多重耐药肺炎克雷伯菌耐药表型及医院感染控制策略探讨

多重耐药肺炎克雷伯菌耐药表型及医院感染控制策略探讨

胡卫敏

陕西中医药大学附属医院 检验科

摘要:目的：深入分析多重耐药肺炎克雷伯菌（MDRKP）耐药表型，同时制定控制医院感染策略，为后续工作中能够预防和控制医院感染提供参考。方法：共计收集22株MDRKP临床分离株，对其进行分子分型，分析其耐药表型，同时制定医院感染控制策略。结果：22株MDRKP对临床广泛应用的抗菌药物均存在耐药性，PFGE共分为8个谱型，K3为优势谱型，其次为K4，K5,K7,同源性≥80%中ICU数据为57.14%（4/7），呼吸内科为40%（2/5），总计81.82%（18/22）。

结论：MDRKP呈现同源分布，具有同源爆发风险，故应加强细菌耐药监测和控制医院感染策略。

关键词:MDRKP；耐药表型；医院感染；控制策略

肺炎克雷伯菌是医院感染的致病菌之一，伴随着广谱抗菌药物，如：β-内酰胺类药物、碳青霉烯类药物的临床广泛应用，已经出现了极其严重的多重耐药性，即多重耐药肺炎克雷伯菌（multidrug resistant klebsiella pneumonia，简称：MDRKP）,就美罗培南和亚胺培南而言，2005年多重耐药性自2.9%和3.0%到2017年的24.0%和20.9%，耐药数据提升了8倍之多^[1]，形势非常严峻，肺炎克雷伯菌能够在医院内环境中存活，30%医院感染是通过环境、医护人员手得以传播，并迅速扩散，故了解肺炎克雷伯菌的定植、传播特征，对防控医院感染意义深远。基于此，特分离出22株MDRKP进行研究，实施同源性鉴定，分析其传播途径的同时制定相应的控制策略，如下。

1资料与方法

1.1菌株来源

22株肺炎克雷伯菌来自我院9个科室，分别通过脓液、痰、尿液、血液等标本培养，分别为7株呼吸内科，4株ICU，2株感染科，2株急诊科，1株普外科，1株泌尿科，2株神经内科，2株脑外科，1株消化内科。

1.2药敏试验

将分离后的细菌进行微生物鉴定以及药敏试验，并将抗生素（三类或三类以上）的MDRKP行低温保存（-80℃）。

1.3脉冲场凝胶电泳、聚类分析

将低温保存的细菌培养过夜，并制作成4麦氏浊度菌悬液以及金琼脂糖凝胶（1%），制作后的凝胶加入细菌裂解液（含有蛋白酶K）行消化裂解，温度：54℃，转速：130r/min，孵育时间：3h。酶切24h（XbaI37℃）。琼脂糖制备（1%），并冷却后上样，电游时间为20h，EB染色，时间为30min，脱色4h后行拍照，所得的图像进行检测并分析。

1.4判定指标

将Dice系数≥80%^[2]，可认定为具有相关基因型，则同源菌株，采用谱行编号，如：K1，K2，K3……。

1.5统计学方法

SPSS25.0展开详细分析，采用（%）体现，x²检验如P值＜0.05，为有统计学意义。

2结果

2.1抗生素耐药情况

MDRKP对左氧氟沙星、头孢吡肟、头孢唑林、哌拉西林、氨苄西林的耐药率高达100.0%；对环丙沙星、头孢他啶、头孢噻肟、环丙沙星为95.45%；对庆大霉素和头孢西丁为90.91%，亚胺培南为86.36%，表1。

表1 MDRKP抗生素耐药情况（株，%）

2.2 PFGE谱型分布

22株共获取8个谱型，K3为优势谱型，其次为K4，K5,K7,（K1、K2、K6、K8），表2。同源性≥80%中ICU数据为57.14%（4/7），呼吸内科为40%（2/5），总计81.82%（18/22）。

表2 PFGE谱型分布情况（株，%）

3讨论

肺炎克雷伯菌是导致患者在院内发生死亡的主要病原菌之一，本次通过对22株MDRKP与临床广泛应用的抗生药物12种进行研究发现，对常用抗菌药物均存在耐药性，只有多粘菌素E依然敏感性佳，为此对其进行监测非常重要。通过MORKP分布情况来看，局部流行现象非常严重，从菌株来源结果提示：肺炎克雷伯菌呈现散发形式发展；从药敏试验结果提示：不同类别抗生素耐药情况非常严峻；从PFGE和聚类数据提提示：同一菌株能够在呼吸内科、神经内科、ICU、感染科内相互传播；PFGE分析中相同病区有多个克隆，提示：来源不同，而同一克隆存在不同科室，提示：各个科室的医生和患者相互转诊所引发。为此该数据充分证明，多重耐药菌株的出现，在临床用药选择提升了难度，只有加强对细菌耐药的监测，做好院内感染控制措施，合理应用抗菌药物，方能减少多重耐药菌株的发生。首先做好多重耐药菌监测工作，监测非常依赖病原微生物检验结果，为此各个科室应及时送检病原学标本，做到及时发现，对出现的多重耐药菌株应即刻上报，医院感染科室应对多重耐药菌株感染分布情况及时向各个科室反馈，当各个科室接到多重耐药菌株报告后，应及时做好防控措施。严格执行隔离、消毒措施，隔离措施采用同病原同室隔离方案，对于存在开放性伤口或者免疫能力抑制的患者应做好隔离，同时做好隔离标识提醒工作，在治疗和护理工作中尽量减少人员出入，做好医护人员专人固定工作。严格遵循手部卫生规范，当接触患者后、接触感染环境后，应及时脱掉手套，进行手部消毒。同时在护理存在伤口的患者，应做好个人防护之外，接触粪便、痰液、引流液、血液、粘膜等操作必须佩戴手套。加强医院环境卫生管理，对医疗设备、物体表面、地面清洁消毒工作，对可能发生多重耐药菌感染后，应增加消毒频率；做好采集标本防渗透运送工作；加强对医疗废物的管理力度。对治愈患者（两次培养结果为阴性），方能解除隔离，同时做好终末消毒工作。对多重耐药菌感染患者实施手术前，必须明确标明，术后进行严格的终末处理，一旦以上防控措施，传播风险依然存在，应停止收诊患者。

参考文献

[1]肖启国,汤美华.肺炎克雷伯菌在某院医院内感染中的分布及耐药性分析[J].检验医学与临床,2020,17(12):1754-1757.

[2]徐刚,王益群,倪笑媚.多重耐药肺炎克雷伯菌肺部感染的抗感染治疗新策略[J].中国微生态学杂志,2018,30(10):1169-1172.