HE染色两次分化法对送检病理样本切片完整率及染色满意度的影响

HE染色两次分化法对送检病理样本切片完整率及染色满意度的影响

裴谦凤 胡双烨 何婷

成都市龙泉驿区妇幼保健院 病理科 四川成都 610100

摘要：目的 分析HE染色两次分化法对送检病理样本切片的影响。方法 本次研究对象为本院82例病理检验患者，时间2021年02月-2022年02月，随机将其均分为对照组41例，行传统HE染色法，观察组41例，行HE染色两次分化法，比较两组检验效果。结果 观察组的染色满意度和病理样本切片完整率均明显高于对照组（P＜0.05）。 结论 在病理检验过程中采取HE染色两次分化法，能够显著提升染色满意度和切片完整率。

关键词：HE染色；两次分化法；病理检验

当下医疗技术持续发展，疾病诊断技术也随之提升，就众多诊断方式而言，病理诊断属于金标准，具有更高的准确性，有助于为疾病临床诊治提供信息依据，强化临床疗效。在以往病理制片中，多采取传统HE染色法，该方式与病理检验发展前景不符，为此，需要引入更先进化的技术手段^[1]。在HE染色时最关键的环节为病理细胞染色是否成功，分化是否良好。本次研究以病理检验患者为对象，分析HE染色两次分化法的应用效果。

1 资料和方法

1.1一般资料

本次研究对象为本院82例病理检验患者，时间2021年02月-2022年02月，随机将其均分为对照组41例，年龄为18-65岁，平均年龄（43.18±3.89）岁；观察组41例，年龄为19-66岁，平均年龄（43.76±4.03）岁。两组一般资料（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法

1.2.1取材方法

通过手术室获取到器官组织或者大块组织的病理标本，通过内窥镜获取到穿刺学标本以及细胞学标本。医务人员在取材时需要确保动作准确、迅速，为病理组织切片完整性和质量提供保障。

1.2.2染色方法

选取试剂：500mL苏木素染色液，成品；500mL醇溶性伊红，1%浓度；500mL盐酸乙醇溶液，1%浓度；500mL水溶液，500mL碳酸锂饱和水溶液；70%浓度乙醇，500mL；90%浓度乙醇，500mL；100%浓度乙醇，1000mL。选取工具：采取1个搪瓷染色缸，口径为12cm，作用为放置苏木素染色液；9个磨口玻璃染色缸，口径为12cm，若干个不锈钢染色架，30片装载玻片。观察组行HE染色两次分化法，操作步骤主要为：①获取石蜡切片，3-4μm厚，对其展开常规脱蜡处理和脱水处理。②将室温控制在高于30℃，采取苏木素染色液展开浸染，时间为6-9分钟。将室温控制在低于30℃，对苏木素染色液展开水浴处理，令其温度上升到40℃，然后重复进行浸染，时间为4-6分钟，确保水洗充分。③采取浓度为1%的盐酸乙醇溶液，展开分化处理，共计3次，然后提洗，确保水洗充分。④选取碳酸锂饱和水溶液展开蓝化处理，将时间控制在10秒，确保水洗充分。⑤选取浓度为1%的盐酸乙醇溶液，重复分化，即提洗，确保水洗充分。⑥采取碳酸锂饱和水溶液展开蓝化处理，将时间控制在10秒，确保水洗充分。⑦展开镜检，结果显示病理组织细胞的核膜颗粒以及核染色质清晰，细胞质、肌纤维以及结缔组织等核以外组织，表现出透亮，未显示出蓝色背景色。当出现蓝色背景色时，需要再次应用1%浓度的盐酸乙醇溶液展开分化处理，应用碳酸锂饱和水溶液展开蓝化处理，一直到蓝色背景色消失。⑧采取1%浓度的醇溶性伊红进行浸染，时间为2分钟。⑨选取乙醇，70%-90%浓度，进行分化，共计3次，然后用100%浓度的乙醇浸泡，时间为5分钟。⑩将吹风机调整为热风，将制片吹干，然后调整为冷风，将其吹冷，采取中性树胶，将其封固好。对照组行传统HE染色法：将分化次数降低，其余操作与观察组相同。

1.3观察指标

评价染色满意度：利用光学显微镜展开检查，结果为切片中存在层次分明的细胞核和细胞浆，适度红蓝，着色清晰则为染色满意，反之为染色不满意。评价病理切片完整率：病理切片不存在空洞，完整，外观平整，厚薄均匀，即判定为切片完整，反之为不完整。

1.4 统计学分析

SPSS23.0处理数据，（%）表示计数资料，行 检验，P＜0.05，差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组染色满意度比较

对比染色满意度，观察组明显偏高，P＜0.05。详见表1。

表1 两组染色满意度比较[n(%)]

2.2 两组病理切片完整率比较

对比病理切片完整率，观察组明显偏高，P＜0.05。详见表2。

表2 两组病理切片完整率比较[n(%)]

3 讨论

现阶段临床诊断首选方式即为病理诊断，分化是检验过程中一项至关重要的环节，发生于获取到病理组织切片，采取苏木素染色液处理后，主要应用低浓度酸，对苏木素染色液存在的色素根以及铝化合物产生抑制作用，从而产生蓝色色素。分化剂的功效主要为在针对病理组织展开染色处理后，将过染染料清除。在分化过程中，水、氢离子以及氢氧离子可以在短时间内于分化溶媒中弥散和分化，所以，应着色于应染部分^[2]。一次性分化有可能出现分化不足或者过分化等现象，影响到切片质量。展开大于等于2次的分化处理，能够通过对比染色效果，明确最佳分化程度，可以为醇溶性伊红着色打下良好基础，提升病理切片的清晰度，获取到高质量切片。HE染色两次分化法的实施，能够保证切片的完整性，确保其厚薄均匀，不存在皱褶，无人为改变^[3]。本次研究结果表明观察组的染色满意度和病理样本切片完整率均明显高于对照组（P＜0.05）。说明HE染色两次分化法的应用可以提升病理检验切片质量，促使临床检验顺利展开。

综上，在病理检验过程中采取HE染色两次分化法，能够显著提升染色满意度和切片完整率，具有推广价值。

参考文献：

[1]段瑞敏.分析临床病理诊断中HE染色方法的应用[J].世界最新医学信息文摘（连续型电子期刊）,2020,20(92):110-111.
[2]丁海.改良HE染色病理技术在病理诊断中的应用效果分析[J].中国冶金工业医学杂志,2021,38(2):214-215.

[3]惠新利.HE染色两次分化法在病理制片技术中的应用效果[J].临床医学研究与实践,2019,4(17):105-107.