黑龙江省疾病预防 控制中心, 黑龙江 哈尔滨 150030
【摘要】目的:初步探讨不同剂量虾青素银杏叶胶囊对小鼠免疫功能的影响。方法:通过经口灌胃方式给予小鼠不同剂量虾青素银杏叶胶囊30天,进行小鼠淋巴细胞转化试验、迟发型变态反应试验、抗体生成细胞检测试验、血清溶血素试验(半数溶血值HC50测定)、碳粒廓清试验、巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验、NK细胞活性试验。结果:虾青素银杏叶胶囊细胞免疫、体液免疫和NK细胞活性三个方面结果为阳性。结论:虾青素银杏叶胶囊能够提高小鼠免疫功能。
【关键词】虾青素;银杏叶;免疫功能
虾青素是一种类胡萝卜素,可以清除硫化物、二硫化物等物质,具有很强的抗氧化功能。银杏叶具有敛肺,平喘,活血化瘀等功效,是一种药用价值很高的植物。本研究应用两种物质组方制成的合剂进行实验,对其免疫功能进行研究。
1材料和方法
1.1材料
受试物由某公司提供。主要试剂包括:刀豆蛋白A(ConA)、补体(豚鼠血清)、鸡红细胞、都氏试剂和YAC-1细胞等。
1.2动物
120只SPF级、雄性、体重18-22g的ICR小鼠由长春市亿斯实验动物技术有限责任公司提供。
1.3剂量选择与受试物给予方法
将120只小鼠分为4个试验组,每个免疫试验组设三个剂量组:高剂量组为0.4g/kg·BW、中剂量组为0.27g/kg·BW、低剂量组为0.13g/kg·BW和一个阴性对照组。免疫一组进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验和迟发型变态反应试验;免疫二组进行半数溶血值测定和抗体生成细胞检测试验;免疫三组进行ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验和NK细胞活性测定。三个剂量组动物分别给予不同浓度受试物,阴性对照组给予相应体积蒸馏水。各组动物均采用经口灌胃方法、按20mL/kg·BW体积连续灌胃30天后,进行免疫学实验。
1.4实验方法
小鼠淋巴细胞转化试验、迟发型变态反应试验(耳肿胀法)、抗体生成细胞检测(PFC)试验、血清溶血素试验(半数溶血值HC50测定)、碳粒廓清试验、巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验、NK细胞活性试验1.5实验数据统计均按《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)进行。
1.5数据统计
应用Stata统计软件对各实验数据结果进行统计分析。
2结果
2.1虾青素银杏叶胶囊对小鼠细胞免疫功能影响
表 1虾青素银杏叶胶囊小鼠细胞免疫实验结果()
组别 (g/kg·BW) | 动物数 (只) | 淋巴细胞增殖能力 | 右、左耳重之差 (g×10-3) |
阴性对照组 | 10 | 0.038±0.0159 | 9.33±1.63 |
0.13 | 10 | 0.090±0.0555 | 9.79±1.57 |
0.27 | 10 | 0.097±0.0431** | 10.24±1.40 |
0.4 | 10 | 0.082±0.0161** | 9.49±1.37 |
注:**与阴性对照组比较有显著性差异(P<0.01)。
由表1可见,小鼠淋巴细胞转化试验高、中剂量虾青素银杏叶胶囊与阴性对照组比较,有显著性差异(P<0.01,P<0.01)。说明虾青素银杏叶胶囊能够增强细胞免疫功能。
2.2虾青素银杏叶胶囊对小鼠体液免疫功能的影响
表 2虾青素银杏叶胶囊对小鼠体液免疫实验结果()
组别 (g/kg·BW) | 动物数 (只) | 空斑数(/106脾细胞) | HC50 |
阴性对照组 | 10 | 247.5±60.15 | 280.7±7.38 |
0.13 | 10 | 298.5±45.16 | 285.7±11.21 |
0.27 | 10 | 314.5±72.70* | 286.7±9.10 |
0.4 | 10 | 316.0±57.73* | 290.6±9.20 |
由表2可见,小鼠抗体生成细胞检测实验,高、中剂量组与阴性对照组比较,均有显著性差异(P<0.05,P<0.05)。即虾青素银杏叶胶囊能够增强小鼠抗体生成细胞功能。
2.3虾青素银杏叶胶囊对小鼠单核-巨噬细胞功能的影响
表 3虾青素银杏叶胶囊对小鼠单核-巨噬细胞功能的影响()
组别 (g/kg·BW) | 动物数 (只) | 吞噬指数 | 吞噬百分率 (%) | 吞噬指数 |
阴性对照组 | 10 | 5.76±0.847 | 40.0±3.77 | 0.79±0.095 |
0.13 | 10 | 6.62±1.376 | 40.7±3.09 | 0.80±0.054 |
0.27 | 10 | 6.15±1.593 | 41.2±4.20 | 0.82±0.128 |
0.4 | 10 | 5.77±1.600 | 41.5±5.22 | 0.82±0.095 |
注:各试验组与阴性对照组比较,均无显著性差异P>0.05。
由表3可见,小鼠抗单核-巨噬细胞实验,各剂量组与阴性对照组比较,均无显著性差异(P>0.05)。即虾青素银杏叶胶囊对小鼠单核-巨噬细胞功能无影响。
2.4虾青素银杏叶胶囊对小鼠NK细胞活性的影响
表 4虾青素银杏叶胶囊对小鼠NK细胞活性的影响()
组别 (g/kg·BW) | 动物数 (只) | NK细胞活性 (%) |
阴性对照组 | 10 | 32.93±7.719 |
0.13 | 10 | 36.91±9.956 |
0.27 | 10 | 34.38±2.696 |
0.4 | 10 | 38.84±3.358* |
注:*与阴性对照组比较有显著性差异(P<0.05)。
由表4可见,虾青素银杏叶胶囊高剂量组NK细胞活性与阴性对照组比较有显著性差异(P<0.05)。虾青素银杏叶胶囊对NK细胞活性有增强作用。
3讨论
免疫功能是机体对疾病的抵抗能力,免疫系统通过固有免疫(单核-巨噬细胞体统、NK细胞体统)和适应免疫(细胞免疫、体液免疫)执行免疫防御、免疫自稳和免疫监视作用[1],是机体保持健康的重要防护系统。以往均是对虾青素银杏叶两种物质的单独研究[2,3],本研究是以两种物质的合剂为研究对象,对合剂是否均有调节免疫功能、通过何种途径调节免疫功能进行研究。
本研究结果显示虾青素银杏叶胶囊能够提高淋巴细胞转化功能,能够增强抗体生成细胞功能,增强NK细胞活性。说明青素银杏叶胶囊能够通过增强细胞免疫、体液免疫和NK细胞活性三种途径增强机体免疫功能。即此种配伍的虾青素银杏叶合剂具有增强免疫功能作用。
NK细胞不同于T、B细胞,是无需先致敏即可杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞的淋巴细胞[4]。本次研究显示虾青素银杏叶胶囊能够增强NK细胞活性,后续可针对涉NK细胞免疫作用进行相关研究。
参考文献
[1]曹雪涛.医学免疫学[M].人民卫生出版社,2018.07
[2]张凯淇,于泽,刘晓倩,刘桐彤,王琳雅,臧渤煦.浅谈虾青素的生理功能及其应用研究[J].现代食品,2021(17):43-46.
[3]李倩,汤鑫磊,许江昊,姜松松.银杏叶中功能因子及提取工艺研究进展[J].美食研
究,2021,38(03):61-66.
[4]郑剑玲.病原生物与免疫学基础[M].中国医药出版社,2016.02
作者介绍:王明秋(1978-),女,副主任医师,硕士,主要从事卫生毒理工作。