生物技术在植物检疫检测中的应用体现

生物技术在植物检疫检测中的应用体现

李昂

上海海关动植物与食品检验检疫技术中心

摘要：近些年来，随着我国生物技术水平的不断发展进步，生物技术检测人员通过对传统的生物技术不断改革创新，从而分划出免疫荧光技术、斑点免疫技术、核酸技术等等技术，从而可以有效的改善植物检疫检测带来的效果。同时生物技术人员通过对植物检疫检测技术进行简化完善，从而可以有效的提高植物检疫检测技术效果和质量，为检疫检测技术奠定了基础。本文摘要通过对生物技术中的免疫技术和核酸技术进行分析研究以及对生物技术对植物检疫检测中带来的效果进行分析研究。

关键词：生物技术；植物检疫检测；应用体现 

1、免疫技术

免疫技术主要分为酶联免疫法、免疫荧光技术、斑点免疫法、免疫电镜技术、免疫染色标记技术等等技术，本文主要通过对上述说提及到的免疫技术进行简单的分析研究，具体的分析研究内容如下：

1.1酶联免疫法

酶联免疫法全称为酶联免疫吸附技术，主要是对植物病毒、植物真菌进行检测，并且针对植物存在的病毒、真菌进行控制。其中，最常见的就是通过利用酶联免疫法对土壤中的大豆疫霉菌进行检疫，从而可以有效的判断大豆根茎组织是否具有病毒、真菌。土壤中的大豆疫霉菌将会以孢子、菌丝的状态附着在大豆根茎部分。因此，生物技术人员需要通过对土壤进行灌水，从而可以有效的冲刷土壤中的疫霉游动孢子，这种方式在检测腐霉具有一定的效果。生物技术研究人员在对花生、翠菊、桃花等植物也采取酶联免疫法技术，可以有效的检测土壤、水质总的细菌，检测效果十分明显。另外，酶联免疫法技术还可以用在检测水稻条斑性病细菌，生物技术研究人员通过观察酶联免疫法所产生的颜色化学反应，化学反应颜色随着病毒的浓度而变化，病毒浓度越高，化学反应颜色越深^[1]。

1.2免疫荧光技术

免疫荧光技术主要是通过以抗体的形式来对植物进行检疫，可以对植物的组织、种子、土壤等部位存在的细菌和真菌进行监测，并且，生物技术研究人员通过利用免疫荧光技术，可以有效的监测出菜豆中存在的萎蔫真菌，其检验结果正确率可以高达100%，由此可以看出免疫荧光技术在对植物土壤根部存在的细菌、真菌等孢子具有较明显的效果，可以及时的鉴定植物组织中存在 孢子、菌丝情况。另外，免疫荧光技术又分为直接免疫荧光技术和间接免疫荧光技术，而间接免疫荧光技术可以将荧光素与免疫荧光显微镜相结合，从而可以有效的提高植物检疫的准确率。虽然，免疫荧光技术具有较高的准确率，但由于设施设备价格过于昂贵，在实验操作过程中，又十分消耗时间，极容易受到植物和土壤自身荧光的影响，从而导致免疫荧光技术在操作过程中十分困难^[2]。

1.3斑点免疫法

斑点免疫法技术是一种新兴技术，主要是通过利用血清学相关知识，根据酶标记的抗体将硝酸纤维素膜进行结合，同时加入底物溶液后，形成具有色斑点的免疫技术方法。斑点免疫学已经应用在植物病毒的检测工作中，生物技术人员通过利用斑点免疫性对香石竹进行检测，可以检测出香石竹中具有香石竹环斑病毒；对马铃薯组织培苗中可以检测中马铃薯培养皿中含有马铃薯卷叶病毒、烟草花叶病毒、烟草环斑病毒等等。斑点免疫技术操作方式较为简单，检测手法较快，可以有效的长期保持植物样本。由于斑点免疫技术属于一项血清学技术，因此，生物技术研究人员在对植物进行检疫时，需要对植物组织进行切割，使血清与硝酸纤维素膜完全接触后，通过对氧化物酶进行标记，从而来对植物抗原进行判断。根据，生物技术检测人员长时间的观察，可以发现斑点免疫检测技术操作便捷、简单，所检测的数据具有一定的真实性和准确性，试验期间所使用的血清可以反复重复使用，适用于植物检疫检测的方法之一^[3]。

2、核酸技术

核酸技术全称是核酸杂交技术，是通过对植物抗体存在的免疫方式进行分析研究，并且核酸杂交技术具有一定的灵敏度，植物检疫检测数据具有一定的真实性和准确性，可以有效的提高植物检疫检测的工作效率。核酸杂交技术主要由核酸探针、RFLP技术以及PCR技术相组成，本文主要通过对这三种技术方式进行简单的分析研究。

2.1核酸探针

核酸探针主要是指通过采取标记的方式来对核酸序列中存在的寡聚核苷酸进行检测以及互补出相对应的核苷酸。核酸探针技术在检测兰花病毒、香石竹环斑病毒、玉米丛矮病、马铃薯纺锤块茎类病毒等等病毒、真菌的检测具有明的效果。核酸探针技术主要是通过在硝酸纤维膜或者尼龙膜上注射少许的核酸，同时将硝酸纤维膜或者尼龙膜放入特异性探针的杂交液中，放置一段时间后，将硝酸纤维膜或者尼龙膜拿出，通过酶标颜色的变化来对比出病菌的状态。核酸探针技术逐渐趋于商业化，并且已经广泛应用在植物病毒、菌原体的检测工作中^[1]。

2.2RFLP技术

RFLP技术在对植物检疫过程中，耗时较长同时检测方式较为复杂。但在分析植物种群结构和种群遗传变异情况具有明显的作用，RFLP技术主要是通过获取植物组织从而提取植物的DNA，利用限制性内切酶来对植物DNA进行切割，同时将切割的片段采取凝胶电泳分离技术，将片段进行染色，最后进行标记、探针。RFLP技术主要是适用于鉴定病原物种、小型生理物种等等病毒、真菌

^[2]。

2.3PCR技术

PCR技术主要是通过利用对植物DNA进行体外扩增的方式，来将植物DNA双链转变为单链，同时将寡聚合核苷酸与DNA相结合，在经过多次循环后，将DNA所具备的特异性能扩增数倍，可以有效的提高DNA分子性能。PCR技术是一种较为简单、便捷、快速的检测技术，并且已经在检测植物细菌、病毒、真菌等有毒物质上起到了明显的作用。但由于PCR技术所需的设施设备过于昂贵，无法满足在机场、车站、码头等检验场所使用^[3]。

3、结束语

虽然，生物技术在对植物检疫检测过程中存在着一些问题，需要生物技术研究人员不断的改进、完善，但生物技术仍有许多优点，例如：具有一定的高效性、准确性、灵敏性、快速性等都，可以有效的提高生物技术人员的工作效率和工作质量，在各个口岸严格把控外来物种入侵，从而有效的避免我国生态环境遭到破坏，带来经济损失。

参考文献：

[1]赵红梅.生物技术在植物检疫检测中的运用[J].中国林业产业,2016(8).

[2]白林云.探讨植物检疫中无损检测技术进展与应用[J].生物技术世界, 2015(9):232-232.

[3]金光耀,庄黎萍.分子生物学检测技术在我国进出境植物检疫中的应用及展望[J]. 安徽农业科学,2017,45(2):100-102.