吉林省中医药学校 吉林长春 130021
摘要:观察五味子提取物对小鼠免疫功能的影响。试验设12.5、25、75mg/kg·BW
及对照组,连续灌胃小鼠30d,进行ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验(MTT 法)、二硝基氟苯诱导的小鼠 DTH 实验(耳肿胀法)、抗体生成细胞检测(Jerne 改良玻片法)、血清溶血素的测定(血凝法)、小鼠碳廓清实验、NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶测定法)。结果显示,经口给予小鼠不同剂量的五味子提取物
30d,高剂量组小鼠的淋巴细胞转化能力,中、高剂量组小鼠溶血空斑数、抗体积数、高剂量组小鼠的碳廓清吞噬指数、腹腔巨噬细胞对鸡红细胞吞噬指数均显著高于阴性对照组(P<0.05)。表明五味子提取物能增强小鼠免疫力。
关键词:五味子; 免疫力;小鼠
五味子(Schisandra)为木兰科多年生落叶木质藤本植物北五味子和南五味
子(华中五味子)的成熟果实,味酸、性温,归肺、肾、心经,具有敛肺滋肾、生
精敛汗、涩精止泻、宁心安神之功效[1]。木脂素为五味子的主要活性成分[2],现代研究表明五味子有较好的增强免疫力的功效[3-4],本试验观察了五味子醇提物对小鼠免疫功能的影响。
1材料和方法
1.1样品 五味子提取物(实验室自制,经60%乙醇提取2次、过滤、浓缩、喷雾干燥而得,提取比例7:1,主要含五味子醇甲)。
1.2 实验动物 240只SPF级雄性昆明种小鼠,体重为18~22g。
1.3剂量与分组 小鼠按体重随机分成6大组,每大组40只小鼠,分别进行各项免疫试验,每大组又分为4组,样品低、中、高剂量组及阴性对照组,每组10只小鼠。样品低、中、高剂量组分别为12.5、25、75mg/kg·BW,将五味子提取物用纯化水配置成不同浓度的受试物液。按20mL/kg.BW的体积灌胃,阴性对照组予以等体积的纯化水,每天灌胃一次,连续灌胃30d。
1.4 实验项目 ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验(MTT 法)、二硝基氟苯诱导的小鼠 DTH 实验(耳肿胀法)、抗体生成细胞检测(Jerne 改良玻片法)、血清溶血素的测定(血凝法)、小鼠碳廓清实验、NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶测定法)。
1.5 实验数据统计 应用SPSS统计软件进行方差分析统计处理。
2 试验结果
2.1 五味子提取物对小鼠体重的影响。实验期间样品各剂量组的小鼠体重、小鼠的体重增长与阴性对照组间比较,差异均无显著性(P>0.05)。 说明五味子提取物对小鼠体重无不良影响
2.2 五味子提取物对小鼠免疫器官脏器/体重比值的影响
由表1可见,经口给予小鼠不同剂量的五味子提取物30d,小鼠的胸腺/体重及脾脏/体重比值与阴性对照组比较,均无显著性差异(P>0.05)。
表1五味子提取物对对小鼠的免疫器官脏器/体重比值(х±S)的影响
组别 | 只数 | 胸腺/体重,% | 脾脏/体重,% |
阴性对照组 | 10 | 0.188±0.012 | 0.395±0.041 |
12.5mg/kg | 10 | 0.192±0.013 | 0.403±0.052 |
25mg/kg | 10 | 0.206±0.016 | 0.408±0.038 |
75mg/kg | 10 | 0.210±0.014 | 0.415±0.043 |
2.3 五味子提取物对小鼠的细胞免疫的影响
由表2可见,高剂量组小鼠的淋巴细胞转化能力高于阴性对照组,差异具有显著性(P<0.05)。各剂量组小鼠左右耳片重量差值与对照组比较均无显著性(P>0.05)。
表2五味子提取物对对小鼠细胞免疫的影响
组别 | 只数 | 淋巴细胞增值 能力(OD 值) | 左右耳片重量差值,mg |
阴性对照组 | 10 | 0.104±0.117 | 9.11±1.22 |
12.5mg/kg | 10 | 0.115±0.090 | 10.26±1.16 |
25mg/kg | 10 | 0.128±0.0104 | 11.18±1.07 |
75mg/kg | 10 | 0.165±0.088* | 12.27±1.29 |
2.4 五味子提取物对小鼠的体液免疫的影响
由表3可见,中、高剂量组小鼠溶血空斑数、抗体积数均显著高于阴性对照组(P<0.05,P<0.01)。
表3五味子提取物对小鼠体液免疫的影响
组别 | 只数 | 溶血空斑数 (1×10/106 脾细胞) | 抗体积数 |
阴性对照组 | 10 | 146.2±33.5 | 155.4±12.4 |
12.5mg/kg | 10 | 158.1±38.3 | 170.3±15.7 |
25mg/kg | 10 | 182.6±34.2* | 188.6±17.5* |
75mg/kg | 10 | 211.5±32.8** | 198.7±14.6* |
2.5 五味子提取物对小鼠的单核-巨噬细胞吞噬功能的影响
由表4可见,经口给予小鼠不同剂量的五味子提取物30d,高剂量组小鼠的碳廓清吞噬指数、腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率及吞噬指数显著高于阴性对照组(P<0.05)。
表4五味子提取物对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响
组别 | 只数 | 碳廓清吞 噬指数 | 巨噬细胞吞噬鸡红细胞 吞噬指数 |
阴性对照组 | 10 | 5.16±0.15 | 0.38±0.03 |
12.5mg/kg | 10 | 5.77±0.18 | 0.41±0.04 |
25mg/kg | 10 | 6.16±0.23 | 0.45±0.06 |
75mg/kg | 10 | 6.90±0.19 * | 0.52±0.05 * |
2.6 五味子提取物对小鼠的NK细胞活性的影响
由表5可见, 经口给予小鼠不同剂量的五味子提取物30d,各剂量组小鼠的NK细胞活性与阴性对照组比较均无显著性(P>0.05)。
表5五味子提取物对小鼠NK细胞活性的影响
组别 | 只数 | NK细胞活性 |
阴性对照组 | 10 | 22.11±4.63 |
12.5mg/kg | 10 | 24.54±4.77 |
25mg/kg | 10 | 26.62±5.25 |
75mg/kg | 10 | 29.38±6.11 |
本实验结果显示,经口给予小鼠不同剂量的五味子提取物30d,高剂量组小鼠
的淋巴细胞转化能力,中、高剂量组小鼠溶血空斑数、抗体积数、高剂量组小鼠的碳廓清吞噬指数、腹腔巨噬细胞对鸡红细胞吞噬指数均显著高于阴性对照组(P<0.05)。表明五味子提取物可增强小鼠体液免疫,单核-巨噬细胞吞噬功能,具有增强免疫力作用。
参考文献:
[1] 张弢,姚凝,等.甘肃产华中五味子对实验性肾阴虚型雌性小鼠卵巢组织超氧化物歧化酶、活性氧的影响[J].中国中医药信息杂志,2006,2(13):33-41.
[2] 胡央杰,陈建真,等.南、北五味子的化学成分和鉴别方法研究进展[J].现代中药研究与实践,2008,22(4):59-62.
[3] 高晔,徐美术,等.五味子提取物对小鼠免疫性肝损伤保护作用的实验研究[J].中国中医药科技,2003,10(3):133.
[4] 李岩,曲绍春,等.北五味子粗多糖对环磷酰胺所致小鼠免疫功能低下的保护作用[J].白求恩医药大学学报,1995,21(6):583-585.
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