病理组织中的病原学检查对结核病的诊断价值

病理组织中的病原学检查对结核病的诊断价值

赵太萍

江油市中医医院 621700

【摘要】目的：研究分析结核病诊断中应用不同病原学检查方法的效果。方法：研究对象为我院2018年4月-2020年12月收治的106例确诊结核病患者，每例患者取1份组织标本，其中52份坏死性肉芽肿组织标本为A组，25份非坏死性肉芽肿组织标本为B组，29份普通炎症组织标本为C组，均采用不同病原学方法进行检测。结果：A组病理标本在不同病原学检查方法中阳性检出率均高于B组、C组（P<0.05），且Xpert MTB/RIF阳性检出率最高；A组抗结核治疗＞1个月的患者与抗结核治疗≤1个月的患者相比，结核分枝杆菌培养阳性检出率差异明显，其中抗结核治疗≤1个月的患者阳性检出率更高（P<0.05）。抗酸染色、Xpert MTB/RIF、FQ-PCR对于抗结核治疗＞1个月的患者与抗结核治疗≤1个月的患者阳性检出率差异无统计学意义（P<0.05）。结论：以Xpert MTB/RIF为代表的病原学检查对结核病具有较好的诊断效果，且抗结核治疗时间不会对其检测结果产生明显影响。

【关键词】病理组织；病原学检查；结核病；诊断准确率

肺结核是一种发病率较高的呼吸系统传染病，其发病率在世界范围内逐步升高^[1]，特别是发展中国家，结核病疫情明显回升，然而肺结核的临床表现越来越不典型。依靠传统的痰查结核杆菌的阳性率在逐渐降低，所以痰查阳性菌的金标准在临床诊断中变得越来越局限。目前病理组织的病原学检查是诊断结核病的重要方法，通过多项特殊染色，其能够有效区分不典型的病理形态学表现与非结核杆菌感染、结节病等其他慢性肉芽肿疾病^[2]。近些年来随着医疗技术的发展越来越多的新型分子生物学检查技术开始应用于病理组织标本的检测中，如荧光定量PCR等，使病理组织病原学检查阳性率得到了显著提高。基于此，本文对结核病诊断中应用不同病原学检查方法的效果进行了研究分析，现报告如下。

1.资料与方法

1.1一般资料

研究对象为我院2018年4月-2020年12月收治的106例确诊结核病患者，每例患者取1份组织标本。患者年龄18-76岁，平均（46.26±5.38）岁；样本组织类型：胸膜组织46份，肺组织38份，淋巴结18份，胸壁肿物2份，肠黏膜组织1份，腮腺组织1份。其中，52份坏死性肉芽肿组织标本为A组，25份非坏死性肉芽肿组织标本为B组，29份普通炎症组织标本为C组。所有患者均知晓本次研究，愿意配合相关工作，且已签署知情同意书。

1.2方法

（1）标本制作及抗酸染色：首先对标本组织进行固定、脱水等常规处理制成切片，完成后进行H-E染色，并使用中性树胶进行封固。对坏死性肉芽肿组织蜡块切片进行脱蜡处理，完成后予以抗酸染色，并设置相应的阳性对照，使用光学显微镜可以观察到红色抗酸杆菌；（2）结核分枝杆菌培养：取适量标本进行粉碎研磨处理，之后将由4%氢氧化钠溶液、半胱氨酸及2.9%柠檬酸三钠组成的等量消化液（5ml/L）充分混合后进行15分钟的振荡处理，之后使用美国BD公司生产的分枝杆菌培养仪（型号：BACTEC MGIT 960）及配套营养管进行培养；（3）结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测（Xpert MTB/RIF）：取适量标本进行粉碎研磨处理，之后取2ml0.9%氯化钠溶液混合，完成后进行振荡处理，将其中组织残块去除，然后吸取适量混悬液进行离心处理，将上清液弃去，并取1ml0.9%氯化钠溶液加入沉淀物中充分摇匀，使用防漏收集器皿收集，之后取Xpert 处理液2ml加入其中并充分摇晃均匀，于正常室温下放置15分钟后，在Xpert MTB/RIF标本孔上加入1ml溶液上机检测；（4）荧光定量PCR。首先取适量DNA提取液加入组织标本中，并进行10分钟的100℃恒温处理，之后于PCR试管中加入2μL标本溶液，使用美国应用生物系统公司生产的荧光定量PCR仪（型号：ABI 7500）进行扩增，对结核分枝杆菌插入序列进行检测，并根据循环阈值对结核分枝杆菌DNA进行计算，阳性判断标准为：结核分枝杆菌DNA超过5×10²拷贝/ml。

1.3统计学分析

使用SPSS19.0软件处理数据，计量、计数资料分别行t、χ²检验。P<0.05表示组间数据对比差异有统计学意义。

2.结果

2.1 3组病理标本中不同病原学方法结核分枝杆菌阳性检出率对比

与B组、C组相比，A组病理标本在不同病原学检查方法中阳性检出率均最高（P<0.05）。其中，Xpert MTB/RIF阳性检出率最高（76.92%），之后依次为FQ-PCR（65.38%）、结核分枝杆菌培养（34.62%）、抗酸染色（23.08%），见表1。

表1：3组病理标本中不同病原学方法结核分枝杆菌阳性检出率对比[n（%）]

注：FQ-PCR为“荧光定量聚合酶链反应”。

2.2 A组患者不同抗结核治疗时间对病原学检查的影响

A组抗结核治疗＞1个月的患者与抗结核治疗≤1个月的患者相比，结核分枝杆菌培养阳性检出率差异明显，其中抗结核治疗≤1个月的患者阳性检出率更高（P<0.05）。抗酸染色、Xpert MTB/RIF、FQ-PCR对于抗结核治疗＞1个月的患者与抗结核治疗≤1个月的患者阳性检出率差异无统计学意义（P<0.05），见表2。

表2：A组患者不同抗结核治疗时间对病原学检查的影响[n（%）]

3.讨论

肺结核目前仍然是严重危害人类健康的传染病，对患者身体健康危害较大，且随着病情的发展，可威胁患者生命安全。因此，临床上需要及早对患者进行准确、有效的诊断，从而使其预后得到有效改善。我们在临床工作中注意到肺结核的诊断非常不容易，误诊为肺癌、肺炎及真菌感染的情况越来越多。因为肺部的其他疾病影像学检查也可以出现类似肺结核病变的影像学改变。仅凭影像学检查，容易误诊误治，不但给病人造成经济上的损失，同时也延误治疗。严格来说，诊断肺结核痰及病变组织中查出结核杆菌是最可靠的诊断，称为金标准。其次是结核的病理组织中查找抗酸杆菌。但需要较为完整的结核分枝杆菌才能够保证结果的准确性，但肺外结核一般无大量细菌，同时治疗药物也会对结核分枝杆菌造成破坏，因此难以获得较高的阳性检出率。结核分枝杆菌培养在结核病诊断中发挥着重要作用，但是其需要较长的时间，导致其难以大规模应用。在本次研究中与B组、C组相比，A组病理标本在不同病原学检查方法中阳性检出率均最高（

P<0.05）。其中，Xpert MTB/RIF阳性检出率最高（76.92%），其次为FQ-PCR（65.38%）、结核分枝杆菌培养（34.62%）、抗酸染色（23.08%），FQ-PCR、Xpert MTB/RIF阳性率较高主要是因为细菌存活状态不会对检测结果产生影响，其可以检测出病变组织中已经死亡但仍然存在的细菌^[3-6]。

本次研究还显示：A组抗结核治疗＞1个月的患者与抗结核治疗≤1个月的患者相比，结核分枝杆菌培养阳性检出率差异明显，其中抗结核治疗≤1个月的患者阳性检出率更高（P<0.05）。抗酸染色、Xpert MTB/RIF、FQ-PCR对于抗结核治疗＞1个月的患者与抗结核治疗≤1个月的患者阳性检出率差异无统计学意义（P<0.05），说明结核分枝杆菌培养对活菌具有较好的检出效果，随着抗结核治疗时间的延长活菌减少，会对结核分枝杆菌培养的检查效果造成较大的影响，但是在一段时间内不会严重影响结核分枝杆菌DNA。抗酸染色虽然对活菌或死菌均能够进行检测，但是需要足够多的结核分枝杆菌样本，因此与其他检查方式相比阳性检出率较低。

总而言之，病原学检查能够有效检出结核分枝杆菌，对结核病具有较好的诊断作用，其中Xpert MTB/RIF阳性检出率最高，且抗结核治疗时间不会对其检测结果产生明显影响，值得推广应用。

参考文献：

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