观察意外抗体的鉴定在疑难配血中的作用

观察意外抗体的鉴定在疑难配血中的作用

谭雄锐

佛山市中心血站南海血站 广东佛山 528100

【摘要】目的 对输血患者进行血清意外抗体鉴定，分析其特异性以及分布情况，确保输血安全及有效性。方法 此次的研究样本来源于辖区内用血医疗机构，包括三甲医院3家，二甲医院6家。共收集到177例患者的血清标本，选取时间段在2019年9月~2020年9月。采取盐水介质法、凝聚胺法、聚乙二醇间接抗球蛋白法以及微柱凝胶法，对收集到的血清标本进行检测，筛查其意外抗体，分析本次研究对象中的意外抗体阳性率，并根据不同性别进行该项阳性率的比较。针对出现筛查结果显示为阳性的患者进行特异性鉴定，并分析其中特异性抗体的占比情况。结果 入选的177例输血患者中，经过意外抗体筛查的检测，发现有53例患者的血清被检出存在意外抗体，其阳性率为29.94%（53/177）。53例患者中男性与女性占比分别是30.20%（16例）、69.8%（37例），存在显著差异（P＜0.05）。且女性阳性样本中有输血史31例（58.5%），有妊娠史15（28.3%），有输血史和妊娠史7例（13.2%）。53例意外抗体筛查为阳性的患者中，“Rh—hr”系统41例（77.4%），“MNSs”系统5例（9.4%），“Lewis”系统4例（7.5%），“P”系统1例（1.9%），“Kidd”1例（1.9%），自身抗体1例（1.9%），“Rh—hr”系统占比最高，均明显高于其他系统的检出占比（P＜0.05）。在Rh血型系统抗体分布中，各类抗体的占比从高到低排列依次是抗-E＞抗-cE＞抗-C＞抗-D，占比分别是48.78%、26.83%、17.07%、7.32%。结论 意外抗体的存在是造成疑难配血的关键，在输血患者中，有部分患者的血清中存在意外抗体，通过意外抗体鉴定能够及时发现这一问题，提高患者的临床配血相合率，确保临床上输血治疗的安全性和有效性。

【关键词】 意外抗体；鉴定；疑难配血；输血患者

输血患者在进行正式输血治疗前，需要接受相关检测，主要是为了能够帮助患者选择符合率高的血液，以免在输血过程中发生溶血反应，以确保输血治疗的有效性和安全性^[1]。在相关检测技术的不断提高中，血型鉴定有了更高的标准，常规的ABO血型系统鉴定已经不能满足输血配血的需求，鉴定结果相对更笼统，输血患者发生溶血反应的风险较高，其主要原因是意外抗体的存在^[2]。意外抗体是指除了天然发生的抗-A与抗-B以外的其他红细胞抗体，同种抗体与自身抗体是意外抗体中的两种不同类型^[3]。意外抗体的鉴定目前已经用于部分单位解决疑难配血的方式，对提高输血治疗的安全与效果具有积极意义。本文将对所收集到的输血患者的血清标本进行意外抗体鉴定，分析意外抗体以及意外抗体中的特异性抗体分布情况，为临床上解决疑难配血问题提供一定的参考思路。

1 资料与方法

1.1一般资料

此次的研究样本来源于辖区内用血医疗机构，包括三甲医院3家，二甲医院6家。共收集到177例患者的血清标本，选取时间段在2019年9月~2020年9月。177例患者中男性与女性占比分别是66.67%（118例）、33.33%（59例）；年龄范围在28~55岁，平均年龄是（41.58±9.27）岁。

1.2方法

1.2.1检测准备用品

本研究中，进行检测时需要准备ABO标准细胞、红细胞血型抗体筛选细胞、试剂谱细胞，抗-A血型定型试剂、抗-B血型定型试剂、抗-D血型定型试剂、抗-C血型定型试剂、抗c血型定型试剂、抗E血型定型试剂、抗e血型定型试剂、抗-M血型定型试剂、抗-N血型定型试剂、抗-P血型定型试剂、抗-Le^a血型定型试剂、抗-Jk^a血型定型试剂、冷自身抗体试剂，抗球蛋白试剂、2-巯基乙醇、聚乙二醇、凝聚胺试剂。需要准备的仪器有：微柱凝胶检测卡、卡式离心机、血型血清学专用离心机、免疫微柱孵育器以及电热恒温水温箱。

1.2.2检测方法

在输血前3天内，采集患者的静脉血液，共5ml，并通过EDTA进行充分抗凝，以避免样本受到纤维蛋白的影响，之后将其进行离心处理，离心条件为3000r/min，离心处理共5min，之后分离出血浆与红细胞，使用生理盐水进行红细胞悬液的制定，其浓度为3%。IgM意外抗体的鉴定采用盐水介质法和凝聚胺法。IgG意外抗体的鉴定采用聚乙二醇间接抗球蛋白法以及微柱凝胶法。抗体特异性检测：通过谱细胞与患者自身的细胞反应格局，来确定抗体特异性。与此同时，使用单克隆血型抗体对红细胞上的相应抗原进行检测，以此来证明意外抗体的特异性。

1.3观察指标

对收集到的血清标本进行检测，筛查其意外抗体，分析本次研究对象中的意外抗体阳性率，并根据不同性别进行该项阳性率的比较。对比意外抗体阳性病例中的不同系统抗体的占比情况。

1.4统计学方法

采用SPSS 23.0软件进行本次研究的数据统计学分析，其中计量资料应用（ ±s）表示，计数资料应用（%）表示；并分别采用t和（x²）进行检验。当所得到的P值不足0.05时，表明存在显著差异。

2 结果

2.1入选的177例输血患者中关于意外抗体的筛查结果

入选的177例输血患者中，经过意外抗体筛查的检测，发现有53例患者的血清被检出存在意外抗体，其阳性率为29.94%（53/177）。53例患者中男性与女性占比分别是30.20%（16例）、69.8%（37例），存在显著差异（x²=16.642，P=0.001）。女性阳性样本中有输血史31例（58.5%），有妊娠史15（28.3%），有输血史和妊娠史7例（13.2%）。

2.2 53意外抗体筛查阳性患者的意外抗体分布情况

结果显示，“Rh—hr”系统41例（77.4%）；“MNSs”系统5例（9.4%）；“Lewis”系统4例（7.5%）；“P”系统1例（1.9%）；“Kidd”1例（1.9%）；自身抗体1例（1.9%）。本次结果中，“Rh—hr”系统占比最高，均明显高于其他系统的检出占比（41例与5例：x²=49.774，41例与4例：x²=52.865，41例与1例：x²=63.095）

2.3 Rh血型系统抗体的分布情况

结果显示，在Rh血型系统抗体分布中，抗-E占比最高，达到了48.78%。见表1。

表1 Rh血型系统抗体的分布情况

3 讨论

疑难配血是指在临床工作中遇到的交叉配血的主侧或者次侧出现凝集的现象，而需要寻找其中的原因才能有效找到解决方法，避免发生凝集现象^[4]。输血是一些急症、重症患者治疗过程中必不可少的环节，而发生疑难配血会影响患者的救治时机，导致患者不能在尽快的时间内得到救治，进而会影响其救治效果等^[5]。因此，临床上对疑难配血问题的解决高度关注。

意外抗体可通过多次、大量的输血治疗或者通过妊娠等免疫产生，是造成溶血性输血反应的一个重要因素。利用意外抗体鉴定，对输血者的血清进行意外抗体筛查，能够及时发现该问题，进而为输血患者提供相符合的血液，来确保患者的输血安全与效果^[6]。在既往临床输血中，通常按照ABO型血型相容输注，不进行较差配血试验，会增加输血风险。若输血患者曾被免疫过，在输入含有意外抗体血液后，会发生溶血反应，而该种溶血反应属于慢性反应，在初期可能并不会引起明显的症状、变化，一方面延误了患者的正常治疗，另一方面也增加了患者的治疗费用，并且还浪费了血液资源^[7]。本次研究中，我们选择了聚乙二醇间接抗球蛋白法以及微柱凝胶法进行意外抗体检测，聚乙二醇间接抗球蛋白法能够让抗原抗体分子更接近，进而增强意外抗体的检出效果。而微柱凝胶法能够通过应用分子筛作用的凝胶介质，在很大程度上提高了检测的灵敏度。将两种检测方式联合应用能够进一步确保意外抗体检测结果的可靠性。

在本研究中，入选的177例输血患者中，经过意外抗体筛查的检测，发现有53例患者的血清被检出存在意外抗体，其阳性率为29.94%（53/177）。53例患者中男性与女性占比分别是30.20%（16例）、69.8%（37例），存在显著差异（P＜0.05）。通过此项结果数据能够知道，女性的意外抗体检出率比男性更高，这主要是因为女性在妊娠、流产等因素影响下造成机体受到免疫刺激会发生相关反应，并且还存在妊娠、输血这样的双重免疫可能性，出现意外抗体的可能性会升高。意外抗体除了会引起交叉配血困难以及免疫溶血性输血反应意外，如果孕妇体内含有IgG类的意外抗体，该类抗体能够通过胎盘进入胎儿的体内，进而容易引发新生儿溶血症。这也说明对需要输血的孕妇进行意外抗体检测十分必要。在意外抗体筛查为阳性的患者中，“Rh—hr”系统41例（77.4%），“MNSs”系统5例（9.4%），“Lewis”系统4例（7.5%），“P”系统1例（1.9%），“Kidd”1例（1.9%），自身抗体1例（1.9%），“Rh—hr”系统占比最高，均明显高于其他系统的检出占比（P＜0.05）。Rh系统意外抗体是造成临床上发生免疫性溶血性输血反应以及新生儿溶血症中，较为多见的意外抗体类型。并且在Rh血型系统抗体分布中，各类抗体的占比从高到低排列依次是抗-E＞抗-cE＞抗-C＞抗-D，占比分别是48.78%、26.83%、17.07%、7.32%。抗-E占比最高，达到了48.78%。这表情患者中抗-E是目前最常见的抗体，这主要是因为目前我国的汉族人群中，E抗原阴性者约占50%，因此，抗-E出现的概率较高。并且Rh系统中的的Rh(E)血型没有Rh(D)血型进行配合性输血，大多进行的是随机输血，因此，造成Rh(E)阴性的患者很容易在输血过程中接受了E抗原的刺激，并产生抗-E，进而导致该类患者的占比相对较多。

通过意外抗体鉴定，能够在确保配血相合的基础上，根据抗体的特异性检查相合血液中抗体相对应的抗原，选择该种抗原为阴性的血液，来作为该意外抗体阳性患者的输血用血液^[8]。但需要注意的一方面是，意外抗体阳性的患者，其体内的相关意外抗体会在时间延长的过程中而逐渐降低，即随着时间的延长，会有部分抗体因为水平降低而在鉴定检查中显示为阴性结果^[9]。而该类患者在输血后会激发再次免疫反应，进而造成迟发性的溶血反应。因此，针对有过输血史的患者，在输血前需要掌握患者既往的意外抗体鉴定结果。另外，不能只看1次试验的配血结果，还需要进行相合血液的抗原确证试验，来最终确定该血液是否可用^[10]。

综上所述，意外抗体的存在是造成疑难配血的关键，在输血患者中，有部分患者的血清中存在意外抗体，通过意外抗体鉴定能够及时发现这一问题，提高患者的临床配血相合率，确保临床上输血治疗的安全性和有效性。

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