今已越来越广泛地应用于基因表达调控，病原微生物研究，检测等各个环节。近年来，基因芯片技术由于其独特的优势也被广泛使用。基因芯片技术是通过混合检测技术开发的。基因芯片技术的发展与进步需要加大核酸杂交检测技术的研究开发，使病原性核酸检测技术更加完善和先进，完善和发展基因芯片技术，为动物疾病检测的发展提供更强大的支持工具。

二、病原检测方法

1病原分离和培养

病原体的分离主要涉及病毒。接种易感细胞株以分离病毒，或进行相关动物实验以接种患病材料进行检查。该方法是处理未知病原体最直接，最有效的方法，在国内已得到广泛应用。

2血清学方法、蛋白质免疫印迹

酶联免疫吸附测定（ELISA）和相关的间接荧光免疫荧光测试（IFA）是最常用的方法。其中，ELISA主要基于酶分子和抗体的结合以及随后排干相应的底物溶液以评估显色反应。通过用荧光显微镜观察样品中的血清来测定IFA。检测宿主体内抗病毒抗体的方法是该方法的主要方法，这两种方法也可用于新疾病的初步诊断。

3电子显微镜观察

此方法是端口检查以快速识别病毒形式并以可视方式确定类型的必要方法之一。也可以对各种病原体进行初步诊断。

4随机引物PCR法

该方法的核心是引物的设计，即cDNA文库的构建，然后使用相应的基因芯片分离新病毒，并进行扩增。并直接诊断从可疑物质中提取的核酸。

5序列非依赖性单引物扩增技术(SISPA)

SISPA可以与随机PCR方法结合使用，主要用于与病毒遗产材料扩增有关的相关测定。此方法更适用于病毒颗粒少且信息丢失的样品。

6小RNA深度测序技术

当病毒感染宿主时，其自身的基因会侵入宿主，并且与序列的特异性结合可以有效和特异性地降解这些同源RNA，然后获得适当的数据以及从细胞中获得系统性病毒免疫力。随着当前技术的进步，第二代高通量测序技术已经越来越完善，可以有效地获得siRNA的序列并获得相应的编码信息。

7病毒宏基因组学技术

该技术是一种基于核酸测序的检测方法，被广泛使用，在检疫中也很常见。基本路线可以概括如下：首先，样品处理；第二，增加丰度，建立一个文库，并进行扩增。第三，排序；第四，进行相应的生物信息学分析。独立的扩增技术可以有效地增加靶基因的丰度，具有很大的应用价值。

三、正确选择动物检疫方法

1现场检疫

顾名思义，现场检测是在现场进行直接检测。在所有方法中，现场检测是一种更为传统和直观的方法。在实际的检疫过程中，检疫人员将以科学的方式到现场详细观察各种动物疾病。目的是通过观察获得样品的病理症状，并通过相关性能将过去的经验或当前的经验结合起来。有研究结论可以找出样本中这些症状的原因。通过观察和后续研究，可以区分具有不同特征的动物。

现场检测方法各有利弊。在通用性方面，它是我国使用最广泛的方法，表明这种方法在检测领域具有很高的接受度。就效果而言，其准确性较高。但是，缺点是需要前往检疫现场可能会导致一些成本消耗，并且观察过程需要对技术和检测人员有较高的要求。与世界上其他更先进的方法相比，这种现场检测方式仍然有一些局限性问题。

2隔离检疫

并非所有动物都适合进行现场检测。毕竟，动物赖以生存的大部分环境都是开放的。如果样本感染的疾病是自传播的，那么它不仅可以在动物之间传播，而且可以在动物和人之间传播。因此，在确认样本后，检疫人员将首先对其状况进行初步评估。如果具有类似的传染病特征或其他风险，检疫人员将根据实际情况对样本进行隔离检查。一方面，这将确保检疫人员和样品所在环境中其他人员的安全。该位置还可以确保该位置的自然环境和其他物种受到的影响最大。同时，对不同动物物种的检测要求也不同。在隔离检查过程中，最终目标是获得准确的结果，因此在此过程中无需对检测的动物实施疫苗或抗生素干预。

3实验室检疫

3.1病理组织学检查

现场检测有其自身的局限性。重要的一点是，尽管在我国已经广泛使用，但基于检疫人员的经验的目视观察可能会导致错误，并且不同的人可以观察到不同的结果。因此，它不能覆盖所有的动物疫病检疫。例如，当用于现场检疫的样品是死动物时，其尸体可能会随时间损坏或腐烂。这也可能导致某些关键功能的消失，从而给现场检测增加了更多的难度。因此，当不适用现场检疫时，应考虑使用组织病理学方法对样品进行更深的检疫，使用更精确的仪器和测试结果来阐明此类疾病的特征，并开始研究。

3.2病原学检查

纵观所有动物疾病，传染病是最令人担忧和恐惧的。它涵盖范围广泛，除了动物之间的感染造成大规模死亡之外，也会产生动物与人之间传播感染疾病，造成疾病在人与人之间的转移传播等情况，这对于人类健康乃至生命都构成了极端威胁。在这种情况下，凸显了病原体检测的优越性。病原体检测属于实验室的检疫工作。具体过程包括使用显微镜和其他工具对病原体样本进行科学和标准化的测试。主要目标是有针对性地直接实施病原体评估，是判断的最直接依据，它为症状的后续研究提供了最为有价值的资料。

结语

近年来动物疾病的发病率呈现出较高的趋势，对动物疾病的检测提出了更高的要求。动物疾病发病率的增加不仅严重阻碍了畜牧业的健康发展，而且给农民带来了巨大的损失。因此，有必要做好动物疾病的检测工作，为疾病的预防和控制提供支持。在此基础上，有必要积极运用动物疾病检测新技术，抓好动物疾病检测，采取有针对性的防治措施，确保动物养殖业的健康发展。在技​​术飞速发展和进步的背景下，通过对原有动物疾病检测技术的创新和改进，依靠自身的高灵敏度和特异性，已经产生了一系列新检测技术，这些技术已广泛应用于动物疾病检测领域。随着科学技术的不断进步，这些新的检测技术将更加完善，实现更多的动物疾病检测，并为防治提供依据。