快速检验技术在微生物检验中的敏感性和特异性及影响因素探讨

快速检验技术在微生物检验中的敏感性和特异性及影响因素探讨

马辽明

甘肃省定西市漳县疾病预防控制中心， 748300

摘要目的：探究快速检验技术在微生物检验中的敏感性和特异性和影响因素分析。方法：选取微生物检验患者作为研究对象，收取60例患者，采用电脑随机分组方式分为观察组、对照组，观察组实施快速检验技术（荧光定量PCR技术）方式，对照组采用常规检验方式，对比两组各项指标。结果:观察组检出率83.33%、敏感度和特异性和对照组各项指标相比，具有显著差异（P＜0.05）。结论：在微生物检验中采取快速检验方式，取得显著的应用价值，具有较高的特异性和敏感性，值得研究和推广。

关键词：快速检验技术；微生物检验；敏感性；特异性

微生物感染发生率不断增加，而早期实施一项检验方式较为重要，快速检验技术在临床较为常见，其中以实时荧光定量 PCR 技术较为常见，在进行诊断过程中，使用PCR 扩增反应定性分析每一个循环产物荧光信号，将荧光化学物质引入扩增反应中，荧光强度信号会随着患者扩增反应程度一定加强情况，导致监测过程中的信号形成一条曲线，通过对未知模板实施分析，从而获得诊断结果。在实际检测的过程中，不仅特异性引物存在^[1]，而且还有核苷酸探针存在，在实施扩增反应时，需要采用聚合酶活性水解探针，水解成单核苷酸，通过荧光信号的增加，再对荧光信号强度进行的实时动态进行检测，从而达到对扩增反应产物实施定量的分析的目的^[2]。本文在于探究快速检验技术在微生物检验中的敏感性和特异性及影响因素探讨，具体内容见下文。

1.资料/方法

1.1基线资料

将60例微生物检验患者作为此次研究的主要对象，分组方式为电脑随机分组，本次研究人数共60例，对照组采取常规检验方式、观察组采取快速检验技术（荧光定量PCR技术）方式，研究均在2020年10月至2021年5月期间完成。纳入标准：签署知情同意书。排除标准：临床资料不完整。

观察组中男性患者20例、女性患者10例，年龄21~70岁，平均值（49.29±2.17）岁；对照组中男性患者21例、女性患者9例，年龄21~72岁，平均值（49.21±2.39）岁。二者基线资料，差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2方法

对照组采用常规检测方式：应用培养鉴定药敏法

观察组采用快速检验技术：充分震荡摇匀标本，吸取1ml液体转至1.5ml离心管内，13000r/min离心5分钟，去上清，沉淀加入1ml无菌生理盐水混匀，再重复洗涤一次，去上清后直接加入核酸提取液50ul，充分摇匀，沸水浴10分钟，然后13000r/min离心5分钟，取上清4ul作为PCR反应模板。

1.3观察指标

对比两组的检出率、敏感度和特异性。

1.4统计学方法

此次研究数据均采用SPSS20.0统计学软件处理，计量资料用（x±s）表示，选择t检验；计数资料用（%）表示，选择X²检验，当数据存在统计差异，用P＜0.05表示。

2. 结果

2.1对比检出率

观察组检出率83.33%（其中阳性25例、所占比为83.33%）；对照组患者的检出率56.67%（其中阳性17例、所占比为56.67%），两组之间具有显著差异（P＜0.05）。见表1所示。

表1：分析对照组、观察组两组患者的检出率

2.2对比灵敏度、特异性

观察组患者敏感度和特异性高于对照组（P＜0.05）。见表2所示。

表2：分析对照组、观察组两组患者的灵敏度、特异性

3.讨论

研究显示，荧光定量PCR技术在1996年初期被研发处理的，是一种新型技术，能快速进行检验，该项技术能对PCR污染的问题进行改善，具有较高的自动化程度、较强的特异性等特点，采用此种技术对微生物感染进行检测诊断时，通过结合实时PCR技术、逆转录技术，称作为定量RT-PCR技术^[3]，该项技术通过采用少量RNA对某个特点细胞和特定时间以组织内特点基因实施识别，再应用在检测诊断过程中，提供可靠的依据，从而提高诊断正确率，能早期明确疾病，为患者后期治疗提供依据。

通过应用荧光定量PCR检测方式（快速检验方式），和常规检验方式相比，取得显著的检测效果；实时荧光定量PCR将荧光基因加入PCR体系中，对于整个PCR过程使用荧光信号监测，通过获取的动力学曲线，定量分析初始模板核酸；该方法在微生物的检测中有显著优势，无长程培养，可快速鉴别实施诊断，能明确疾病，提高检出率，预防误诊以及漏诊情况。而影响快速检验技术的因素包括多种，例如：①免疫学检验：由于洗涤和抗原包等因素，容易发生检测结果假阳性情况^[4]，抗体的好坏容易影响实验室检查的结果，在实施病毒检查时，对于变异速度较快的病毒，实施免疫性检查较为困难。②在进行分子生物技术过程中，对于患者不同病原微生物应用仪器实施工作，存在成本高、效率低、工作周期长等情况。在本次结果中，观察组检出率83.33%高于对照组，两组之间具有显著差异（P＜0.05）；观察组患者敏感度和特异性高于对照组（P＜0.05），说明快速检验技术具有较高诊断价值，并且特异性和敏感度较高。

综上所述，快速检验技术在微生物检验中具有较高的应用价值，并且敏感性和特异性较高，值得进一步推广与探究。

【参考文献】：

[1]王丹,李平,郝俊峰.快速检验技术在微生物检验中的效果观察及影响因素研究[J].中外医疗,2020,39(21):190-192,195.

[2]杨华,牛翠.改良CarbaNP法和CIM法在耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌检测中的应用价值分析[J].中国医药导报,2020,17(16):24-27,33.

[3]王昕,朱龙佼,许文涛,等.核酸切割酶在病原微生物检测中的研究进展[J].生物技术通报,2020,36(1):182-192.

[4]王海晶,王小军. 实时定量PCR与传统微生物培养法诊断呼吸机相关性肺炎病原体的性能比较[J]. 临床肺科杂志,2020,25(6):811-815.