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摘要:本试验主要研究益生菌慕斯洗液对实验性小鼠细菌性阴道炎模型的作用。建立小鼠阴道混合感染金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的动物模型,分别外洗给予益生菌慕斯洗液1mL(低剂量组)、2mL(中剂量组)和3mL(高剂量组)不同剂量,以病原体转阴率和阴道黏膜炎症的治愈程度为指标。结果显示,益生菌慕斯洗液对病原体转阴率和阴道黏膜炎症的治愈程度均有明显提高,低、中、高剂量组对金黄色葡萄球菌的阴转率分别为50.0%,60.0%,70. 0%,对大肠埃希菌的阴转率分别为20.0%,30.0%,50.0%。益生菌慕斯洗液对细菌性阴道炎小鼠有较好疗效。
关键词:益生菌慕斯洗液;阴道炎;小鼠
细菌性阴道炎(BV)是一种由阴道加特纳菌和一些厌氧菌的混合感染,导致阴道内微生态平衡失调,引起的阴道分泌物增多,白带有鱼腥臭味及外阴瘙痒灼热的综合征。在性关系混乱的人群中发病率较高。10%~50%的患者无症状,有症状者自诉有鱼腥臭味的灰白色的白带,阴道灼热感、瘙痒。
益生菌慕斯洗液是由混合益生菌,发酵提取物,水等组成,具有清洁外阴,调整阴道微生态平衡之功效,用于缓解和预防妇女各种阴道炎症性疾病。本试验根据其功能效果进行了细菌性阴道炎动物试验研究。
1材料与方法
试剂 益生菌慕斯洗液,内蒙古普泽生物提供;甲硝唑氯己定洗液,江苏晨牌邦德药业有限公司,苯二甲酸雌二醇注射液:上海通用药业股份有限公司。
动物 NIH小鼠,清洁级,雌性,体重18~22 g。
试验菌株﹐金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌购自广东环凯微生物科技有限公司,上述2种致病菌等体积混合成造模菌并制备成造模液。
试验方法
将雌性小鼠皮下注射2mg/ mL苯二甲酸雌二醇注射液0.05 mL,连续3次,2d一次。于第6天将20μL造模液注入海绵中,将已注入菌种的海绵塞于小鼠阴道内,于接种后的第4天用无菌小棉签采阴道分泌物涂片,革兰氏染色镜检,观察菌丝及芽生孢子的生长情况,以确定感染成功。挑选60只阴道炎模型小鼠随机分成6组,分别为空白对照组(不感染不治疗),模型对照组,甲硝唑氯己定洗液组,益生菌慕斯洗液低、中、高剂量治疗组,每组10只。每天用相应的洗液清洗外阴,连续10d每天1次。观察各组动物阴道分泌物的病原体转阴率和阴道黏膜炎症的治愈程度[1,2]。
2结果
2.1益生菌慕斯洗液对病原体的作用
益生菌慕斯洗液,用量1mL、2mL和3mL对金黄色葡萄球菌的转阴率分别为50%,60%,70% ,对大肠埃希菌的转阴率分别为 20%,30%,50% ,两者的量效关系均密切。试验结果见表1。
表1益生菌慕斯洗液对小鼠阴道细菌性感染的作用
组别 | 数量/只 | 用量 | 金黄色葡萄球菌 | 大肠埃希菌 | ||||
阴性 | 阳性 | 转阴率/% | 阴性 | 阳性 | 转阴率/% | |||
空白对照组 | 10 | 0 | 10 | | - | 10 | 0 | - |
模型对照组 | 10 | 0 | | 10 | - | 0 | 10 | - |
甲硝唑氯己定洗液组 | 10 | 1mL | 6 | 4 | 60 | 6 | 4 | 60 |
益生菌慕斯洗液组 | | | | | | | | |
低剂量组 | 10 | 1mL | 5 | 5 | 50 | 2 | 8 | 20 |
中剂量组 | 10 | 2mL | 6 | 4 | 60 | 3 | 7 | 30 |
高剂量组 | 10 | 3mL | 7 | 3 | 70 | 5 | 5 | 50 |
2小鼠阴道黏膜炎症的治愈程度
按小鼠阴道黏膜组织病理学分级,分为0~Ⅲ级,0级为黏膜上皮光滑,无坏死脱落,黏膜下无充血、水肿、出血、炎细胞浸润,阴道内无炎性渗出物;I级为黏膜上皮无坏死脱落,黏膜下充血、水肿,阴道内无炎性渗出物;Ⅱ级为黏膜上皮有灶性坏死脱落,黏膜下充血、水肿、点状出血、少量炎细胞浸润,阴道内有少量炎性渗出物;Ⅲ级为黏膜上皮坏死脱落,黏膜下充血、水肿、片状出血、炎细胞浸润,阴道内有大量炎性渗出物。结果显示,益生菌慕斯洗液用量1mL、2mL和3mL对小鼠阴道黏膜病理变化在试验后与模型对照组比较均差异有显著性(P<0.05)。见表2。
表2 试验后各组小鼠阴道黏膜病理等级
组别 | 数量/只 | 0级 | I级 | Ⅱ级 | Ⅲ级 |
空白对照组 | 10 | 7 | 3 | 0 | 0 |
模型对照组 | 10 | 0 | 2 | 4 | 4 |
甲硝唑氯己定洗液组 | 10 | 0 | 6 | 4 | 0 |
益生菌慕斯洗液组 | | | | | |
低剂量组 | 10 | 2 | 6 | 2 | 0 |
中剂量组 | 10 | 3 | 3 | 4 | 0 |
高剂量组 | 10 | 4 | 4 | 2 | 0 |
3讨论
阴道炎是妇女的常见多发病,而金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌是阴道炎常见的病原体。本试验采用小鼠构建阴道炎模型,因小鼠体型较小,故直接给以外源性的雌激素造成其假发情状态,导致小鼠的阴道黏膜糖原分泌量增加,从而有利于致病菌生长[3]。感染时,采用了手术吸收性止血海绵载致病菌接种于动物阴道内,因手术吸收性止血海绵能直接吸附于动物阴道内,同时可留在动物体内不必取出,自然消化,防止了菌液从阴道内外溢或堵塞阴道口的棉球吸附菌液而获得满意的感染效果。
试验结果表明,益生菌慕斯洗液对小鼠阴道黏膜实验性金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌混合感染具有较好疗效,为其临床治疗细菌性阴道炎提供了理论基础。
参考文献
赵敬军, 沈永年, 陈伟,等. 白念珠菌性阴道炎动物模型的构建[J]. 中华皮肤科杂志, 2002, 35(005):346-348.
林彩, 李英衢. 诺氟沙星栓对大鼠细菌性阴道炎动物模型疗效观察[J]. 中国抗生素杂志, 1997, 022(001):71-73.
Fidel P L,Cutright J,Steele C . Effects of Reproductive Hormones on Experimental Vaginal Candidiasis[J]. Infection and Immunity, 2000, 68(2):651-657.