水飞蓟对酒精性致小鼠急性肝损伤的保护作用

水飞蓟对酒精性致小鼠急性肝损伤的保护作用

刘强 王芳

江西中医药高等专科学校 江西抚州 344000

摘 要：目的：水飞蓟对酒精性致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法：采用酒精致小鼠急性肝损伤模型：染毒18h后，制备肝匀浆，测定肝中甘油三酯、还原型谷胱甘肽（GSH-Px）和丙二醛（MDA）的含量。结果：①模型组甘油三酯的含量极显著高于空白对照组（P<0.01），水飞蓟提取物中、高剂量组的甘油三酯含量都显著低于模型组（P<0.05）；②模型组MDA的含量极显著高于空白对照组（P<0.01），水飞蓟提取物中、高剂量组的MDA含量都极显著低于模型组（P<0.01）；③模型组GSH-Px的含量极显著高于空白对照组（P<0.01），水飞蓟提取物中、高剂量组的GSH-Px含量显著高于模型组（P<0.05）。结论：水飞蓟提取物对酒精引起的小鼠急性肝损伤具有显著的保护作用。

关键词：水飞蓟；酒精；肝损伤

水飞蓟具有消除自由基、抑制活性氧自由基活性、抗氧化应激等作用,并具有稳定肝细胞膜、保护肝细胞酶系统和提高肝脏解毒功能等生物活性^[1-3]。水飞蓟具有较广泛的药理学特性，已发现其可能有抗酒精性肝损害的作用，但目前对急性酒精性肝损伤相关报道仍较少见。本研究以急性酒精性肝损伤小鼠为模型，观察该药对急性酒精性肝损伤的保护作用。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物：SD健康的雄性小鼠，体重18～22 g，由上海斯莱特林实验动物中心提供。

1.1.2 受试物：水飞蓟提取物实验室自制，水飞蓟原药材经醇提，乙酸乙酯萃取，浓缩干燥得提取物粉末，得率约5%，其标志性成分为水飞蓟宾。

1.1.3 实验试剂：无水乙醇，由市场购得；甘油三酯测定试剂盒、MDA、GSH-Px试剂盒，由南京建成生物研究所提供。

1.1.4 主要仪器：分光光度计；恒温箱等

1.2 实验方法

1.2.1 肝损伤模型的建立和分组：SD健康的雄性小鼠50只，体重18～22g，在实验室适应一周，自由进食进水。小鼠随机分成5组：空白对照组、模型对照组、水飞蓟提取物高、中、低剂量组。按照国内常用的方法进行造模：模型对照组和水飞蓟提取物三个剂量组小鼠禁食12h后，予以56%红星二锅头喂养3d，小鼠按每天0.15mL/lOg剂量用56%的白酒灌胃，禁食，不禁水。

1.2.2 给药及动物处理：空白对照组和模型对照组给予生理盐水，水飞蓟提取物高、中、低剂量组剂量分别为：5mg/kg、10mg/kg、30mg/kg（分别相当于人体推荐摄入量的5、10、30倍），每天灌胃一次，各剂量组均给予维持饲料，连续30d。

1.2.3 肝组织中甘油三酯测定：取一定量的所需肝脏称重，生理盐水制成10%组织匀浆，以3000rpm离心10min，为10%匀浆上清液，按照试剂盒的说明来测定肝组织中甘油三酯含量。

1.2.4 肝脏中MDA和GSH-Px的测定：剪取0.5g肝脏置于碾磨器中，加入5ml生理盐水进行充分碾磨，4500rpm离心10min，取上清液，制成10%的匀浆。按照试剂盒的说明测定肝组织中MDA的含量和GSH含量。

1.3 数据统计与分析：用SPSS软件进行数据处理。采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值0.05,结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F_0.05，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。

2 结果与分析

2.1水飞蓟提取物对小鼠体重的影响：小鼠的初始体重在各剂量组与模型对照组（0g/kgBW）间比较、空白对照组与模型对照组间比较，差异均无显著性（P>0.05）.经口给予小鼠不同剂量的水飞蓟提取物30d后，小鼠的体重在各剂量组与模型对照组（0g/kgBW）间比较、空白对照组与模型对照组间比较，差异均无显著性（P>0.05）。即该样品对小鼠体重无不良影响（表1）。

表1 水飞蓟提取物对小鼠体重的影响（`x±SD）

2.2水飞蓟提取物对酒精性肝损伤小鼠肝组织中甘油三酯含量的影响：模型组的甘油三酯含量分别极显著高于空白对照组（P<0.01），表明本实验小鼠酒精性肝损伤造模成功；高、中剂量水飞蓟提取物组与模型对照组肝脏中的甘油三酯含量之间有显著性差异（P<0.05）（表2）。

表2 水飞蓟提取物对肝组织中甘油三酯含量的影响（`x±SD）

注：#表示与空白对照组比较有显著性差异，*表示与模型对照组比较有显著性差异

2.3水飞蓟提取物对肝组织中还原型谷胱甘肽含量的影响：经口给予小鼠不同剂量的水飞蓟提取物30d后，建立酒精肝损伤模型。模型对照组与空白对照组比较，肝组织中还原型谷胱甘肽含量显著降低（P<0.01），表明模型建立成功。与模型对照组比较，中、高剂量组肝组织中还原型谷胱甘肽含量显著提高（P<0.05）（表3）。

表3 水飞蓟提取物对肝组织中还原型谷胱甘肽含量的影响（`x±SD）

注：#表示与空白对照组比较有显著性差异，*表示与模型对照组比较有显著性差异

2.4水飞蓟提取物对肝组织中丙二醛含量的影响：经口给予小鼠不同剂量的水飞蓟提取物30d后，建立酒精肝损伤模型。模型对照组与空白对照组比较，肝组织中丙二醛含量显著升高（P<0.01），表明模型建立成功。与模型对照组比较，中、高剂量组肝组织中丙二醛含量显著降低（P<0.01）（表4）。

表3 水飞蓟提取物对肝组织中丙二醛含量的影响（`x±SD）

注：#表示与空白对照组比较有显著性差异，*表示与模型对照组比较有显著性差异

综上所述，水飞蓟提取物可以抑制酒精性肝损伤，是一种潜在的保肝剂，可以有效的防治由化学毒物或药物引起的肝损伤。

参考文献：

[1] 陈世林,洪汝涛,刁磊，等.水飞蓟素对大鼠急性酒精性肝损伤的保护作用.安徽医科大学学报,2010,45(2)：209-212.

[2]CrocenziFA,RomaMG.Silymarinasanewhepatoprotectiveagentinexperimentalcholestasis:newpossibilitiesforanancientmedication[J].CurrMedChem,2006,13(9):1055-74.
[3]WesolowskaO,Lania-PietrzakB,KuzdzalM,etal.Influenceofsilybinonbiophysicalpropertiesofphospholipidsbilayers[J].ActaPharmacolSin,2007,28(2):296-306.